Summary

معرفة ما يهم : التجسيم غير متحيز في الدماغ البشري غير الرئيسيات

Published: May 14, 2009
doi:

Summary

يمكن للمنظمة التشريحية للدماغ الرئيسيات توفير معلومات هامة في الظروف العادية والمرضية لدى البشر. التجسيم هو أسلوب غير متحيز لبدقة وكفاءة تقدير عدد الخلايا العصبية الكلي (أو غيرها من نوع من الخلايا) في الفضاء مرجعية محددة<sup> 1</sup>.

Abstract

الرئيسيات غير البشرية هي الأنواع الهامة متعدية لفهم وظيفة عادية والمرض عمليات في الدماغ البشري. التجسيم غير منحازة ، وطريقة مقبولة باعتبارها دولة من أحدث طراز لالكمي للكائنات بيولوجية في أقسام الأنسجة<sup> 2</sup> ، تولد بيانات موثوق بها عن هيكلية السمات البيولوجية في الدماغ لدى الثدييات<sup> 3</sup>. المكونات الأساسية للنهج غير متحيز و(منهجية العشوائية) أخذ عينات من هياكل محددة تشريحيا (مسافات المرجع) ، جنبا إلى جنب مع تقدير أعداد وحجم الخلايا والألياف والشعيرات أطوال ، والمناطق السطحية ، وحجم التوزيعات المكانية الإقليمية والكائنات البيولوجية داخل مرجع الفضاء<sup> 4</sup>. من بين مزايا هذه النهج stereological أكثر من الأساليب السابقة هو تجنب كل المصادر المعروفة للخطأ منهجي (غير عشوائية) الناتجة عن الافتراضات الخاطئة ونماذج غير قابلة للتحقق. هذه الدراسة وثائق تطبيق البيولوجي للالتجسيم محوسب لتقدير مجموع السكان الخلايا العصبية في القشرة الأمامية للدماغ القرد الفرفت (<em> Chlorocebus aethiops sabeus</em>) ، بمساعدة من اثنين من البرامج المتاحة تجاريا التجسيم ، وعلوم الحياة وBioQuant Stereologer (الشكل 1). بالإضافة إلى التباين ومقارنة النتائج من كل من وBioQuant<em> Stereologer</em> أنظمة ، فإن هذه الدراسة يوفر بروتوكول مفصلة ل<em> Stereologer</em> النظام.

Protocol

وينبغي أن يتم قبل معالجة الأنسجة وفقا لبيرك وآخرون : الجزء 1. (2009) 5. باختصار ، ينبغي أن الأنسجة perfused جيدا مع بارافورمالدهيد ، غلوتارالدهيد ، أو الفورمالين. ويمكن تحقيق ذلك من خلال نضح transcardial القياسية المستخدمة عاد…

Discussion

التجسيم غير متحيز في دماغ الرئيسيات هي مماثلة لتلك العينات البيولوجية الأخرى. ومع ذلك ، نظرا لحجم الدماغ الرئيسيات ، فمن المستحسن وضع خطة معالجة متأنية منذ نصف الكرة الأرضية واحدة من قرد الفرفت الغلة أكثر من 1200 المقاطع عند شرائح في 50μm. أول نوصي حظر stereotaxically الدماغ إل?…

Acknowledgements

فإن الكتاب أود أن أشكر Ikiel Ptito لدعمه الفني المستمر. NSERC منحة لعضوية البرلمان.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
Stereologer   Stereology Resource Center (Chester, MD) www.disector.com  
Stereology Tool-Kit Stereologer system   BioQuant Life Sciences (Nashville, TN)    
StereoInvestigator   MicroBright Field (Willston, VT)    

Referências

  1. West, M., Slomianka, L., Gundersen, H. Unbiased stereological estimation of the total number of neurons in the subdivisions of the rat hippocampus using the optical fractionator. Aat Rec. 231, 482-497 (1991).
  2. Saper, C. B. Any way you cut it: a new journal policy for the use of unbiased counting methods. J Comp Neurol. 364, 5-5 (1996).
  3. Sterio, D. C. The unbiased estimation of number and sizes of arbitrary particles using the disector. J Microsc. 134, 127-136 (1984).
  4. Mouton, P. R. . Principles and Practices of Unbiased Stereology. , (2002).
  5. Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M. Dissecting the non-human primate brain in stereotaxic space. J Vis Exp. 29, (2009).
  6. Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M. Brain banking: Making the most of your research. J Vis Exp. 29, (2009).
  7. Manaye, K. F., Wang, P., O’Neil, J., Huafu, S., Tizabi, Y., Thompson, N., Ottinger, M. A., Ingram, D. K., Mouton, P. R. Neuropathological Quantification Of Dtg APP/PS1: Neuroimaging, Stereology, And Biochemistry. AGE. 29, 87-96 (2009).
  8. Burke, M. W., Palmour, R. M., Ervin, F. R., Ptito, M. Neuronal reduction in frontal cortex of primates after prenatal alcohol exposure. Neuroreport. 20, 13-17 (2009).
  9. Zangenehpour, S., Burke, M. W., Chaudhuri, A., Ptito, M. Batch immunostaining for large-scale protein detection in the whole monkey brain. J Vis Exp. 29, (2009).

Play Video

Citar este artigo
Burke, M., Zangenehpour, S., Mouton, P. R., Ptito, M. Knowing What Counts: Unbiased Stereology in the Non-human Primate Brain. J. Vis. Exp. (27), e1262, doi:10.3791/1262 (2009).

View Video