דגם Murine חדש של מפרצת אבי העורקים תיקון Endovascular
Summary
שינויים היסטולוגית ויוכימי לאחר הרחקת endograft פרצה עדיין אינם ברורים. אנו מתארים מודל חדש של השתלת endograft על פרצה עכברית. באמצעות ניתוח פקיק עם ובלי ממשק persistant מחזור דם זרם, והערכת חומרים ביולוגית endovascular חדש, מודל זה יסייע להבין טוב יותר pathobiology הדרה מפרצת endovascular.
Abstract
הדרה מפרצת endovascular היא טכניקת תוקף כדי למנוע קרע מפרצת. תוצאות לטווח ארוך להדגיש מגבלות טכניקה והיבטים חדשים של מפרצת אב עורקים הבטני הפתופיזיולוגיה (AAA). אין מודל אב העורקים בבטן מפרצת endograft הרחקה זולה ושחזור, אשר יאפשר חקירות עמוקות של AAA לפני ואחרי הטיפול. הרינו מתארים כיצד לגרום, ולאחר מכן להוציא את עם stentgraft כלילית מכוסה מפרצת אב העורקים בבטן בעכברים. המודל הידוע elastase המושרה AAA דווח לראשונה בשנת 1990 1 בחולדה, ולאחר מכן תאר בעכברים 2. אלסטין השפלה מובילה להתרחבות של אב העורקים עם חדירה דלקתית של דופן הבטן ופקיק luminal פנים, התאמה עם AAA האנושי. הדרת endovascular עם stentgraft המכוסה קטן אז הוא ביצע, לא כולל את כל אינטראקציות בין דם במחזור ואת פקיק מפרצת. הדרה מתאימה וpatency stentgraft הואאישר לפני המתת חסד על ידי אנגיוגרפיה חשב עורק התרדמה השמאלי. שליטה חלקית של דיפוזיה elastase עושה פרצת צורה שונה לכל בעלי חיים. קשה ליצור פרצה שתאפשר אורך מתאים של אב העורקים מתחת לפרצה להקדמת stentgraft קלה, ועם צוואר הפרוקסימלי ודיסטלי נאות כדי למנוע endoleaks. המון כישלון יכול לגרום להקדמת stentgraft שלעתים להוביל לקרע אב העורקים בכאב ובצרות כדי לתפור אותו, ונזק אנדותל עם פקקת עורקי אופ הודעה. מתן אספירין לחולדות לפני השתלת stentgraft יורד שיעור כישלון בלי דימום גדול. Clamping זמן מפעיל נויטרופילים, האנדותל וטסיות דם, ועלול להפריע לניתוח ביולוגי.
Introduction
כישורי endovascular התקדמו מאז התיקון הראשון endovascular אב העורקים מפרצת (EVAR) על ידי פארודי ב -1991 3, כמעט מחצית מכל מפרצת בבטן מטופלים כעת על ידי EVAR 4. בניגוד לניתוח, EVAR משאיר פקיק, לא כולל אותו ממחזור הדם מערכתי. מפרצת מתאפיינת במוגלובין פקיק עשיר רב שכבתי, במדיה דקה, וadventitia fibrosed ומודלק. התפקיד המכריע של proteolysis 5 בהתקדמות מפרצת הודגם לפני שלושים שנה 6, 7: מפרצת השק פקיק קשור לקיר דק אב העורקים, תמוגה של אלסטין, צפיפות נמוכה של תאי שריר חלק בכלי התקשורת, ורמה גבוהה של חיסוני תגובת 8,9. adventitial דלקתית, שינויים אלו מצביעים על כך שהפעילות האנזימטית פרוטאוליטים מתרחשת בתוך פקיק, ולא ישירות בקיר אב העורקים.
בנוסף, שכבת luminal של פקיק עשירה בagglutinated האדום הדם cells שחרור המוגלובין. הם עוסקים בעיקר בהיווצרות הפיברין, הפעלת טסיות דם ולגרום להיווצרות תרומבין. לבסוף, פקיק גם גורם t-PA וplasminogen שייר, שמעורבים בפירוק פיברין וגיוס לויקוציטים, בעיקר נויטרופילים. אלה הם 12 פעמים יותר חשובות בפקיק מאשר בדם הזרם 10. נוכחותם קשורה בשיעור גבוה של מטריקס סוג metalloproteinase 8 (MMP-8), MMP-9 וelastase: הם משחררים פרוטאזות סרין פרטנית וסוכני חמצוני הפרו מובילות לזילות של המטריצה הסיבית, וסופו של דבר קיר אב העורקים קרע 9,11 -13.
התערבות מפרצת בחירה מטרה למנוע קרע. EVAR משאיר גם קיר מפרצת ופקק בשלמותה. לפיכך, זלוף מפרצת אבי העורקים בביטחונות (עורקים המותני, עורק mesenteric נחות …), נקרא על שמו endoleak, והוא סיבוך ספציפי של טיפול endovascular 14,15, לפעמים מוביל לקרע ערבN עם endoleaks לחץ הנמוך. יתר על כן, בחולים מסוימים, אין עלייה בקוטר 16 מפרצת. אינטראקציה בין דם במחזור וקיר aneurysmal שומרת על הפעילות הביולוגית פקיק luminal התוך ציינו. לפיכך, endoleaks V סוג, שהוגדר כהרחבה של השק מפרצת ללא endoleak המזוהה, יכול להיות מוסבר על ידי פעילות אנזימטית בתוך פקיק מפרצת.
לא רדיולוגי הדמיה (18FDG-PET סריקה, מיפוי הפעלת טסיות דם, ברזל ניגוד oxyde MRI17) ולא דגימת דם היקפית (MMP-9, microparticles טסיות נגזר, plasmin / מורכב אנטי plasmin) משמשת כדי לחקור את השפעת endovascular על מפרצת אבי העורקים בבני האדם באופן ישיר להעריך הביוכימיים.
בידע שלנו, אין כל מודלים של בעלי חיים הדרה מפרצת ניסיוניים לשחזור וזולים. אחד שינויים זה מאפשר הרחקה ביולוגיות והיסטולוגית מפרצת לפני ואחרי כדי להיחקר.
Protocol
Representative Results
Discussion
שני דגמים של AAA כבר תוארו כבר במעבדה שלנו: xenograft 19 ודגמים מושרה אלסטט מודל elastase 1 הוא דומה ביותר לאדם מפרצת אבי העורקים:. פקיק intraluminal היקפי גדול אז נשלל על ידי תיקון מפרצת endovascular.
Endoleaks הוא סיבוך רגיל של EVAR 14,15. הרבה ש…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
המחברים מבקשים להודות לכריסטין Guesdon (אבוט) למתנות של Stentgrafts.
Materials
| Animals | |||
| Wistar rats | aged from 8 to 9 weeks. Weight range from 350 to 400 g | ||
| Instruments | |||
| Isoflurane anesthesic system | 4,5% at the beginning, then 2% | ||
| Penthobarbital | Ceva sante animale, Libourne, France | ||
| Dissection stereomicroscope | |||
| Steriles gloves | |||
| Microsurgical Steriles instruments | Moria, Antony, France | Needle holder, Forceps, Scissors,Gilbert approximator o 3 Micro clamps | |
| N°40 Silk string | |||
| Prolen 9-0 and 10-0 | Ethicon, Johnson & Johnson, Auneau, France | ||
| Heat-tapered polyethylene tubing | PE 10 | ||
| Syringe infusion pump | |||
| Porcine pancreatic elastase | Sigma, St. Louis, Mo., USA | 550 μl of salin is mixed with 175 μl of elastase | |
| Indeflator | |||
| 9 to 16 mm length, 3 mm diameter coronary PTFE covered stentgraft | Abbott, Abbott Park, Illinois, USA | ||
| C-Arm OEC 9800 | GE Medical Systems, Milwaukee, WI | ||
| Aspegic 1000 mg | Aspirin, Sanofi-Aventis, Paris, France | ||
| Reagent | |||
| Aerane isoflurane 100ML | Baxter | Aerane | |
| Penthobarbital | Centravet | 053pen203 | |
| Silk Suture 4-0 | Fine Science | 18020-40 | |
| Microsurgical steriles instruments | Moria | 9980-9983-9987-204/A-204/D-8148-4877A-4878A | |
| Prolen 9-0 and 10-0 | Ethicon | W2829 – NS2850 | |
| Heat tapered Polyethylene tubing : PE 10 | Bioseb | MRE-010 | |
| Infusion pump | World precision instrument | AL-1000 | |
| Porcine pancreatic elastase | Sigma | E1250-100MG | |
| Indeflator | Longreal | KY025 25 100 | |
| Aspegic 1000mg (Aspirin) | Sanofi-Aventis | 3400931898191 | |
| C-Arm OEC 9800 | General electric. | OEC 9800 | |
| Stentgraft : Jostent | Abbott | 210CG1230 210CG1630 |
Referências
- Anidjar, S., et al. Elastase-induced experimental aneurysms in rats. Circulation. 82, 973-981 (1990).
- Azuma, J., Asagami, T., Dalman, R., Tsao, P. S. Creation of murine experimental abdominal aortic aneurysms with elastase. J. Vis. Exp. (29), e1280 (2009).
- Parodi, J. C., Palmaz, J. C., Barone, H. D. Transfemoral intraluminal graft implantation for abdominal aortic aneurysms. Ann. Vasc. Surg. 5, 491-499 (1991).
- Lees, T., Stansby, G. . The nationalvascular database report, 2009. , (2012).
- Sakalihasan, N., Limet, R., Defawe, O. D. Abdominal aortic aneurysm. Lancet. 365, 1577-1589 (2005).
- Busuttil, R. W., Abou-Zamzam, A. M., Machleder, H. I. Collagenase activity of the human aorta. A comparison of patients with and without abdominal aortic aneurysms. Arch. Surg. 115, 1373-1378 (1980).
- Michel, J. B. Contrasting outcomes of atheroma evolution: intimal accumulation versus medial destruction. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 21, 1389-1392 (2001).
- Vorp, D. A., et al. Association of intraluminal thrombus in abdominal aortic aneurysm with local hypoxia and wall weakening. J. Vasc. Surg. 34, 291-299 (2001).
- Kazi, M., et al. Influence of intraluminal thrombus on structural and cellular composition of abdominal aortic aneurysm wall. J. Vasc. Surg. 38, 1283-1292 (2003).
- Kuijper, P. H., et al. Neutrophil adhesion to fibrinogen and fibrin under flow conditions is diminished by activation and L-selectin shedding. Blood. 89, 2131-2138 (1997).
- Touat, Z., et al. Renewal of mural thrombus releases plasma markers and is involved in aortic abdominal aneurysm evolution. Am. J. Pathol. 168, 1022-1030 (2006).
- Fontaine, V., et al. Role of leukocyte elastase in preventing cellular re-colonization of the mural thrombus. Am. J. Pathol. 164, 2077-2087 (2004).
- Sakalihasan, N., Delvenne, P., Nusgens, B. V., Limet, R., Lapiere, C. M. Activated forms of MMP2 and MMP9 in abdominal aortic aneurysms. J. Vasc. Surg. 24, 127-133 (1996).
- Alsac, J. M., et al. The significance of endoleaks in thoracic endovascular aneurysm repair. Ann. Vasc. Surg. 25, 345-351 (2011).
- Buth, J., Harris, P. L., van Marrewijk, C., Fransen, G. The significance and management of different types of endoleaks. Semin. Vasc. Surg. 16, 95-102 (2003).
- Fransen, G. A., et al. Rupture of infra-renal aortic aneurysm after endovascular repair: a series from EUROSTAR registry. Eur. J. Vasc. Endovasc. Surg. 26, 487-493 (2003).
- van der Vaart, M. G., et al. Application of PET/SPECT imaging in vascular disease. Eur. J. Vasc. Endovasc. Surg. 35, 507-513 (2008).
- Close, B., et al. Recommendations for euthanasia of experimental animals: Part 2. DGXT of the European Commission. Lab. Anim. 31, 1-32 (1997).
- Allaire, E., Guettier, C., Bruneval, P., Plissonnier, D., Michel, J. B. Cell-free arterial grafts: morphologic characteristics of aortic isografts, allografts, and xenografts in rats. J. Vasc. Surg. 19, 446-456 (1994).
- Gawenda, M., Jaschke, G., Winter, S., Wassmer, G., Brunkwall, J. Endotension as a result of pressure transmission through the graft following endovascular aneurysm repair–an in vitro study. Eur. J. Vasc. Endovasc. Surg. 26, 501-505 (2003).
- Delbosc, S., et al. Porphyromonas gingivalis Participates in Pathogenesis of Human Abdominal Aortic Aneurysm by Neutrophil Activation. Proof of Concept in Rats. PLoS One. 6, e18679 (2011).
- Trollope, A., Moxon, J. V., Moran, C. S., Golledge, J. Animal models of abdominal aortic aneurysm and their role in furthering management of human disease. Cardiovasc Pathol. 20, 114-123 (2011).
- Yamaguchi, T., et al. Factors influencing mortality in the rat elastase-induced-aneurysm model. J. Surg. Res. 94, 81-83 (2000).
- von Bruhl, M. L., et al. Monocytes, neutrophils, and platelets cooperate to initiate and propagate venous thrombosis in mice in vivo. J. Exp. Med. 209, 819-835 (2012).
- Smith, P. D. Neutrophil activation and mediators of inflammation in chronic venous insufficiency. J. Vasc. Res. 36, 24-36 (1999).
- Zaragoza, C., et al. Animal models of cardiovascular diseases. J. Biomed. Biotechnol. 2011, 497841 (2011).
- Kuivaniemi, H., Elmore, J. R. Opportunities in abdominal aortic aneurysm research: epidemiology, genetics, and pathophysiology. Ann. Vasc. Surg. 26 (12), 862-870 (2012).
- Schanzer, A., et al. Predictors of abdominal aortic aneurysm sac enlargement after endovascular repair. Circulation. 123, 2848-2855 (2011).
