Summary

यंत्रवत् गतिशील सेल संस्कृति के लिए microfabricated प्लेटफार्म

Published: December 26, 2010
doi:

Summary

इस प्रोटोकॉल में, हम खड़ी विस्थापित प्रविष्टियाँ जिस पर प्रौद्योगिकी आधारित है microactuator सरणी के निर्माण, और इस आधार प्रौद्योगिकी दोनों दो आयामी और तीन आयामी संस्कृति में उच्च throughput यंत्रवत् गतिशील सेल संस्कृति का संचालन करने के लिए संशोधित किया जा सकता है कि कैसे प्रदर्शित मानदंड.

Abstract

इन विट्रो ऊतक इंजीनियरिंग, दवाओं की खोज या मौलिक कोशिका जीव विज्ञान के अध्ययन के लिए mechanobiological उत्तेजनाओं के संयोजन के लिए सेलुलर प्रतिक्रिया में व्यवस्थित जांच करने की क्षमता वर्तमान bioreactor प्रौद्योगिकियों, जो एक साथ संवर्धित कोशिकाओं के यांत्रिक उत्तेजनाओं के एक किस्म को लागू नहीं कर सकते द्वारा सीमित है. आदेश में इस मुद्दे को संबोधित करने के लिए, हम microfabricated एक उच्च throughput प्रारूप में यांत्रिक उत्तेजनाओं के प्रभाव के लिए स्क्रीन के लिए डिजाइन प्लेटफार्मों की एक श्रृंखला विकसित किया है. इस प्रोटोकॉल में, हम खड़ी विस्थापित पोस्ट जिस पर प्रौद्योगिकी आधारित है, और आगे प्रदर्शन कैसे इस आधार प्रौद्योगिकी दोनों दो आयामी और उच्च throughput यंत्रवत् गतिशील सेल संस्कृति का संचालन करने के लिए संशोधित किया जा सकता है है की एक microactuator सरणी के निर्माण का प्रदर्शन तीन – आयामी संस्कृति मानदंड.

Protocol

ए डिवाइस विवरण और ऑपरेशन उपकरण polydimethylsiloxane (PDMS) में बहुपरत नरम लिथोग्राफी 1 का उपयोग कर निर्मित कर रहे हैं, और एक साथ microfabricated सरणी भर में अलग – अलग सेल संस्कृति स्थानों में यांत्रिक स्थितियों की ?…

Discussion

हालांकि, अवधारणात्मक सरल युक्ति छलरचना करता है कुछ प्रयोगात्मक कौशल और अभ्यास ले. 2D सेल संस्कृति के मामले में विशेष रूप से, डिवाइस में कई परतों के संरेखण चुनौतीपूर्ण, विशेष रूप से एक बड़े क्षेत्र सरणी प…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

हम प्राकृतिक विज्ञान और कनाडा के इंजीनियरिंग रिसर्च काउंसिल और स्वास्थ्य अनुसंधान संस्थान कनाडा (323533-06 CHRPJ), ओंटारियो ग्रेजुएट छात्रवृत्ति कार्यक्रम मुख्यमंत्री, और माइक्रो और नैनो इंजीनियरिंग सिस्टम में कनाडा अनुसंधान अध्यक्षों से वाईएस वित्तीय सहायता स्वीकार करते हैं, और कैस के लिए Mechanobiology में.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
Sylgard 184 PDMS Monomer and Crosslinker Kit   Dow Corning    
SU-8 masters        
Silanization agent: (tridecafluoro-1, 1, 2, 2-tetrahydrooctyl)-1-trichlorosilane   United Chemical Technologies    
Foam pads       Craft supply stores, 1-2 mm thick
Overhead inkjet transparencies   Grand & Toy    
Plexiglass plates        
C-clamp       hardware store
Micromanipulator system   Siskiyou    
Custom-made vaccum mount        
Vision system, Navitar 12x zoom   Navitar    
Connecting tubes   VWR International Clay Adam Intramedic PE190  
Blunt 18G needles   Smallparts.com / Amazon Inc.    
Eccentric diaphragm micropump   Schwarzer Precision SP 500 EC-LC4.5V DC  
Solenoid valves   Pneumadyne S10MM-30-12-3  
Solenoid manifold   Pneumadyne MSV10-1  
Function generator        
3-(trimethoxysilyl) propyl methacrylate   Sigma    
Polyethylene glycol diacrylate 3.4 kDa   Laysan Bio    
Polyethylene glycol 8 kDa   Sigma    
Irgacure 2959   Ciba Specialty Chemicals    
1-vinyl-2-pyrolidinone   Sigma    
Standard cell culture reagents        

Referências

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Citar este artigo
Moraes, C., Sun, Y., Simmons, C. A. Microfabricated Platforms for Mechanically Dynamic Cell Culture. J. Vis. Exp. (46), e2224, doi:10.3791/2224 (2010).

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