Um novo modelo murino de reparação endovascular de aneurisma da aorta

Summary

Modificações histológicas e bioquímicas após aneurisma endograft exclusão ainda não são claras. Descreve-se um novo modelo de implantação de endoprótese em aneurisma murino. Através da análise de trombo com e sem circulação persistente interface de fluxo de sangue, e nova avaliação biomateriais endovascular, este modelo vai ajudar a entender melhor endovascular pathobiology exclusão do aneurisma.

Abstract

Exclusão do aneurisma endovascular é uma técnica validada para evitar ruptura de aneurisma. Resultados a longo prazo destacar limitações da técnica e novos aspectos de aneurisma de aorta abdominal (AAA) fisiopatologia. Não há modelo de aneurisma da aorta abdominal endograft exclusão barato e reprodutível, o que permitiria que as investigações profundas de AAA, antes e após o tratamento. Vimos por este meio descrever como induzir e, em seguida, para excluir com uma stentgraft coronária coberto de um aneurisma da aorta abdominal em um rato. O modelo AAA bem conhecidos da elastase induzida foi relatada pela primeira vez em 1990, ^uma em um rato, descrito em seguida, em ^dois ratinhos. Elastina da degradação leva à dilatação da aorta com infiltrado inflamatório da parede abdominal e intra-trombo luminal, combinando com AAA humano. Exclusão endovascular com pequeno stentgraft coberto é então realizada, excluindo qualquer interação entre o sangue circulando e os trombos do aneurisma. Exclusão apropriado e permeabilidade stentgraft éconfirmado antes a eutanásia por uma angiografia pensei que a artéria carótida esquerda. Controle parcial de elastase difusão torna aneurisma forma diferente para cada animal. É difícil criar um aneurisma, o que irá permitir que um comprimento adequado da aorta abaixo do aneurisma por uma introdução stentgraft fácil, e com a gola proximal e distal adequada para evitar o extravasamento. Muita falha pode resultar da introdução stentgraft que às vezes levam a lágrima aorta com a dor e os problemas a ponto, e dano endotelial com trombose da aorta pós-operatório. Dar aspirina a ratos antes da implantação stentgraft diminui a taxa de falha, sem grande hemorragia. Pinçamento ativa neutrófilos, endotélio e plaquetas e podem interferir com a análise biológica.

Introduction

Habilidades endovasculares têm progredido desde a primeira reparação endovascular de aneurisma da aorta (EVAR) por Parodi, em 1991, ^3, quase a metade de todos os aneurismas abdominais são agora tratados por EVAR ^4. Ao contrário da cirurgia, EVAR deixa o trombo, excluindo-a da corrente sanguínea sistêmica. Os aneurismas são caracterizados por uma hemoglobina ricos trombo várias camadas, uma fina mídia e uma adventícia fibrosado e inflamado. O papel essencial da proteólise ⁵ em progressão aneurisma foi demonstrada de trinta anos atrás ^{6, 7:} aneurisma saco de trombos está associada com uma fina parede da aorta, a lise de elastina, de baixa densidade de células de músculo liso nos meios de comunicação, bem como um elevado nível de imuno -reacção inflamatória adventícia ^8,9. Estas modificações sugerem que a actividade enzimática proteolítica ocorre dentro do trombo, em vez de directamente na parede da aorta.

Além disso, a camada luminal do trombo é rico em aglutinado vermelho sangue cells liberando hemoglobina. Eles estão envolvidos principalmente na formação de fibrina, a activação de plaquetas e induzir a formação de trombina. Finalmente, trombo também induz t-PA e plasminogênio retenção, que estão envolvidos na fibrinólise e recrutamento de leucócitos, principalmente neutrófilos. Estes são 12 vezes mais importantes do que os trombos na corrente sanguínea ^10. A sua presença é associado com uma alta taxa de metaloproteinase de matriz tipo 8 (MMP-8), MMP-9 e elastase: serina-proteases que libertam granulares e agentes oxidantes profissionais que conduzem à degradação da matriz fibrilar, e a parede da aorta, finalmente, rotura ^{9,11 -13.}

Intervenção aneurisma eletivo tem como objetivo evitar a ruptura. EVAR deixa ambos parede aneurisma e trombo intacta. Assim, aneurisma de perfusão por colaterais da aorta (artérias lombares, artéria mesentérica inferior …), é chamado de vazamento, e é uma complicação específico de tratamento endovascular ^14,15, às vezes levando à ruptura vésperaN com vazamentos de baixa pressão. Além disso, em alguns pacientes, não há um aumento de diâmetro do aneurisma ^16. Interação entre sangue circulante e da parede do aneurisma mantém a atividade trombo luminal intra mencionado biológica. Assim, tipo V vazamentos, definido como expansão do saco do aneurisma, sem vazamento identificado, pode ser explicado pela atividade enzimática dentro do trombo aneurisma.

Nenhum exame radiológico (18FDG-PET digitalização, cintilografia ativação plaquetária, óxido de ferro contraste MRI17), nem coleta de sangue periférico (MMP-9, micropartículas de plaquetas derivadas, plasmina / complexos anti-plasmina) usado para explorar o impacto endovascular em aneurismas da aorta em humanos diretamente avaliar as vias bioquímicas.

Em nosso conhecimento, não há nenhum aneurisma modelos animais experimentais reprodutíveis de exclusão e barato. Este permite exclusão do aneurisma modificações pré e pós-biológicos e histológicos para ser explorado.

Protocol

Métodos O protocolo foi aprovado pelo Comitê de Ética Bichat-Debré (N ° 2012-15/698-0074). O modelo de perfusão de elastase foi descrita pela primeira vez em 1990 por Anidjar 1: aneurisma aórtico abdominal é a perfusão induzida pela elastase em ratos Wistar machos, com idade de 8 a 9 semanas, 250-300 g. Duas a quatro semanas mais tarde, uma re-laparotomia, e um diâmetro de 3 mm revestido stentgraft coronária é utilizado para excluir o aneurism…

Representative Results

Aneurisma é fixada em uma solução de paraformaldeído 4% durante 24 horas, em seguida, em um tampão fosfato solução salina até a fixação em um bloco de resina. Nós usamos uma HPS (Hematoxilina Phloxin Safran) (Figura 1), mostrando coloração as células proliferativas de cura em todo o PTFE (Figura 2). As células mesenquimais são, em seguida, caracterizada por α-actina de coloração (Figura 3). <p class="jove_content" fo:keep-together.within-pag…

Discussion

Dois modelos de AAA já foi descrita em nosso laboratório: xenoenxerto ¹⁹ e modelos induzidos elastase ^um modelo elastase é o mais semelhante ao aneurisma da aorta humanos:. Uma grande trombo intraluminal circunferencial é então excluída pela correção endovascular de aneurisma.

Vazamentos são uma complicação comum de EVAR ^14,15. Muitas perguntas permanecem sem solução: ruptura do AAA foram descritos com baixos vazamentos, e às vezes sem aneurisma…

Materials

			Animals
Wistar rats			aged from 8 to 9 weeks. Weight range from 350 to 400 g
			Instruments
Isoflurane anesthesic system			4,5% at the beginning, then 2%
Penthobarbital	Ceva sante animale, Libourne, France
Dissection stereomicroscope
Steriles gloves
Microsurgical Steriles instruments	Moria, Antony, France		Needle holder, Forceps, Scissors,Gilbert approximator o 3 Micro clamps
N°40 Silk string
Prolen 9-0 and 10-0	Ethicon, Johnson & Johnson, Auneau, France
Heat-tapered polyethylene tubing	PE 10
Syringe infusion pump
Porcine pancreatic elastase	Sigma, St. Louis, Mo., USA		550 μl of salin is mixed with 175 μl of elastase
Indeflator
9 to 16 mm length, 3 mm diameter coronary PTFE covered stentgraft	Abbott, Abbott Park, Illinois, USA
C-Arm OEC 9800	GE Medical Systems, Milwaukee, WI
Aspegic 1000 mg	Aspirin, Sanofi-Aventis, Paris, France
			Reagent
Aerane isoflurane 100ML	Baxter	Aerane
Penthobarbital	Centravet	053pen203
Silk Suture 4-0	Fine Science	18020-40
Microsurgical steriles instruments	Moria	9980-9983-9987-204/A-204/D-8148-4877A-4878A
Prolen 9-0 and 10-0	Ethicon	W2829 – NS2850
Heat tapered Polyethylene tubing : PE 10	Bioseb	MRE-010
Infusion pump	World precision instrument	AL-1000
Porcine pancreatic elastase	Sigma	E1250-100MG
Indeflator	Longreal	KY025 25 100
Aspegic 1000mg (Aspirin)	Sanofi-Aventis	3400931898191
C-Arm OEC 9800	General electric.	OEC 9800
Stentgraft : Jostent	Abbott	210CG1230 210CG1630