ウェルシュ病原性を研究する麻酔特定病原体フリー鶏における腸管結紮ループ モデル
Summary
ここで外科的鶏腸内 ‘腸管結紮ループ’ を作成するためのプロトコルを提案する.この手順は、複数ウェルシュ菌病原性上皮内の単一のホストでの比較のためことができます。このメソッドは、同様の生体内で実験に必要な通常の鶏の数を著しく減少します。
Abstract
壊死性腸炎は、様々 な生体内感染モデルを用いた鶏で調べた。これらのほとんどは、強制経口投与とウェルシュを使用してフィードを介して管理素因、コクシジウム症、ダイエットなどの組み合わせを使用します。これらのモデルで病原性の研究複数C. ウエルシュ菌の比較多数の重要な結果を取得するホストが必要です。研究の過程で死亡は、それゆえ研究における動物福祉に関する倫理的な問題を上げる実験的モデルによって高ことができます。発症機序は、まだ統計的に重要かつ有効な結果を提供することを勉強するより少ない動物を必要とする新しい感染症モデルの開発研究における動物の使用量の削減に重要です。腸管結紮ループ モデルは、マウス、ウサギ、牛など様々 な種のクロストリジウム感染症の研究に使用されています。手術結紮ループ セグメントを作成するのには、以下のC. ウエルシュ菌は細菌と粘膜の間の密接な接触を確立するループに直接注入されます。小腸と内容のサンプルは、プロシージャの終了数時間後で撮影されます。複数菌株は、実験に必要な科目数を減らし、それぞれの動物に接種することができます。また、動物の痛みを軽減する麻酔下で手順を実行します。鶏、このモデルが少ない動物が必要なため、素因が、病気を誘発する必要はありません、鎮痛薬によって痛みを制御C. ウエルシュひずみ病原性を比較する経口投与よりも適切だろう.腸管結紮ループ モデルは鶏で不完全に記述されて、標準化はその最適な使用のために不可欠です。この原稿鶏で多数の腸管結紮ループを作成するすべての必要な手順を提供し、については有効な結果を得るための重要なポイントをもたらします。
Introduction
人間や動物に影響を与える伝染病の研究の動物モデルの使用は規制を防ぐか、または治す疾患1戦略を詳しく説明として同様に特定の条件の病因病原因子を評価する上で中心的なツールです。様々 な疾患を勉強する動物モデルを使用して多数の利点、にもかかわらずこの実践に関する倫理的な問題が生じる。研究者は、重要かつ有効な結果を得ながら動物の使用を最小限に抑える必要があります。3 原則の Rs (置換、削減、リファイン) の概念は、福祉の問題はこのような試験に当たったように精緻化された.鶏壊死性腸炎の研究で鶏モデル生体内では、病因、予防、およびこの条件2,3,4、5の治療を調査するため使用されます。鶏7で壊死性腸炎を引き起こす病原性株C. ウエルシュNetB 毒素6などの特定の病原因子を運ぶを管理します。交換の原則は、したがって、これらの病原因子は他の動物種で重大ようにではないかもしれないこのようなケースで達成することは困難。鶏の壊死性腸炎のほとんどのモデルはコクシジウム症などの危険因子の組み合わせを使用し、 C. ウエルシュ2.の大規模な番号を含むスープ文化の強制経口投与に続いて壊死性腸炎を誘導するために食事療法を変更これらのモデルは多数、鶏の病気を誘発して死亡率はそのような試験の8、従って動物研究の削減・洗練の原則についての懸念を高める重要なすることができます。
腸管結紮ループ モデルに関して原則の削減、および洗練された腸内病原体による疾患の研究の望ましい代わりであります。これらのモデルで ‘ループ’ と呼ばれる腸管が病原体は、単独で9を注入することができます独立して気密区画を形成するため腸管に沿ってまたはワクチン候補など、他の分子との合字を配置することによって作成されます。10,11. 興味の病原体が腸の細胞と連絡を密に配置され、感染時間の数時間後腸サンプルを詳しく分析するためリカバリできます。これは同じ動物の複数の治療とコントロール グループを使用できます。繰り返し測定モデルをグループ間の差別の力を増加し、経口試験と比較して必要な鶏の数が減ると統計分析を実行できます。また、継続的な全身麻酔と鎮痛、それ故に動物の痛みを最小限に抑える手術とその後の感染の時間を実行します。閉ループをホスト番号を減らすと動物研究のより慈悲深いシステムを作成するための理想的なテンプレートです。
腸管結紮ループ モデルは子牛、ウサギ、マウス2,9などの様々 な種でも説明されているが、あまり鶏7で記述。この手術モデルの最適な利用、適切な技術と実行は、腸内の整合性への損傷を避けるために結紮腸管ループの作成に不可欠です。この原稿の目標は、鶏モデルで複数の腸ループの作成のステップ バイ ステップ方法について説明することです。この手法は、正確な手順は、プロジェクトの成功に不可欠な外科医の経験と技術によって制限されます。
Protocol
Representative Results
Discussion
腸管ループのモデルは、宿主-病原体相互作用やウェルシュクロストリジウム ・ ディフィシルなどさまざまな腸内病原体によって引き起こされる病気の病因を研究する多くの種に記載されています。サルモネラ7,9,13,14,15。それはまた粘膜免疫応答<sup …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この作品は、ユニヴェルシテ ドゥ モントリオールの獣医学部から家禽研究 (M. Boulianne) の椅子によって支えられました。博士 Boulianne と親モデルを開発しました。博士 Boulianne と親が手術を行った先生は、麻酔プロトコルの開発を支援しました。博士の親はビデオを編集し、原稿を書いていた。Drs やけど、クラシックと Boulianne は原稿を編集しました。
Materials
| EZ-Scrub 747 | Becton Dickinson and Company | 4% chlorhexidine gluconate detergent impregnated sterile brush. No catalog number available. Web address: https://www.bd.com/en-us/offerings/capabilities/infection-prevention/surgical-hand-scrubs/ez-scrub-preoperative-surgical-scrub-brushes | |
| Isopropyl alcohol 70% USP 4 L | Commercial isopropyl alcohol | P016IP70 | Web address: http://www.comalc.com/products/ |
| Chlorexidine | Sigma-Aldrich | 282227-1G | Chlorhexidine gluconate solution, must be diluted to 4%. Web address: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/282227?lang=fr®ion=CA&gclid=EAIaIQobChMI8vHr4_OY1wIV3rrACh2ZWQKuEAAYAiAAEgLKx_D_BwE |
| Surgical Drape Small (27 inch x 24 inch) with 3 x 6 inch Fenestration | Veterinary Specialty Products | 32724 | Web address: http://www.vetspecialtyproducts.com/index.cfm?fuseaction=ecommercecatalog.detail&productgroup_id=15 |
| Scalpel blades #3 | Swann-Morton | 301 | Web address: https://www.swann-morton.com/product/16.php |
| Sterile saline NaCl 0.9% | Sigma-Aldrich | S8776-100ML | Web address: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/s8776?lang=fr®ion=CA |
| Vicryl 3-0 | Ethicon | D9003 | Polyglactin multifilament absorbable suture material. Web address: http://www.ethicon.com/healthcare-professionals/products/wound-closure/absorbable-sutures/coated-vicryl-polyglactin-910-suture |
| Syringe 1 ml with 26G needle | Becton Dickinson and Company | 329652 | Web address: https://www.bd.com/en-us/offerings/capabilities/diabetes-care/insulin-syringes/bd-1-ml-conventional-insulin-syringes |
| Brain Heart Infusion | Sigma-Aldrich | 1104930500 | Web address: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/mm/110493?lang=fr®ion=CA&cm_sp=Insite-_-prodRecCold_xorders-_-prodRecCold2-1 |
| Eppendorf tube | Sigma-Aldrich | T9661-500EA | Microcentrifuge tube. Web address: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/t9661?lang=fr®ion=CA&gclid=EAIaIQobChMI-YizzfiY1wIVRkCGCh30SQjuEAAYAiAAEgLK5fD_BwE |
| Formalin solution, buffered neutral, 10% | Sigma-Aldrich | HT501128-4L | Ratio tissue : formalin of 1: 10 for adequate fixation. Web address: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/ht501128?lang=fr®ion=CA |
| Clostridium perfringens strains | Université de Montréal, Chaire en recherche avicole | N/A | Specific to each laboratory, available upon request to correspondant author |
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