Medición de esfínter uretral externo cistométrico en ratas despiertas con catéter implantado y electrodos para medidas repetidas
Summary
Este protocolo describe primero el procedimiento quirúrgico de la implantación permanente de un catéter de vejiga urinaria combinada con electrodos del esfínter uretral externo y segundo, la medición de la función de la vejiga y uretral externo Esfinge en animales despiertos implantados.
Abstract
Función del tracto urinario inferior se evalúa principalmente mediante análisis de función de vejiga cistométrico en roedores. Cystometries convencionales se realizan generalmente como análisis terminal bajo anestesia de uretano. Es bien sabido que las drogas anestésicas pueden influir en la función vesical. Por lo tanto, el objetivo de esta técnica es realizar mediciones cistométrico del esfínter externo uretral y vejiga urinaria en ratas despiertas ligeramente restringidas. Para ello, se implanta un catéter de vejiga en la cúpula de la vejiga. Posteriormente, dos electrodos son implantados bilaterales en el esfínter uretral externo y un electrodo de tierra se sutura a un músculo esquelético no responde. El catéter de la vejiga y los tres electrodos son finalmente tunelizados subcutáneamente en la región del cuello y colocados en un arnés. Con esta técnica, las vías urinarias bajas puede ser medida en varios puntos del tiempo en el mismo animal para evaluar la función del tracto urinario inferior. La principal aplicación de esta técnica es el seguimiento simultánea vejiga urinaria y función del esfínter uretral externo en ratas sanas despiertas y después de la inducción de una enfermedad o lesión. Por otra parte, el posterior control de tracto urinario inferior puede realizarse durante la evaluación de la enfermedad, lesión y para monitorizar la eficacia del tratamiento.
Introduction
Para analizar almacenamiento urinario y anulación de la función y disfunción, mayoría de los estudios ha usado modelos de roedores. A través de la activación secuencial de los reflejos, se produce la micción. La coordinación de estos reflejos es esencial para la eficiente evacuación1. Técnicas de grabación cistométrico proporcionan valiosas herramientas para el análisis de la función de la vejiga urinaria bajo su control neural1.
Cystometries más convencionales en las ratas se hacen como un análisis único y final en anestesia, principalmente uretano2y únicamente se centran en la vejiga urinaria. Sin embargo, en algunas patologías como disfunción neurogénica de tracto urinario inferior (NLUTD), no sólo a la vejiga urinaria, sino también a la salida de la vejiga, el esfínter uretral externo, es disfuncional3,4. Esto dificulta NLUTD seguimiento, si sólo se examina la vejiga en una medición cistométrico sola. Para obtener resultados confiables que son comparables a los seres humanos, es esencial para medir con precisión tanto la vejiga urinaria y la función del esfínter uretral externo y sus interacciones2. Además, es crucial realizar análisis funcionales en ratas despiertas como la anestesia es muy probable que altere la función de vejiga2,5,6. Un buen cistométrico en animales despiertos es la base para la identificación de la función y funcionamiento de la vejiga7.
La Cistometría animal pequeña estación (p. ej., estación de cystometry Catamount (CCS)) es una unidad para realizar análisis cistométrico en pequeños animales despiertos8. Por medio de un catéter vesical permanente y esfínter uretral externo implantado electrodos, pueden realizarse mediciones repetitivas durante un largo tiempo períodos2. Así, la CCS proporciona una valiosa herramienta para no neurogénica y evaluaciones de NLUTD en el modelo de roedor, en los cuales los pathomechanisms puede cambiar durante el seguimiento a corto o medio plazo. Además, este método incluye un análisis reducido artefacto cistométrico utilizando un limitador para realizar mediciones de vejiga en ratas despiertas.
En este papel, describimos el abordaje para el implante permanente de un catéter de vejiga y esfínter uretral externo electrodos, junto con mediciones cistométrico en ratas despiertas.
Protocol
Representative Results
Discussion
Este protocolo describe el procedimiento quirúrgico de un catéter permanente, implantación de electrodos del esfínter uretral y el cistométrico grabación técnica en ratas despiertas, ligeramente restringidas, incluyendo tanto el análisis simultáneo de la vejiga urinaria y esfínter uretral externo.
Pasos críticos durante la cirugía son la cuidadosa implantación de Catéter vesical, evitando fugas y la manipulación extensa. Por otra parte, una implantación precisa de los electrodo…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Los autores no tienen ningún reconocimiento.
Materials
| Polyethylene tubing PE 50 | Becton Dickinson | 427411 | Catheter |
| Prolene 6-0 (BV-1, 9.3 mm, 3/8c) | Ethicon | EH7403H | Suture |
| Teflon coated steel wire | Cooner wire | AS631 | Electrode material |
| Silver wire 0.250 mm | World Precision Instruments | AGW1030 | Electrode material |
| Rotilabo – PVC tube | Carl Roth | 97241 | Harness |
| Vicryl rapide 4-0 (P-3, 13 mm, 3/8c) | Ethicon | V4940H | Suture |
| Quick Connect Single Harness | SAI Infusion Technologies | QCH-23CW | Harness |
| Shrinking tubes | ChiliTec | 17894 | Electrode soldering |
| Soldering wire Pb60 Sn40 | Stannol | LD0029 | Electrode soldering |
| Fluxing agent 157 | Castolin Eutectin | 157 0150 | Electrode soldering |
| Conn Unshrouded Header HDR 3 POS, 2.54mm Solder ST Thru-Hole Box | Preci-dip | 801-87-050-10-001101 | Electrode soldering |
| Conn Socket Strip SKT 50 POS 2.54mm, Solder ST Thru-Hole Box | Preci-dip | 890-18-003-10-001101 | Electrode soldering |
| Rat Cystometry Package (contains pump, scale, pressure transducer, hardware for cystometric analysis) | Catamount Research and Development Inc. | CAT-CYT-R | |
| Differential amplifier with active headstage | AD instruments | DP-311 | EMG amplifier |
| Restrainer Medium size for rats 200-300 g | emka Technologies | HLD-RM | |
| Uro Dyn Software | Zürich of University | MTA-based | |
| Female rats (Strain Lewis) 12 weeks of age | Charles River, Sulzfeld, Germany | animals |
Referências
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