Ferrik klorid kaynaklı köpek karotid arter trombozu: Bir büyük hayvan modeli vasküler yaralanma
Summary
Burada, bir büyük hayvan vasküler yaralanma modelinde kullanım için de karakterize ve yaygın olarak kullanılan küçük bir hayvan ferrik klorid kaynaklı (FeCl3) karotis arter yaralanması model için gerekli değişiklikler mevcut. Elde edilen modeli profilaktik ve trombolitik farmakolojik ve mekanik müdahaleler önceden klinik deneme değerlendirilmesi için yararlı olabilir.
Abstract
Serebral iskemik inme ve miyokard infarktüsü yol tıkayıcı arteryel tromboz, genel olarak her yıl ~ 13 milyon ölüme katkıda bulunur. Burada, biz küçük bir hayvan bir vasküler yaralanma modeli büyük bir hayvan (köpek), profilaktik ve trombolitik ajanların önceden klinik tarama için kullanılan hafif değişiklikler ile tercüme var. Cerrahi yöntemlere ek olarak, değiştirilmiş Protokolü anjiyografi, karotid arter kanalizasyon değerlendirmek için adım adım yöntemler beyin ve karotid arter karotis doğrulamak histolojik analizler için işlemek için ayrıntılı yönergeler anlatılmaktadır. kanalizasyon ve beyin kanaması ve manyetik rezonans görüntüleme (MRG) kullanarak aşağı akım tromboembolik olaylar bir değerlendirmesini tamamlamak için belirli parametreleri. Ayrıca, daha önce köklü küçük hayvan modeli büyük hayvan (köpek) vasküler yaralanma çevirmek gerekli belirli yordam değişiklikleri ele alınmıştır.
Introduction
Esas olarak kardiyovasküler hastalık müdahaleler de ilaç tedavisi ve endovasküler müdahaleler1‘ e tepki vermiş çünkü felç tedavisi büyük ölçüde koroner arter hastalığı tedaviden sonra modellenmiştir. Bu tedaviler, ancak, başarıyla için beyin enfarktüsü tercüme var değil. Geçerli kontur tedavi zorluklarla rekombinant doku plazminojen aktivatör (rTPA) geri alınamaz ve yönetim hemorajik dönüşüm2,3, bir % 6.4 risk taşıyan vardır 4. elde edilen morbidite ve mortalite sınırlar kendi kullanımı için bir küçük, genellikle ulaşılamaz bir pencere5. Ayrıca, restenoz ve tıkanıklığı ilk nörolojik gelişme tersine kez ilk thrombolysis sonra ortaya. Özetle, iskemik serebrovasküler hakaret muzdarip hastaların büyük çoğunluğu (~ %90) hariç rTPA yönetmek için dar bir zamansal pencere var.
İntravenöz antiplatelet tedavi rolü gelişmiş gemi recanalization, hayatta kalma ve sonucu2ile iskemik inme tedavisinde söz göstermiştir. Ne yazık ki, bu ilaçların intra-kranyal ve ekstra kranial kanama tahmin edilebilir bir yan etkisi, büyük ölçüde yolu çünkü yeterince ters ya da onların etkinlik2kontrol. Trombosit toplama önlemede etkili, kanama ve faaliyetlerini tersine çevirmek için yetersizlik riski inme hastalarında bakım rutin kullanımları engellemiştir. Bir ihtiyaç, bu nedenle, tek başına veya kombinasyonlarda önlemek ve pıhtıları koşullar için hareket henüz nerede kanama kötü tolere edilir beyin gibi kapalı, düşük birim alanı kullanımda sağlayacak bir emanet profile sahip güçlü Antitrombotik ilaçlar için bulunmaktadır.
Arteryel tromboz ve re-stenoz mekanizmasını anlamak ve değerlendirmek trombolitik ve re-stenoz, engelleyen ilaçlar hem küçük hem de büyük hayvan modelleri önceden klinik ilaç geliştirme bir parçası olarak gerektirir. Vasküler yaralanma ferrik klorid kaynaklı olu_umu fare, sıçan, eskiden şiling şimdi pigs, maruz kalan kan damarları oluşumunu hızla ve doğru bir şekilde ikna etmek için yaygın olarak kullanılan bir tekniktir ve6,7,8, tavşan 9 , 10 , 11 , 12. küçük bu türlerin genetik manipülasyon, ucuz hayvan satın alma ve başına harcırah konut maliyetleri düşük kolaylığı dahil olmak üzere birkaç avantaj sunar. Ne yazık ki, küçük hayvan deneyleri erişim trombosit reaktivitesini, kan gazı analizi ve inflamatuar yanıt için ameliyat sırasında birden çok kan berabere inkâr. Daha da önemlisi, büyük hayvanlar çok daha yakından insan trombosit fizyolojisi6,13taklit. FeCl3 karotis arter yaralanması modeli trombozu Patofizyoloji incelenmesi, roman Anti-trombosit ve anti-koagulant uyuşturucu doğrulanmasını ve potansiyel trombolitik6 keşfi baskın bir rol oynamıştır , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12. önceki modelleri farelerde, sıçanlar, eskiden şiling şimdi pigs ve tavşan olması koşuluyla kolaylığı ve esnekliği genetik manipülasyon için ama çevrilebilir önceden klinik modelleri hasta dozaj ve toksisite çalışmaları potansiyel therapeutics6 için kritik ,13. Farelerde periferik damar hastalığı için geçerlidir büyük hayvan kan pıhtılaşması modelleri trombotik bozuklukları çeşitli modeller geliştirilmiştir kontur ve miyokard infarktüsü az ve uzak olmakla birlikte. İlk kan pıhtılaşması modelleri de maymunlar, köpek ve domuz stenoz, hemostats ve daha sonra silindir damarları sık döngüsel akışı indirimleri14,15,16‘ kaynaklanan, uygulama üzerinde duruldu. Bir tıkayıcı trombüsü alanında ferrik klorid modeli olarak endotel hasar yerine trombüsü bu modellerde döngüsel trombozu, distal embolizasyon sonuçlandı ve normal kan akımını döndürür. Buna karşılık, ferrik klorid modeli burada büyük bir hayvan, bir tıkayıcı trombüsü yaralanma sitesinde sonuçlarında değiştirilen stabilize ve anjiyografi trombolitik tedavi öncesi tarafından doğrulanmadı. Araştırmacı başına Diem ve köpek dişleri ve yeterli cerrahi uzmanlık satın alma, biz burada büyük köpek manken vasküler yaralanma laboratuvarları trombozu kullanmak cerrahi, görüntüleme ve histolojik çalışma izin vermek için ayrıntılı için yeterli para olması koşuluyla teknikleri.
Protocol
Representative Results
Discussion
FeCl3 indüklenen vasküler yaralanma modeli biatriyal trombus küçük hayvanlar incelemek için yaygın olarak kullanılır ve bir sürü avantajı ile büyük bir hayvan, önceden klinik model çevirmek kolaydır. Protokol bir köpek adapte hafif değişiklikler izin bir farmakolojik müdahale ve anjiyografi damar kanalizasyon daha önce değerlendirmek için sonra kontur ve kanama birimleri değerlendirmek için her iki manyetik rezonans görüntüleme kullanımı sırasında ve tedaviden sonra. Trombotik …
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Merkezi bilişsel ve davranışsal beyin görüntüleme Ohio Eyalet Üniversitesi’nde geliştirmek ve köpek manyetik rezonans görüntüleme gerçekleştirmek finansal ve bilimsel destek için teşekkür etmek istiyorum.
Materials
| 1/8” umbilical tape | Jorgensen Laboratories Inc., | #J0025UA | for ferric chloride application |
| 4% paraformaldehyde in PBS | Alfa Aesar | AAJ61899AP | |
| 10% neutral buffered formalin | Richard-Allan Scientific | 5701 | |
| 2% 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC in PBS, pH 7.4) | Sigma Aldrich | T8877 | |
| ADP/Collagen cartridges | Siemens Diagnostics | B417021A | |
| 4.5 ml 3.2% sodium citrate blood vacutainer | Becton Dickinson | BD 369714 | |
| 4.5 ml lithium heparin vacutainer | Becton Dickinson | BD 368056 | |
| EDTA K3 vacutainers | Becton Dickinson | BD455036 | |
| Doppler flow probe | Transonic Systems Inc | MA2.5PSL | |
| Hematoxylin 560 | Surgipath | 3801570 | |
| Eosin | Surgipath | 3801602 | |
| LabChart Software | ADInstruments Inc. | ||
| Prisma Fit 3 tesla (3T) magnet | Siemen's Diagnostics | ||
| Sodium heparin for injection (to coat blood gas syringe) | NovaPlus | 402525D | |
| HUG-U-VAC positioning system | DRE Veterinary | 1320 |
Referências
- Adams, H. P. Stroke: a vascular pathology with inadequate management. Journal of Hypertension Supplement. 21 (5), S3-S7 (2003).
- Lansberg, M. G., Bluhmki, E., Thijs, V. N. Efficacy and safety of tissue plasminogen activator 3 to 4.5 hours after acute ischemic stroke: a metaanalysis. Stroke. 40 (7), 2438-2441 (2009).
- Nagel, S., et al. Therapy of acute basilar artery occlusion: intraarterial thrombolysis alone vs bridging therapy. Stroke. 40 (1), 140-146 (2009).
- Ciccone, A., Motto, C., Abraha, I., Cozzolino, F., Santilli, I. Glycoprotein IIb-IIIa inhibitors for acute ischaemic stroke. The Cochrane database of systematic reviews. 3 (3), (2014).
- The National Institute of Neurological Disorders and Stroke rt-PA Stroke Study Group. Tissue Plasminogen Activator for Acute Ischemic Stroke. New England Journal of Medicine. 333 (24), 1581-1588 (1995).
- Leadley, R., Chia, L., Rebellob, S., Gagnon, A. Contribution of in vivo models of thrombosis to the discovery and development of novel antithrombotic agents. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 43 (2), 101-116 (2000).
- Bodary, P. F., Eitzman, D. T. Animal Models of Thrombosis. Current Opinion In Hematology. 16 (5), 342-346 (2009).
- Sachs, U. J. H., Nieswandt, B. In vivo thrombus formation in murine models. Circulation Research. 100 (7), 979-991 (2007).
- Bonnard, T., Hagemeyer, C. E. Ferric Chloride-induced Thrombosis Mouse Model on Carotid Artery and Mesentery Vessel. Journal of Visualized Experiments. (100), e52838 (2015).
- Kurz, K. D., Main, B. W., Sandusky, G. E. Rat model of arterial thrombosis induced by ferric chloride. Thrombosis Research. 60 (4), 269-280 (1990).
- Karatas, H., Erdener, S. E., et al. Thrombotic distal middle cerebral artery occlusion produced by topical FeCl(3) application: a novel model suitable for intravital microscopy and thrombolysis studies. Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 31 (6), 1452-1460 (2011).
- Li, W., McIntyre, T. M., Silverstein, R. L. Ferric chloride-induced murine carotid arterial injury: A model of redox pathology. Redox Biology. 1 (1), 50-55 (2013).
- Vilahur, G., Padro, T., Badimon, L. Atherosclerosis and Thrombosis: Insights from Large Animal Models. Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 1-12 (2011).
- Coller, B. S., Folts, J. D., Smith, S. R., Scudder, L. E., Jordan, R. Abolition of in vivo Platelet Thrombus Formation in Primates with Monoclonal Antibodies to the Platelet GPIIb/IIIa Receptor. Correlation with Bleeding Time, Platelet Aggregation, and Blockade of GPIIb/IIIa Receptors. Circulation. 80 (6), 1766-1774 (1989).
- Folts, J. An in vivo Model of Experimental Arterial Stenosis, Intimal Damage, and Periodic Thrombosis. Circulation. 83 (6 Suppl), (1991).
- Yasuda, T., et al. A canine model of coronary artery thrombosis with superimposed high grade stenosis for the investigation of rethrombosis after thrombolysis. Journal of the American College of Cardiology. 13 (6), 1409-1414 (1989).
- Schob, S., et al. Correlation Between Aquaporin 4 Expression and Different DWI Parameters in Grade I Meningioma. Molecular Imaging and Biology : MIB : the Official Publication of the Academy of Molecular Imaging. 19 (1), 138-142 (2017).
- Schob, S., et al. Diffusion-Weighted Imaging Using a Readout-Segmented, Multishot EPI Sequence at 3 T Distinguishes between Morphologically Differentiated and Undifferentiated Subtypes of Thyroid Carcinoma-A Preliminary Study. Translational Oncology. 9 (5), 403-410 (2016).
- Schob, S., et al. Diffusion-Weighted MRI Reflects Proliferative Activity in Primary CNS Lymphoma. Public Library of Science One. 11 (8), e0161386 (2016).
