Un nuovo modello murino di endovascolare aneurisma dell'aorta riparazione

Summary

Modificazioni istologiche e biochimiche dopo aneurisma endograft esclusione sono ancora poco chiari. Descriviamo un nuovo modello di impianto endograft su un aneurisma murino. Attraverso l'analisi trombo con e senza persistente circolazione interfaccia flusso sanguigno, e nuova valutazione biomateriali endovascolare, questo modello vi aiuterà a comprendere meglio endovascolare dell'aneurisma esclusione patobiologia.

Abstract

Endovascolare dell'aneurisma esclusione è una tecnica validata per evitare la rottura di aneurisma. Risultati a lungo termine evidenziano limitazioni di tecnica e nuovi aspetti di aneurisma dell'aorta addominale (AAA) fisiopatologia. Non vi è alcun aneurisma aortico addominale endoprotesi esclusione modello economico e riproducibile, che consentirebbe indagini profonde di AAA prima e dopo il trattamento. Con la presente descriviamo come indurre, e quindi di escludere con una endoprotesi coronariche coperta di un aneurisma aortico addominale in un topo. L'elastasi modello indotta AAA noto fu riportata nel 1990 ¹ in un ratto, poi descritto nei topi ^2. Elastina degradazione porta alla dilatazione dell'aorta con infiltrazione infiammatoria della parete addominale e intra trombo endoluminale, corrispondente con AAA umana. Esclusione endovascolare con endoprotesi piccolo coperto viene quindi eseguita, escluse eventuali interazioni tra la circolazione del sangue e il trombo aneurisma. Esclusione del caso ed endoprotesi pervietà èconfermato prima di eutanasia da parte di un angiografia pensiero la carotide sinistra. Controllo parziale di elastasi diffusione rende aneurisma forma diversa per ciascun animale. È difficile creare un aneurisma, che consentirà un periodo adeguato aorta sotto dell'aneurisma per una introduzione endoprotesi facile e con un'adeguata colletto prossimale e distale per evitare endoleak. Un sacco di fallimento può portare alla introduzione endoprotesi, che a volte portano alla aorta lacrima di dolore e guai a punto, e danno endoteliale con trombosi aortica post operatorio. Dare l'aspirina ai ratti prima dell'impianto endoprotesi diminuisce tasso di fallimento senza emorragia maggiore. Momento di serraggio attiva i neutrofili, endotelio e piastrine, e può interferire con analisi biologiche.

Introduction

Competenze endovascolari hanno progredito da quando il primo endovascolare aneurisma riparazione (EVAR) da Parodi nel 1991 ^3, quasi la metà di tutti gli aneurismi addominali sono ora trattati con EVAR ^4. A differenza di chirurgia, EVAR lascia il trombo, escludendolo dalla circolazione sanguigna sistemica. Gli aneurismi sono caratterizzati da un trombo ricco di emoglobina più strati, un sottile media e una avventizia fibrosed e infiammato. Il ruolo cruciale nella progressione proteolisi ⁵ aneurisma è stata dimostrata trent'anni fa ^{6, 7:} aneurisma sac trombo è associato ad una parete sottile aortica, lisi di elastina, bassa densità di cellule muscolari lisce in media, e un alto livello di immuno -infiammatori reazione avventiziale ^8,9. Questi cambiamenti suggeriscono che l'attività proteolitica enzimatica si verifica all'interno del trombo, piuttosto che direttamente nella parete aortica.

Inoltre, lo strato luminale del trombo è ricco di agglutinato rosso sangue ceLLS rilasciando emoglobina. Essi sono coinvolti principalmente in formazione di fibrina, l'attivazione piastrinica e indurre la formazione di trombina. Infine, trombo induce anche t-PA e plasminogeno di ritenzione, che sono coinvolti nella fibrinolisi e di reclutamento dei leucociti, soprattutto neutrofili. Questi sono 12 volte più importante nel trombo che nel sangue ^10. La loro presenza è associata ad un alto tasso di metalloproteinasi della matrice di tipo 8 (MMP-8), MMP-9 e elastasi: rilasciano serina proteasi granulari e agenti ossidanti pro portano alla degradazione della matrice fibrillare, e in ultima analisi parete aortica rottura ^{9,11 -13.}

Intervento di aneurisma elettivo mira a prevenire la rottura. EVAR lascia sia a parete dell'aneurisma e trombo intatto. Così, aneurisma perfusione da collaterali aortici (arterie lombari, mesenterica inferiore …), è chiamato endoleak, ed è una specifica complicanza del trattamento endovascolare ^14,15, a volte porta alla rottura vigilian con endoleak di bassa pressione. Inoltre, in alcuni pazienti, non vi è alcun aumento di diametro dell'aneurisma ^16. Interazione tra sangue circolante e parete aneurismatica mantiene il citato intra luminale attività biologica trombo. Quindi, Type V endoleak, definita come l'espansione della sacca aneurismatica senza endoleak identificati, possono essere spiegati con l'attività enzimatica all'interno del trombo aneurisma.

Né l'imaging radiologico (scan 18FDG-PET, scintigrafia attivazione piastrinica, ferro ossido contrasto MRI17), né il prelievo di sangue periferico (MMP-9, microparticelle derivati ​​piastrinici, plasmina / complessi anti-plasmina) utilizzati per esplorare l'impatto endovascolare su aneurismi dell'aorta nell'uomo direttamente valutare vie biochimiche.

A nostra conoscenza, non vi è alcun sperimentali modelli animali di esclusione dell'aneurisma riproducibili ed economico. Questo permette aneurisma esclusione modificazioni biologiche ed istologiche pre e post da esplorare.

Protocol

Metodi Il protocollo è stato approvato dal Comitato Etico Bichat-Debré (N ° 2012-15/698-0074). Il modello di perfusione elastasi è stata descritta la prima volta da Anidjar nel 1990 1: aneurisma dell'aorta addominale è indotta dalla perfusione elastasi in ratti maschi Wistar, di età compresa tra 8-9 settimane 250-300 g. Due a 4 settimane dopo, un re-laparotomia viene eseguita, e una 3 mm di diametro ricoperta endoprotesi coronariche è utilizzat…

Representative Results

Aneurisma è fissato in una soluzione di paraformaldeide al 4% durante 24 ore, poi in una Soluzione tampone fosfato fino fissazione in un blocco di resina. Usiamo un HPS (ematossilina Floxina Safran) (Figura 1) colorazione, mostrando guarigione cellule proliferative di tutto il PTFE (Figura 2). Cellule mesenchimali vengono quindi caratterizzati da α-actina colorazione (Figura 3). <img src="/files/f…

Discussion

Due modelli di AAA sono stati già descritti nel nostro laboratorio: xenotrapianto ¹⁹ e modelli indotti elastasi ¹ modello elastasi è il più simile al aneurismi aortici umani:. Un grande trombo endoluminale circolare viene quindi escluso dalla riparazione endovascolare dell'aneurisma.

Endoleak sono un abituale complicanza di EVAR ^14,15. Molte questioni rimangono ancora irrisolti: rottura AAA sono stati descritti con bassi endoleak, e talvolta senza sacc…

Materials

			Animals
Wistar rats			aged from 8 to 9 weeks. Weight range from 350 to 400 g
			Instruments
Isoflurane anesthesic system			4,5% at the beginning, then 2%
Penthobarbital	Ceva sante animale, Libourne, France
Dissection stereomicroscope
Steriles gloves
Microsurgical Steriles instruments	Moria, Antony, France		Needle holder, Forceps, Scissors,Gilbert approximator o 3 Micro clamps
N°40 Silk string
Prolen 9-0 and 10-0	Ethicon, Johnson & Johnson, Auneau, France
Heat-tapered polyethylene tubing	PE 10
Syringe infusion pump
Porcine pancreatic elastase	Sigma, St. Louis, Mo., USA		550 μl of salin is mixed with 175 μl of elastase
Indeflator
9 to 16 mm length, 3 mm diameter coronary PTFE covered stentgraft	Abbott, Abbott Park, Illinois, USA
C-Arm OEC 9800	GE Medical Systems, Milwaukee, WI
Aspegic 1000 mg	Aspirin, Sanofi-Aventis, Paris, France
			Reagent
Aerane isoflurane 100ML	Baxter	Aerane
Penthobarbital	Centravet	053pen203
Silk Suture 4-0	Fine Science	18020-40
Microsurgical steriles instruments	Moria	9980-9983-9987-204/A-204/D-8148-4877A-4878A
Prolen 9-0 and 10-0	Ethicon	W2829 – NS2850
Heat tapered Polyethylene tubing : PE 10	Bioseb	MRE-010
Infusion pump	World precision instrument	AL-1000
Porcine pancreatic elastase	Sigma	E1250-100MG
Indeflator	Longreal	KY025 25 100
Aspegic 1000mg (Aspirin)	Sanofi-Aventis	3400931898191
C-Arm OEC 9800	General electric.	OEC 9800
Stentgraft : Jostent	Abbott	210CG1230 210CG1630