Este protocolo detalha os passos cirúrgicos da criação da fístula arteriovenosa ilíaca comum murina. Desenvolvemos este modelo para estudar a fisiopatologia do membro relacionada ao acesso hemodialítico.
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Artigo de método
Um modelo murino de disfunção da mão relacionada ao acesso para hemodiálise
Neste artigo
Resumo
Resumo
A doença renal crônica é um importante problema de saúde pública, e a prevalência de doença renal terminal (DRT) que requer terapias renais substitutivas crônicas, como hemodiálise, continua a aumentar. A colocação de fístula arteriovenosa autógena (FAV) continua sendo uma opção de acesso vascular primário para pacientes com DRCT. Infelizmente, aproximadamente metade dos pacientes em hemodiálise apresenta disfunção da mão relacionada ao acesso dialítico (DRA), variando de parestesia sutil a gangrena digital. Notavelmente, os fatores biológicos subjacentes responsáveis pela DRA são pouco compreendidos, e não existe um modelo animal adequado para elucidar os mecanismos e/ou desenvolver novas terapêuticas para a prevenção/tratamento da DRSA. Descrevemos um novo modelo de camundongo no qual uma FAV é criada entre a artéria ilíaca comum esquerda e a veia, facilitando a avaliação da fisiopatologia do membro. A microcirurgia inclui isolamento de vasos, venotomia longitudinal, criação de anastomose arteriovenosa e reconstrução venosa. As cirurgias simuladas incluem todas as etapas críticas, exceto a criação de FAV. A colocação de FAV ilíaca resulta em alterações clinicamente relevantes na hemodinâmica central, isquemia periférica e prejuízos no desempenho neuromotor dos membros posteriores. Este novo modelo pré-clínico de FAV fornece uma plataforma útil que recapitula perturbações neuromotoras comuns relatadas por pacientes em hemodiálise, permitindo que os pesquisadores investiguem os mecanismos da fisiopatologia da DRA e testem potenciais terapêuticas.
Introdução
O estabelecimento e a preservação do acesso vascular funcional continuam sendo uma meta primária importante para pacientes com doença renal terminal (DRT) em terapia renal substitutiva via hemodiálise1. Tratamentos repetidos de hemodiálise são necessários para remover os resíduos, normalizar eletrólitos e manter o equilíbrio hídrico uma vez que a função renal se torne inadequada e, portanto, são necessários para a sobrevida em longo prazo2. Portanto, o acesso vascular representa uma "tábua de salvação" para pacientes com DRCT, e a colocação de fístula arteriovenosa autógena (FAV) continua sendo uma opção preferencial
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Protocolo
Todos os procedimentos foram aprovados pelo Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) da Universidade da Flórida e pelo Malcom Randall Veterans Affairs Medical Center.
NOTA: Camundongos C57BL/6J machos adultos jovens (8-10 semanas de idade) foram adquiridos do The Jackson Laboratory e alojados em um biotério controlado com luz (12 h de luz: ciclo de 12 h de escuro), temperatura (22 °C ± 1 °C) e umidade (50% ± 10%). Cinco camundongos foram autorizados a habitar por gaiola (W:18 cm x L:29 cm x H:12,5 cm) com materiais de nidificação, alimento e água sendo disponibilizados ad libitum. Após 7 dias de aclimatação do habitat co....
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Resultados
Animais expostos à dieta com adenina apresentaram taxas de filtração glomerular reduzidas (controle: 441,3 ± 54,2 μL/min vs. DRC: 165,1 ± 118,3 μL/min, p < 0,05) e níveis séricos de nitrogênio ureico (controle: 20,39 ± 4,2 μL/min vs. DRC: 38,20 ± 10,65 μL/min, p < 0,05) em comparação aos animais que receberam ração à base de caseína, confirmando a presença de insuficiência renal prévia à cirurgia de fístula arteriovenosa.
Validação da perviedade da FAV.......
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Discussão
A prevalência de pacientes em hemodiálise com DRA após a criação de FAV continua a aumentar30,31. De fato, complicações sintomáticas não resolvidas 4,32,33 como dor, fraqueza, parestesia e/ou redução da amplitude de movimento podem afetar negativamente o bem-estar do paciente 4,32,33,34,35,36 e ameaçar sua capacidade de receber tratamento repetitivo de hemodiálise de alta qualidade.
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Divulgações
Os autores não têm nada a revelar.
Agradecimentos
Agradecemos sinceramente ao Dr. Guanyi Lu da Divisão de Cirurgia Vascular e Terapia Endovascular da Universidade da Flórida pelo apoio técnico no desenvolvimento do modelo de FAV ilíaca, bem como treinamento cirúrgico, e a Ravi Kumar do Departamento de Fisiologia Aplicada e Cinesiologia da Universidade da Flórida pelo suporte técnico na obtenção das imagens microcirúrgicas ao vivo.
Este trabalho foi apoiado por subsídios do National Institutes of Health e National Heart, Lung, and Blood, Institute números R01-HL148697 (para S.T.S.), bem como o número de concessão da American Heart Association POST903198 (para K.K.).
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| 0,15% Dieta de adenina | ENVIGO | TD.130899 | 20% caseína, 0,15% adenina, 0,9% P |
| 0,2% Dieta de adenina | ENVIGO | TD.130900 | 20% caseína, 0,2% adenina, 0,9% P |
| 10-0 Sutura de nylon | AD cirúrgica | XXS-N1005T4 | |
| Seringas de agulha de 29 G | Exel International | 14-841-32 | |
| Seringas de agulha de 31 G | Advocate | U-100 seringa de | |
| 4-0 sutura de seda | AD cirúrgica | S-S41813 | |
| pinça dumont angular de 45 graus | Ferramentas de Fine Science | 11253-25 | |
| 5-0 sutura PGA | AD cirúrgica | PSGU-518R13 | |
| 6-0 sutura de seda | AD cirúrgica | S-S618R13 | |
| Esponja de gelatina absorvível | ETHICON | 1975 | |
| Preparações de álcool | Covidien | 5110-cs4000 | Álcool isopropílico 70% |
| Buprenorfina | NA | NA | 0,01 g/mL |
| C57BL6/J camundongos | Jaxon Laboratory | ||
| Caseína dieta | ENVIGO | TD.130898 | 20% caseína, 0,9% P |
| Cotonetes de algodão | CONSTIX | SC-9 | Cotonete redondo médio de ponta única Cotonetes |
| de algodão | CONSTIX | SC-4 | Pequeno cotonete duro, afiado e pontiagudo |
| Curity esponjas não tecidas (2x2) | Covidien | 9022 | |
| Tesoura de mola Vannas curvada | Fine Science Tools | 15001-08 | |
| Ultrassom Doppler | VisualSonics | Vevo 2100 | |
| Pinça graefe extra fina | Fine Science Tools | 11150-10 | 2 pares |
| Eye lubrificante | CLCMEDICA | Optixcare lubrificante ocular | |
| Heparina (5000 U / mL) | Lista Nacional de Códigos | de Medicamentos 63739-953-25 | 100 UI / mL |
| Esterilizador de esferas quentes | Fine Science Tools | 18000-50 | |
| Cautério de baixa temperatura | Bovie | AA04 | |
| Aparador de caneta | Wahl | 5640-600 | |
| Luvas | cirúrgicas sem póAnsell | 7824PF | |
| Porta-agulhas com cabo redondo | Fine Science Tools | 12076-12 | |
| Campo de toalha estéril | Dynarex | DY440-MI | |
| Esterilizado 0,9% de solução salina | Lista de Códigos Nacionais de Medicamentos | 46066-807-25 | |
| Pinça dumont reta | Fine Science Tools | 11253-20 | |
| Porta-agulha reta | Fine Science Ferramentas | FST 12001-13 | |
| Tesoura de mola vannas reta | Ferramentas de ciência fina | 25001-08 | |
| TrizChLOR4 | Lista Nacional de Códigos de Drogas | 17033-279-50 |
Referências
- Gameiro, J., Ibeas, J. Factors affecting arteriovenous fistula dysfunction: a narrative review. The Journal of Vascular Access. 21 (2), 134-147 (2020).
- Culleton, B. F., Asola, M. R. The impact of short daily an....
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Reimpressões e permissões
