Sachant ce qui compte: Stéréologie impartial dans le cerveau des primates non humains
Summary
L'organisation anatomique du cerveau des primates peuvent fournir des indications importantes sur les conditions normales et pathologiques chez l'homme. Stéréologie impartiale est une méthode précise et efficace pour l'estimation du nombre de neurones totale (ou autre type cellulaire) dans un espace de référence donnée<sup> 1</sup>.
Abstract
Le primate non-humain est une espèce importante translationnelle pour comprendre les processus normaux et pathologiques de la fonction du cerveau humain. Stéréologie impartiales, la méthode acceptée que l'état de l'art pour la quantification des objets biologiques dans des coupes de tissus<sup> 2</sup>, Génère des données fiables pour les caractéristiques biologiques de structure dans le cerveau des mammifères<sup> 3</sup>. Les composantes clés de l'approche sont impartiales (systématique aléatoire) d'échantillonnage des structures anatomiquement définis (espaces de référence), combinée à la quantification du nombre de cellules et des longueurs de taille, de fibres et capillaire, surfaces, volumes régionaux et les distributions spatiales des objets biologiques dans le espace de référence<sup> 4</sup>. Parmi les avantages de ces approches par rapport aux méthodes précédentes stéréologiques est l'évitement de toutes les sources connues d'erreur systématique (non aléatoire) découlant de fausses hypothèses et non vérifiables modèles. Cette étude documente une application biologique de stéréologie informatisé pour estimer la population totale des neurones dans le cortex frontal du cerveau de singe vervet (<em> Chlorocebus aethiops sabeus</em>), Avec l'aide de deux programmes stéréologie disponibles dans le commerce, Sciences de la Vie et de BIOQUANT Stereologer (figure 1). En plus de contraste et comparaison des résultats à la fois du BIOQUANT et<em> Stereologer</em> Systèmes, cette étude fournit un protocole détaillé pour la<em> Stereologer</em> Système.
Protocol
Discussion
Stéréologie impartiaux dans un cerveau de primate est similaire à celle des autres échantillons biologiques. Toutefois, étant donné la taille du cerveau des primates, un plan de traitement minutieux est recommandée car un seul hémisphère de l'singe vervet rendements de plus de 1200 sections quand tranché au 50 microns. Premièrement, nous recommandons stéréotaxique bloquant le cerveau en blocs de 1 cm, qui fournit un plan standard de la section entre les blocs et les sujets, minimise coupes partielles en…
Acknowledgements
Les auteurs tiennent à remercier pour son Ikiel Ptito appui technique continu. Subvention du CRSNG au MP.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Stereologer | Stereology Resource Center (Chester, MD) | www.disector.com | ||
| Stereology Tool-Kit Stereologer system | BioQuant Life Sciences (Nashville, TN) | |||
| StereoInvestigator | MicroBright Field (Willston, VT) |
Referências
- West, M., Slomianka, L., Gundersen, H. Unbiased stereological estimation of the total number of neurons in the subdivisions of the rat hippocampus using the optical fractionator. Aat Rec. 231, 482-497 (1991).
- Saper, C. B. Any way you cut it: a new journal policy for the use of unbiased counting methods. J Comp Neurol. 364, 5-5 (1996).
- Sterio, D. C. The unbiased estimation of number and sizes of arbitrary particles using the disector. J Microsc. 134, 127-136 (1984).
- Mouton, P. R. . Principles and Practices of Unbiased Stereology. , (2002).
- Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M. Dissecting the non-human primate brain in stereotaxic space. J Vis Exp. 29, (2009).
- Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M. Brain banking: Making the most of your research. J Vis Exp. 29, (2009).
- Manaye, K. F., Wang, P., O’Neil, J., Huafu, S., Tizabi, Y., Thompson, N., Ottinger, M. A., Ingram, D. K., Mouton, P. R. Neuropathological Quantification Of Dtg APP/PS1: Neuroimaging, Stereology, And Biochemistry. AGE. 29, 87-96 (2009).
- Burke, M. W., Palmour, R. M., Ervin, F. R., Ptito, M. Neuronal reduction in frontal cortex of primates after prenatal alcohol exposure. Neuroreport. 20, 13-17 (2009).
- Zangenehpour, S., Burke, M. W., Chaudhuri, A., Ptito, M. Batch immunostaining for large-scale protein detection in the whole monkey brain. J Vis Exp. 29, (2009).
