Summary

Modèle murine de la sténose veineuse centrale utilisant la fistule d'Aortocaval avec une stenose sortante

Published: July 11, 2019
doi:

Summary

Une fistule aortocaval a été créée en perforant l’aorte infra-rénale murine à travers les deux murs dans le cava vena inférieur et a été suivie par la création d’une sténose dans son écoulement par l’intermédiaire de la ligature partielle du cava vena inférieur. Ce modèle reproductible peut être utilisé pour étudier la sténose veineuse centrale.

Abstract

La sténose veineuse centrale est une entité importante contribuant à l’échec artériovenous de fistule (AVF). Un modèle aVF murine a été modifié pour créer une ligature partielle du cava inférieur de veine (IVC) dans le courant sortant de la fistule, imitant la sténose veineuse centrale. Les aspects techniques de ce modèle sont introduits. L’aorte et l’IVC sont exposés, suite à une incision abdominale. L’aorte infra-rénale et l’IVC sont disséqués pour le clampage proximal, et l’aorte distale est exposée pour la perforation. L’IVC au milieu entre la veine rénale gauche et la bifurcation aortique est soigneusement disséqué pour placer un 8-0 suture sous l’IVC. Après le clampage de l’aorte et de l’IVC, une AVF est créée en perforant l’aorte infra-rénale à travers les deux murs dans l’IVC avec une aiguille de 25 G, suivie d’une ligature d’un cathéter intra-veineux (IV) de 22 G et d’IVC ensemble. Le cathéter est ensuite enlevé, créant une sténose veineuse reproductible sans occlusion. L’aorte et l’IVC sont non-clamped après confirmation de l’hémostasie primaire. Ce nouveau modèle de sténose veinenelle centrale est facile à réaliser, reproductible, et facilitera les études sur l’échec de l’AVF.

Introduction

Les fistules artérioveineuses (AVF) sont les accès les plus communs pour l’hémodialyse, avec la patency supérieure et l’infection réduite comparée à d’autres accès tels que des greffes ou des cathéters veineux centraux. Cependant, jusqu’à 60% de l’AVF ne parviennent pas à mûrir1,2,3; un examen systématique récent a indiqué que les taux de patency primaire à 1 an étaient seulement 60%4. La sténose le long de l’écoulement veineux provoque principalement l’échec de la maturation AVF5,6. Il y a certains endroits caractéristiques enclins à la sténose proximale à la fistule : le segment de balancement juxtaanastomotic pour la fistule radiocéphalique, la région céphalique d’arc pour la fistule brachiocéphalique et la veine centrale pour la fistule avec précédemment placé ipsilateral subclavian ou interne cathéters de veine jugulaire7,8.

La sténose veineuse centrale est souvent asymptomatique dans les patients sans AVF, mais peut causer l’oiséème d’extrémité ipsilateral par l’hypertension veineuse aussi bien que l’échec de la maturation de fistule une fois défié par le fluxdefistule 9. La pathophysiologie de la sténose veineuse centrale est très probablement liée à l’inflammation et à la cascade activée de coagulation après le placement de dispositif. En outre, le mouvement constant de la pointe du cathéter ainsi que l’écoulement accru de la fistule peuvent altérer le stress de cisaillement, ayant pour résultat le dépôt de plaquette et l’épaississement de mur veineux10. Pour comprendre les mécanismes de base sous-jacents à l’échec de la VVA causée par la sténose veineuse centrale, un modèle animal imitant la sténose veineuse centrale avec une AVF est nécessaire.

Nous avons établi un modèle de fistule d’aortocaval murine qui est facile à exécuter et maître et récapitule le cours clinique de l’AVF humaine. 11 Nous avons appliqué les concepts et la technique de plusieurs modèles murins précédemment établis pour créer un modèle murine nouveau d’AVF avec la sténose veineuse. Nous introduisons un modèle de fistule aortocavale murine avec une sténose IVC dans la fistule de sortie qui peut être employée pour l’étude de la sténose veineuse centrale.

Protocol

Toutes les expériences ont été réalisées avec l’approbation du Comité institutionnel de soins et d’utilisation des animaux de l’Université Yale (IACUC). 1. Anesthésie et procédures préopératoires Stériliser tous les instruments et matériaux chirurgicaux en autoclantant. Activez le dispositif de support thermique pour être certain qu’il est chaud (40 à 42 oC). Placez une souris C57BL/6 de 9 à 11 semaines dans une chambre d’induction acrylique et anesthésiez-…

Representative Results

Les souris mâles ont subi l’opération mentionnée ci-dessus pour créer une AVF et une sténose ivC. Les souris témoins n’ont subi que la laparotomie et la dissection des tissus entourant l’IVC, par exemple, une procédure fictive, ou seulement la création d’une sténose IVC sans création simultanée d’une AVF. L’IVC a été observé avec l’échographie doppler le jour 7 après l’intervention chirurgicale (<strong class="xf…

Discussion

Le modèle aVF murine a été utilisé pour étudier les mécanismes de base et les événements moléculaires conduisant à la maturation AVF13,14. Dans cette étude, nous avons modifié un modèle aVF murine établi pour créer un nouveau modèle de fistule aortocaval murine avec une sténose IVC dans le tractus sortant de la fistule. Notre modèle de ligature est semblable à plusieurs modèles murins précédemment décrits qui emploient la ligature vasculair…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Ce travail a été soutenu par le National Institute of Health (NIH) des États-Unis Grant R01-HL128406; le prix I01-BX00236 du Programme d’examen du mérite du Ministère des Anciens Combattants des États-Unis pour la recherche et le développement en laboratoire biomédical; ainsi qu’avec les ressources et l’utilisation des installations au va Connecticut Healthcare System, West Haven, CT.

Materials

20-60 Mhz scan head VisualSonics Inc. RMV-704
8-0 Sterile Micro Suture, 6mm (140 µ), 3/8 Circle, TAP Point Needle AROSuture T06A08N14-13 polyamide monofilament sutures
Induction Chamber, 2 Liter
3.75"W x 9.00"D x 3.75"H
VetEquip 941444
Isoflo, Isoflurane liquid Zoetis 26675-46-7
Mice, C57BL/6J The Jackson Laboratory 664
Pet Bed Microwave Heating Pad Snuggle Safe 6250
PrecisionGlide Needle 25G BD 305122
Surflo I.V. Catheter 22G Terumo SR-OX2225CA 0.85mm outer diameter
Vascular clamp Roboz Surgical Instrument RS-5424
Vevo770 High Resolution Imaging System VisualSonics Inc. 770

Referências

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Citar este artigo
Isaji, T., Ono, S., Hashimoto, T., Yamamoto, K., Taniguchi, R., Hu, H., Wang, T., Koizumi, J., Nishibe, T., Hoshina, K., Dardik, A. Murine Model of Central Venous Stenosis using Aortocaval Fistula with an Outflow Stenosis. J. Vis. Exp. (149), e59540, doi:10.3791/59540 (2019).

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