Eisenchlorid-induzierte eckzahn Halsschlagader Thrombosen: Eine große Tiermodell der Gefäßverletzung
Summary
Hier präsentieren wir Ihnen die Änderungen notwendig, ein gut charakterisierten und häufig verwendete kleine Eisenchlorid-induzierte (FeCl3) Halsschlagader Verletzungen Tiermodell für den Einsatz in einem großen Tier gefäßverletzung Modell. Das resultierende Modell sowohl präklinische Studie Bewertung der prophylaktischen und thrombolytischen pharmakologische und mechanische Eingriffe einsetzbar.
Abstract
Okklusive arterielle Thrombose führt zu zerebralen ischämischen Schlaganfall und Herzinfarkt trägt zur 13 Millionen Todesfälle pro Jahr weltweit. Hier haben wir eine gefäßverletzung Modell aus ein kleines Tier in ein großes Tier (Hund), mit geringfügigen Änderungen übersetzt, die für präklinische Screening von prophylaktischen und thrombolytischen Agenten verwendet werden kann. Neben den chirurgischen Methoden beschreibt das geänderte Protokoll die schrittweisen Methoden zur Beurteilung der Arteria carotis Kanalisation mittels Angiographie, detaillierte Anweisungen verarbeitet das Gehirn und die Halsschlagader zur histologischen Untersuchung zur Überprüfung der a. carotis Kanalisation und Hirnblutung und spezifische Parameter um eine Beurteilung der nachgeschalteten thromboembolische Ereignisse zu vervollständigen, durch die Verwendung von Magnet-Resonanz-Tomographie (MRT). Darüber hinaus sind bestimmte verfahrenstechnische Änderungen von bereits etablierten kleinen Tiermodell notwendig, in ein großes Tier (Hund) gefäßverletzung übersetzen diskutiert.
Introduction
Schlaganfall-Therapie ist weitgehend nachempfunden Behandlung koronarer Erkrankungen, vor allem, weil die Eingriffe in die Herz-Kreislauf-Krankheit auch auf Drogen-Therapie und endovaskulären Interventionen1reagiert haben. Diese Behandlungen sind jedoch nicht erfolgreich, Hirninfarkt übersetzt. Die Schwierigkeiten mit der aktuellen Schlaganfallbehandlung sind, dass recombinant Tissue Plasminogen Activator (Rtbpa) rückgängig gemacht werden kann und Verwaltung birgt ein erhebliches Risiko von 6,4 % von hämorrhagischen Umwandlung2,3, 4. resultierende Morbidität und Mortalität schränkt seine Verwendung zu einem kleinen, oft unerreichbar Fenster5. Auch auftreten Restenose und Okklusion oft nach anfänglichen Thrombolyse, Rückwärtsfahren anfängliche neurologische Verbesserung. Zusammenfassend lässt sich sagen ist ein enges zeitliches Fenster Rtbpa verwalten, die ausschließt, die große Mehrheit (ca. 90 %) der Patienten mit ischämische zerebrovaskuläre Beleidigungen.
Die Rolle der intravenösen gerinnungshemmende Therapie hat Versprechen gezeigt, bei der Behandlung von ischämischen Schlaganfall mit verbesserten Schiff Rekanalisation, überleben und Ergebnis2. Leider diese Medikamente haben eine vorhersehbare Nebenwirkung von Intra kranialen und extra kranialen Blutungen, vor allem, weil es keine Möglichkeit, angemessen rückgängig zu machen oder ihre Aktivität2zu kontrollieren. Während wirksam bei der Verhinderung der Thrombozytenaggregation haben das Risiko von Blutungen und die Unfähigkeit, ihre Tätigkeit zu stornieren ihren Einsatz in der Routine Pflege von Schlaganfall-Patienten ausgeschlossen. Ein Bedarf besteht daher für potente antithrombotische Medikamente, die handeln, allein oder in Kombinationen zu verhindern und Blutgerinnsel aufzulösen, aber haben ein Sicherheitsprofil, mit denen die Verwendung in einem geschlossenen, in geringen Mengen Raum wie dem Gehirn, wo die Blutung schlecht toleriert wird.
Verständnis des Mechanismus der arterielle Thrombose und Re-Stenose und Bewertung Thrombolytics und Medikamente, die verhindern, Re-Stenose dass, erfordert sowohl kleine als auch große Tiermodellen als Teil des prä-klinischen Medikamentenentwicklung. Eisenchlorid-induzierte gefäßverletzung ist eine häufig verwendete Technik, um schnell und präzise induzieren die Bildung von Thromben in exponierten Blutgefäße von Mäusen, Ratten, Meerschweinchen, und Kaninchen6,7,8, 9 , 10 , 11 , 12. diese kleineren Arten bieten mehrere Vorteile, einschließlich einfache Genmanipulation, preiswerte Tier Kauf und niedrige Tagessatz Wohnkosten. Leider negieren kleine Tierversuche mehrere Blut zieht während der Operation zu Zugang Thrombozyten Reaktivität, Blut-Gas-Analyse und entzündliche Reaktion. Noch wichtiger ist, imitieren Großtiere viel enger menschlichen Thrombozyten Physiologie6,13. FeCl3 Halsschlagader Verletzungen Modell spielte eine herausragende Rolle in der Erforschung der Pathophysiologie von Thrombosen, bei der Validierung von neuartigen Anti-Thrombozyten und Antikoagulans Drogen und bei der Entdeckung der potenziellen Thrombolytics6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12. frühere Modelle bei Mäusen, Ratten, Meerschweinchen, Kaninchen zur Verfügung gestellt haben, Leichtigkeit und Flexibilität für die genetische Manipulation, wobei übersetzbare präklinische Modellen sind entscheidend für die Dosierung und Toxizität Patientenstudien potenzielle Therapeutika6 ,13. Obwohl mehrere Modelle von thrombotischen Erkrankungen bei Mäusen, große Tiermodellen der Thrombose entwickelt wurden, die für die periphere arterielle Verschlusskrankheit sind sind Schlaganfall und Herzinfarkt nur wenige und weit. Die ersten Modelle der Thrombose bei Affen, Hunden und Schweinen konzentrierte sich auf Stenose, arterienklemmen und späteren Zylinder auf Schiffe, häufig resultierenden zyklischen Fluss Reduktionen14,15,16anzuwenden. Anstelle einer okklusiven Thrombus an der Stelle des endothelschäden wie Eisenchlorid Modell der Thrombus in diesen Modellen führte zu zyklischen Thrombose, distale Embolisation und zurück zur normalen Blutfluss. Im Vergleich dazu ist das Eisenchlorid Modell hier in ein großes Tier, Ergebnisse in einer okklusiven Thrombus am Verletzung Aufstellungsort geändert und stabilisiert und durch Angiographie vor der thrombolytischen Behandlung überprüft. Sofern der Prüfer ausreichend gedeckt ist, denn pro Diem und Kauf von Eckzähnen und angemessene chirurgischem Know-how, wir hier ein großes eckzahn Modell der gefäßverletzung ermöglichen Labors zu Thrombose Nutzung der chirurgischen, imaging und histologische Studie ausführlich Techniken.
Protocol
Representative Results
Discussion
Das FeCl3 induzierte gefäßverletzung Modell ist weit verbreitet, Thrombosen bei Kleintieren zu studieren und ist einfach zu übersetzen, ein großes Tier, präklinischen Modell mit einer Vielzahl von Vorteilen. Geringfügige Änderungen an das Protokoll eines Hundes anzupassen erlauben die Nutzung der beiden Magnetresonanztomographie Schlaganfälle und Blutungen Volumen nach eine pharmakologische Intervention und Angiographie Schiff Kanalisierung vor, bewerten bewerten bei, und nach der Behandlung. Anderen t…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Wir möchte das Zentrum für kognitive und Behavioral Brain Imaging an der Ohio State University für ihre finanzielle und wissenschaftliche Unterstützung entwickeln und Durchführen von eckzahn Magnetresonanz-Bildgebung.
Materials
| 1/8” umbilical tape | Jorgensen Laboratories Inc., | #J0025UA | for ferric chloride application |
| 4% paraformaldehyde in PBS | Alfa Aesar | AAJ61899AP | |
| 10% neutral buffered formalin | Richard-Allan Scientific | 5701 | |
| 2% 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC in PBS, pH 7.4) | Sigma Aldrich | T8877 | |
| ADP/Collagen cartridges | Siemens Diagnostics | B417021A | |
| 4.5 ml 3.2% sodium citrate blood vacutainer | Becton Dickinson | BD 369714 | |
| 4.5 ml lithium heparin vacutainer | Becton Dickinson | BD 368056 | |
| EDTA K3 vacutainers | Becton Dickinson | BD455036 | |
| Doppler flow probe | Transonic Systems Inc | MA2.5PSL | |
| Hematoxylin 560 | Surgipath | 3801570 | |
| Eosin | Surgipath | 3801602 | |
| LabChart Software | ADInstruments Inc. | ||
| Prisma Fit 3 tesla (3T) magnet | Siemen's Diagnostics | ||
| Sodium heparin for injection (to coat blood gas syringe) | NovaPlus | 402525D | |
| HUG-U-VAC positioning system | DRE Veterinary | 1320 |
Referências
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