Zystometrischen und externen urethralen Sphincter Messungen in wach Ratten mit implantierten Katheter und Elektroden für wiederholte Messungen
Summary
Dieses Protokoll beschreibt zunächst den chirurgischen Eingriff der permanenten Implantation eines Harnblase Katheters in Kombination mit externen urethralen Sphinkter Elektroden, und zweitens die Messung der Funktion der Harnblase und Harnröhre externen Schließmuskel bei implantierten wach Tieren.
Abstract
Unteren Harnwege Funktion wird hauptsächlich durch zystometrischen Blase Funktionsanalyse bei Nagetieren beurteilt. Herkömmliche Cystometries werden in der Regel als terminal Analyse Urethan Narkose durchgeführt. Es ist bekannt, dass Anästhetika Blasenfunktion beeinflussen können. Daher ist das Ziel dieser Technik zystometrischen Messungen der Harnblase und der externen urethralen Sphinkter in leicht zurückhaltende wach Ratten durchführen. Zu diesem Zweck wird ein Blasenkatheter in die Blase Kuppel eingepflanzt. Anschließend werden zwei Elektroden zu den externen urethralen Sphinkter bilaterale implantiert und eine Masseelektrode mit eine nicht reagierende skelettartiger Muskel vernäht ist. Der Blasenkatheter und die drei Elektroden sind schließlich getunnelt subkutan in der Hals-Region und an einem Gurt befestigt. Mit dieser Technik kann der ableitenden Harnwege zu mehreren Zeitpunkten im gleichen Tier zur Bewertung der unteren Harnwege Funktion gemessen werden. Die Anwendung dieser Technik ist das Follow-up der gleichzeitigen Harnblase und externen urethralen Sphinkter Funktion wach gesund Ratten und nach Induktion einer Krankheit oder Verletzung. Darüber hinaus kann bei der Auswertung der Krankheit/Verletzung und Wirksamkeit der Behandlung zu überwachen anschließende unteren Harnwege Überwachung durchgeführt werden.
Introduction
Harn Lagerung und Entleerung, Funktion und Dysfunktion zu analysieren, haben die meisten Studien Nager-Modelle verwendet. Durch sequentielle Aktivierung der Reflexe Miktion entsteht. Die Koordination dieser Reflexe ist Voraussetzung für effiziente Entleerung1. Zystometrischen Aufnahmetechniken bieten wertvolle Werkzeuge für die Analyse der Harnblase-Funktion unter seiner neuronalen Kontrolle1.
Die meisten herkömmlichen Cystometries in Ratten als eine einzige, letzte Analyse in Anästhesie, hauptsächlich Urethan2fertig sind und konzentrieren sich ausschließlich auf die Harnblase. Jedoch in einigen Pathologien wie neurogene unteren Harnwege Dysfunktion (NLUTD) ist nicht nur die Harnblase, sondern auch die Blase Steckdose, den externen urethralen Sphinkter dysfunktionalen3,4. Dies erschwert NLUTD, Follow-up, wenn nur die Blase in einer einzigen zystometrischen Messung untersucht wird. Um zuverlässige Ergebnisse zu erhalten, die auf den Menschen vergleichbar sind, ist es unerlässlich, sowohl der Harnblase und der externen urethralen Sphinkter Funktion und seine Interaktionen2genau zu messen. Darüber hinaus ist es entscheidend, Funktionsanalysen in wach Ratten durchzuführen, da Anästhesie sehr Blase Funktion2,5,6ändern dürfte. Eine gute zystometrischen Aufnahme in wach Tiere ist die Grundlage für die Identifizierung der Blase Funktion und Störung7.
Die kleinen Tiere Cystometry Station verwendet (z. B.Catamount Cystometry Station (CCS)) ist eine Einheit, zystometrischen Analysen in wach Kleintiere8durchzuführen. Mit Hilfe einer permanenten Blasenkatheter und implantierten externen urethralen Sphinkter Elektroden können sich wiederholende Messungen über eine längere Zeit Perioden2durchgeführt werden. So bietet die CCS ein wertvolles Instrument für nicht-neurogenen und NLUTD Auswertungen im Nagetier-Modell, in dem die Pathomechanismen während kurz- oder mittelfristigen Follow-up ändern können. Darüber hinaus enthält diese Methode eine Artefakt-reduzierte zystometrischen Analyse mithilfe eine einschränkende Blase Messungen in wach Ratten durchführen.
In diesem Artikel beschreiben wir das chirurgische Vorgehen um dauerhaft einen Blasenkatheter und externen urethralen Sphinkter Elektroden, zusammen mit zystometrischen Messungen in wach Ratten einnisten.
Protocol
Representative Results
Discussion
Dieses Protokoll beschreibt den chirurgischen Eingriff eine permanente Katheter und Harnröhre Schließmuskel Elektroden Implantation und die zystometrischen Aufnahme Technik in wach, leicht zurückhaltende Ratten unter anderem sowohl die gleichzeitige Analyse der Harnblase und externen urethralen Sphinkter.
Wichtige Schritte während der Operation sind die sorgfältige Implantation von Blasenkatheter, Vermeidung von Leckagen und umfangreiche Manipulation. Darüber hinaus ist eine präzise Imp…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Die Autoren haben kein Bestätigungen.
Materials
| Polyethylene tubing PE 50 | Becton Dickinson | 427411 | Catheter |
| Prolene 6-0 (BV-1, 9.3 mm, 3/8c) | Ethicon | EH7403H | Suture |
| Teflon coated steel wire | Cooner wire | AS631 | Electrode material |
| Silver wire 0.250 mm | World Precision Instruments | AGW1030 | Electrode material |
| Rotilabo – PVC tube | Carl Roth | 97241 | Harness |
| Vicryl rapide 4-0 (P-3, 13 mm, 3/8c) | Ethicon | V4940H | Suture |
| Quick Connect Single Harness | SAI Infusion Technologies | QCH-23CW | Harness |
| Shrinking tubes | ChiliTec | 17894 | Electrode soldering |
| Soldering wire Pb60 Sn40 | Stannol | LD0029 | Electrode soldering |
| Fluxing agent 157 | Castolin Eutectin | 157 0150 | Electrode soldering |
| Conn Unshrouded Header HDR 3 POS, 2.54mm Solder ST Thru-Hole Box | Preci-dip | 801-87-050-10-001101 | Electrode soldering |
| Conn Socket Strip SKT 50 POS 2.54mm, Solder ST Thru-Hole Box | Preci-dip | 890-18-003-10-001101 | Electrode soldering |
| Rat Cystometry Package (contains pump, scale, pressure transducer, hardware for cystometric analysis) | Catamount Research and Development Inc. | CAT-CYT-R | |
| Differential amplifier with active headstage | AD instruments | DP-311 | EMG amplifier |
| Restrainer Medium size for rats 200-300 g | emka Technologies | HLD-RM | |
| Uro Dyn Software | Zürich of University | MTA-based | |
| Female rats (Strain Lewis) 12 weeks of age | Charles River, Sulzfeld, Germany | animals |
Referências
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