Mesures de Sphincter urétral cystométriques et externe chez le rat éveillé avec cathéter implanté et électrodes permettant des mesures répétées
Summary
Ce protocole décrit d’abord l’intervention chirurgicale de l’implantation permanente d’un cathéter de vessie combinée avec électrodes du sphincter urétral externe et, deuxièmement, la mesure de la fonction de la vessie et l’urètre externe sphincter chez des animaux éveillés implantés.
Abstract
Fonction urinaire inférieur est principalement évaluée au moyen d’une analyse de fonction vessie cystométriques chez les rongeurs. Cystometries classiques sont généralement effectués comme terminal analyse sous anesthésie uréthane. Il est bien connu que les drogues anesthésiques peuvent influencer la fonction vésicale. Par conséquent, le but de cette technique est d’effectuer des mesures cystométriques de la vessie et le sphincter urétral externe chez le rat éveillé légèrement restreint. Pour cela, une sonde vésicale est implantée dans le dôme de la vessie. Par la suite, les deux électrodes sont implantées bilatéral au sphincter urétral externe et une électrode de masse est suturée à un muscle squelettique non recevable. Le cathéter de la vessie et les trois électrodes sont enfin en tunnel par voie sous-cutanée à la région du cou et apposés à un harnais. Avec cette technique, les voies urinaires basses peuvent être mesurés à plusieurs points dans le temps chez le même animal pour évaluer la fonction des voies urinaires inférieure. Le principal de l’application de cette technique est la suite de simultanée de la vessie et de la fonction du sphincter urétral externe chez le rat sain éveillé et après induction d’une maladie ou une blessure. En outre, suivi des voies urinaires inférieures peut être effectuée au cours de l’évaluation de la maladie/blessure ainsi qu’à surveiller l’efficacité du traitement.
Introduction
Pour analyser le stockage urinaire et invalider la fonction ou la dysfonction, la plupart des études ont utilisé des modèles de rongeurs. Grâce à l’activation séquentielle des réflexes, la miction est produite. La coordination de ces réflexes est essentielle pour les mictions efficace1. Techniques d’enregistrement cystométriques fournissent des outils précieux pour analyser la fonction vessie sous son contrôle neural1.
Cystometries plus classiques chez les rats se font comme une analyse unique et définitive en anesthésie, principalement uréthane2et mettre l’accent uniquement sur la vessie. Toutefois, dans certaines pathologies comme le dysfonctionnement urinaire inférieur neurogène (NLUTD), non seulement de la vessie, mais aussi de la vessie, le sphincter urétral externe, est dysfonctionnel3,4. Il est NLUTD difficile de suivi, si seulement la vessie est examinée dans une mesure unique cystométriques. Pour obtenir des résultats fiables qui sont comparables aux humains, il est essentiel de mesurer avec précision la vessie et de la fonction du sphincter urétral externe et de ses interactions2. En outre, il est essentiel d’effectuer des analyses fonctionnelles chez le rat éveillé que l’anesthésie est très susceptible d’altérer la vessie fonction2,5,6. Un bon cystométriques enregistrement chez l’animal éveillé est la base pour l’identification de la vessie fonction et mauvais fonctionnement7.
La station de petits animaux cystométrie utilisée (p. ex., station de cystométrie Catamount (CCS)) est une unité d’effectuer des analyses de cystométriques en petits animaux éveillés8. Au moyen d’une sonde vésicale permanente et électrodes implantés sphincter urétral externe, mesures répétitives peuvent être effectuées sur un plus long temps périodes2. Ainsi, la CSC fournit un outil précieux pour les non-neurogène et évaluations de NLUTD dans le modèle de rongeur, dans lequel les pathomécanismes peut changer au cours du suivi de court ou moyen terme. En outre, cette méthode comprend une analyse de cystométriques artefact-réduite en utilisant une drisse pour effectuer des mesurages de la vessie chez le rat éveillé.
Dans cet article, nous décrivons l’approche chirurgicale pour implanter définitivement un cathéter de la vessie et les électrodes du sphincter urétral externe, ainsi que de mesures cystométriques chez le rat éveillé.
Protocol
Representative Results
Discussion
Ce protocole décrit la procédure chirurgicale d’un cathéter permanent et implantation d’électrodes sphincter urétral et le cystométriques technique d’enregistrement chez le rat éveillé, légèrement restreint dont les deux l’analyse simultanée de la vessie et sphincter urétral externe.
Étapes critiques pendant la chirurgie sont l’implantation minutieuse de la sonde vésicale, en évitant la fuite et une vaste manipulation. En outre, une implantation précise des électrode…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Les auteurs n’ont pas des remerciements.
Materials
| Polyethylene tubing PE 50 | Becton Dickinson | 427411 | Catheter |
| Prolene 6-0 (BV-1, 9.3 mm, 3/8c) | Ethicon | EH7403H | Suture |
| Teflon coated steel wire | Cooner wire | AS631 | Electrode material |
| Silver wire 0.250 mm | World Precision Instruments | AGW1030 | Electrode material |
| Rotilabo – PVC tube | Carl Roth | 97241 | Harness |
| Vicryl rapide 4-0 (P-3, 13 mm, 3/8c) | Ethicon | V4940H | Suture |
| Quick Connect Single Harness | SAI Infusion Technologies | QCH-23CW | Harness |
| Shrinking tubes | ChiliTec | 17894 | Electrode soldering |
| Soldering wire Pb60 Sn40 | Stannol | LD0029 | Electrode soldering |
| Fluxing agent 157 | Castolin Eutectin | 157 0150 | Electrode soldering |
| Conn Unshrouded Header HDR 3 POS, 2.54mm Solder ST Thru-Hole Box | Preci-dip | 801-87-050-10-001101 | Electrode soldering |
| Conn Socket Strip SKT 50 POS 2.54mm, Solder ST Thru-Hole Box | Preci-dip | 890-18-003-10-001101 | Electrode soldering |
| Rat Cystometry Package (contains pump, scale, pressure transducer, hardware for cystometric analysis) | Catamount Research and Development Inc. | CAT-CYT-R | |
| Differential amplifier with active headstage | AD instruments | DP-311 | EMG amplifier |
| Restrainer Medium size for rats 200-300 g | emka Technologies | HLD-RM | |
| Uro Dyn Software | Zürich of University | MTA-based | |
| Female rats (Strain Lewis) 12 weeks of age | Charles River, Sulzfeld, Germany | animals |
Referências
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