기계 다이나믹 셀 문화 Microfabricated 플랫폼
Summary
이 프로토콜에서는, 우리는 기술의 기반이되는 수직 전이 게시물의 마이크로 액추에이터 어레이의 제조 방법 및이 기본 기술이 모두 2 차원 입체 문화에 높은 처리량 기계 역동적인 세포 배양을 실시하도록 수정할 수 있습니다을 증명 패러다임.
Abstract
조직 공학, 약물 발견이나 기본적인 세포 생물학 연구를위한 mechanobiological 자극의 조합을 체외 세포 반응에 체계적으로 조사하는 기능은 동시에 교양 세포에 기계적 자극의 다양한 적용할 수없는 현재의 생물 반응기 기술에 의해 제한됩니다. 이 문제를 해결하기 위해, 우리는 높은 처리량 형식의 기계적 자극의 효과에 대한 화면으로 설계된 microfabricated 플랫폼 시리즈를 개발하였습니다. 이 프로토콜에서는, 우리는 기술을 기반으로, 나아가 이러한 기본 기술이 2 차원과 모두에서 높은 처리량 기계 역동적인 세포 배양을 실시하기 위해 수정할 수있는 방법을 보여줍니다되는 수직 전이 게시물의 마이크로 액추에이터 어레이의 제조 보여줍 세 – 차원 문화 패러다임.
Protocol
Discussion
개념 간단한지만, 장치 제조하지 몇 가지 실험적인 기술과 연습을. 특히 2D 세포 배양의 경우, 장치의 여러 레이어의 정렬은 특히 큰 지역 배열을 통해, 도전하실 수 있습니다. 실질적으로 말해서, 우리는 안정적으로 여러 레이어에 인접 기능 사이의 간격에 허용 오차 50 μm의와 장비를 사용하여 100 % 정렬 성공률을 얻을 수 있습니다. 우리는 또한 성공적으로 15 μm의 같은 낮은 허용 오차와 정렬을 ?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
우리는 YS으로 자연 과학 및 캐나다의 공학 연구 협의회 및 건강 연구의 캐나다 연구소 (CHRPJ 323533-06), 온타리오 대학원 장학금 프로그램 CM하고, 마이크로 및 나노 엔지니어링 시스템에있는 캐나다 연구 의자로부터 재정 지원을 인정 와 CAS에 Mechanobiology 인치
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Sylgard 184 PDMS Monomer and Crosslinker Kit | Dow Corning | |||
| SU-8 masters | ||||
| Silanization agent: (tridecafluoro-1, 1, 2, 2-tetrahydrooctyl)-1-trichlorosilane | United Chemical Technologies | |||
| Foam pads | Craft supply stores, 1-2 mm thick | |||
| Overhead inkjet transparencies | Grand & Toy | |||
| Plexiglass plates | ||||
| C-clamp | hardware store | |||
| Micromanipulator system | Siskiyou | |||
| Custom-made vaccum mount | ||||
| Vision system, Navitar 12x zoom | Navitar | |||
| Connecting tubes | VWR International | Clay Adam Intramedic PE190 | ||
| Blunt 18G needles | Smallparts.com / Amazon Inc. | |||
| Eccentric diaphragm micropump | Schwarzer Precision | SP 500 EC-LC4.5V DC | ||
| Solenoid valves | Pneumadyne | S10MM-30-12-3 | ||
| Solenoid manifold | Pneumadyne | MSV10-1 | ||
| Function generator | ||||
| 3-(trimethoxysilyl) propyl methacrylate | Sigma | |||
| Polyethylene glycol diacrylate 3.4 kDa | Laysan Bio | |||
| Polyethylene glycol 8 kDa | Sigma | |||
| Irgacure 2959 | Ciba Specialty Chemicals | |||
| 1-vinyl-2-pyrolidinone | Sigma | |||
| Standard cell culture reagents |
Referências
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