Bu protokol, murin ortak iliak arteriyovenöz fistül oluşumunun cerrahi adımlarını detaylandırır. Bu modeli hemodiyaliz erişimi ile ilişkili ekstremite patofizyolojisini incelemek için geliştirdik.
Kronik böbrek hastalığı önemli bir halk sağlığı sorunudur ve hemodiyaliz gibi kronik renal replasman tedavileri gerektiren son dönem böbrek hastalığı (SDBY) prevalansı artmaya devam etmektedir. Otojen arteriyovenöz fistül (AVF) yerleştirilmesi, SDBY’li hastalar için primer vasküler erişim seçeneği olmaya devam etmektedir. Ne yazık ki, hemodiyaliz hastalarının yaklaşık yarısı, ince paresteziden dijital kangrene kadar değişen diyaliz erişimi ile ilişkili el disfonksiyonu (ARHD) yaşamaktadır. Özellikle, ARHD’den sorumlu olan altta yatan biyolojik faktörler tam olarak anlaşılamamıştır ve mekanizmaları aydınlatmak ve / veya ARHD’nin önlenmesi / tedavisi için yeni terapötikler geliştirmek için yeterli hayvan modeli yoktur. Burada, sol ortak iliak arter ve ven arasında bir AVF’nin oluşturulduğu ve böylece ekstremite patofizyolojisinin değerlendirilmesini kolaylaştıran yeni bir fare modeli tanımlanmıştır. Mikrocerrahi, damar izolasyonu, uzunlamasına venotomi, arteriyovenöz anastomoz oluşumu ve venöz rekonstrüksiyonu içerir. Sahte ameliyatlar, AVF oluşturma dışındaki tüm kritik adımları içerir. İliak AVF yerleşimi santral hemodinamik, periferik iskemi ve arka ekstremite nöromotor performansında bozulmalara klinik olarak anlamlı değişiklikler ile sonuçlanır. Bu yeni preklinik AVF modeli, hemodiyaliz hastaları tarafından bildirilen yaygın nöromotor pertürbasyonları özetleyen ve araştırmacıların ARHD patofizyolojisinin mekanizmalarını araştırmalarına ve potansiyel terapötikleri test etmelerine olanak tanıyan yararlı bir platform sunmaktadır.
Fonksiyonel vasküler erişimin sağlanması ve korunması, hemodiyaliz yoluyla renal replasman tedavisi alan son dönem böbrek hastalığı (SDBY) hastaları için önemli bir birincil hedef olmaya devam etmektedir1. Tekrarlanan hemodiyaliz tedavileri, atık ürünleri uzaklaştırmak, elektrolitleri normalleştirmek ve böbrek fonksiyonu yetersiz kaldığında sıvı dengesini korumak için gereklidir ve bu nedenle uzun süreli sağkalım için gereklidir2. Bu nedenle, vasküler erişim SDBY’li hastalar için bir “yaşam çizgisi” dir ve otojen arteriyovenöz fistül (AVF) yerleşimi bu kohort3 arasında tercih edilen bir diyaliz erişim seçeneği olmaya devam etmektedir. Bununla birlikte, hemodiyaliz hastalarının yaklaşık% 30-60’ı, klinik olarak erişimle ilişkili el disfonksiyonu (ARHD) olarak tanımlanan bir el sakatlığı spektrumu yaşamaktadır. ARHD’nin semptomları zayıflık ve koordinasyonsuzluktan monopleji ve dijital kangrene kadar değişebilir, bu da AVF oluşturulduktan hemen sonra ortaya çıkabilir veya fistül olgunlaşması ile yavaş yavaş gelişebilir. Ayrıca, ARHD, düşük yaşam kalitesi, yüksek kardiyovasküler hastalık riski ve artmış mortalite 2,3,4 ile ilişkili SDBY tedavi programını karmaşıklaştırmaktadır.
AVF oluşumunu takiben hemodinamik değişikliklerin neden olduğu vasküler yeniden şekillenmeyi incelemek için çeşitli hayvan modelleri geliştirilmiştir 5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15. İliak veya femoral AVF 16,17,18,19,20 olan büyük hayvan modelleri ve karotis arter-juguler ven anastomozu veya infrarenal aort-inferior vena kava fistül formasyonu kullanan kemirgen modelleri, AVF olgunlaşmasının ve açıklığının yukarıda belirtilen yönlerini incelemek için iyi kurulmuştur 21 . Örneğin, venöz hipertansiyon, daha büyük luminal çap ve artmış ven duvarı kalınlığı başarılı AVF olgunlaşmasının imzalarıdır, oysa medyanın önemli fibrozisi ve akışta herhangi bir değişiklik olmaksızın intimal hiperplazi veya trombüs gelişimi sıklıkla AVF başarısızlıklarını karakterize eder 6,15. Bununla birlikte, büyük hayvan modelleri, murin modellerinin deneysel esnekliğinden veya transgenik yeteneklerinden yoksunken, mevcut kemirgen modelleri, anatomik konum ve / veya ilişkili uzuv patolojisinin eksikliği nedeniyle ARHD’nin araştırılmasını kolayca kolaylaştırmamaktadır. Gerçekten de, ilgili klinik fenotipi özetleyen yerleşik bir preklinik hayvan modelinin eksikliği nedeniyle, semptomatik ARHD hastalarının sayısındaki ilerleyici artışa rağmen, patobiyolojik mekanizmaları aydınlatmak ve yeni terapötik stratejiler geliştirmek için araştırma ilerlemesi durgun kalmıştır. Bu nedenle, bu çalışmanın temel amacı, AVF mikrocerrahisinin prosedürel adımlarını ve AVF ile ilişkili patofizyolojinin karakterizasyonunu sağlayan benzersiz bir ARHD fare modelini tanıtmaktır.
AVF oluşumunu takiben AHB’li hemodiyaliz hastalarının prevalansı30,31 artmaya devam etmiştir. Gerçekten de, ağrı, halsizlik, parestezi ve / veya azalmış hareket açıklığı gibi çözülmemiş semptomatik komplikasyonlar 4,32,33,34,35,36 hasta refahını olumsuz yönde etkileyebilir ve yüksek kaliteli tekrarlayan hemodiyaliz tedavisi alma kapasitelerini tehdit edebilir.</sup…
The authors have nothing to disclose.
Florida Üniversitesi Vasküler Cerrahi ve Endovasküler Terapi Bölümü’nden Dr. Guanyi Lu’ya, iliak AVF modelinin geliştirilmesi ve cerrahi eğitim konusundaki teknik destek için ve Florida Üniversitesi Uygulamalı Fizyoloji ve Kinesiyoloji Bölümü’nden Ravi Kumar’a canlı mikrocerrahi görüntüleri elde eden teknik destek için içtenlikle teşekkür ederiz.
Bu çalışma, Ulusal Sağlık ve Ulusal Kalp, Akciğer ve Kan Enstitüleri, R01-HL148697 Enstitü numaraları (S.T.S.’ye) ve Amerikan Kalp Derneği hibe numarası POST903198 (K.K.’ya) tarafından desteklenmiştir.
0.15% Adenine diet | ENVIGO | TD.130899 | 20% casein, 0.15% adenine, 0.9% P |
0.2% Adenine diet | ENVIGO | TD.130900 | 20% casein, 0.2% adenine, 0.9% P |
10-0 Nylon suture | AD surgical | XXS-N1005T4 | |
29 G needle syringes | Exel International | 14-841-32 | |
31 G needle syringes | Advocate | U-100 insulin syringe | |
4-0 silk suture | AD surgical | S-S41813 | |
45-degree angled dumont forceps | Fine Science Tools | 11253-25 | |
5-0 PGA suture | AD surgical | PSGU-518R13 | |
6-0 silk suture | AD surgical | S-S618R13 | |
Absorbable gelatin sponge | ETHICON | 1975 | |
Alcohol preps | Covidien | 5110-cs4000 | 70% isopropyl alcohol |
Buprenorphine | NA | NA | 0.01 g/mL |
C57BL6/J mice | Jaxon Laboratory | ||
Casein diet | ENVIGO | TD.130898 | 20% casein, 0.9% P |
Cotton swabs | CONSTIX | SC-9 | Medium single-ended round cotton swab |
Cotton swabs | CONSTIX | SC-4 | Small double-ended hard, sharp, pointed cotton swab |
Curity non-woven sponges (2×2) | Covidien | 9022 | |
Curved Vannas spring scissors | Fine Science Tools | 15001-08 | |
Doppler ultrasound | VisualSonics | Vevo 2100 | |
Extra fine graefe forceps | Fine Science Tools | 11150-10 | 2 pairs |
Eye lubricant | CLCMEDICA | Optixcare eye lube | |
Heparin (5000 U/mL) | National Drug Codes List | 63739-953-25 | 100 IU/mL |
Hot bead sterilizer | Fine Science Tools | 18000-50 | |
Low-temperature cautery | Bovie | AA04 | |
Pen trimmer | Wahl | 5640-600 | |
Powder-free surgical gloves | Ansell | 7824PF | |
Round handled needle holders | Fine Science Tools | 12076-12 | |
Sterile towel drape | Dynarex | DY440-MI | |
Sterilized 0.9% saline | National Drug Codes List | 46066-807-25 | |
Straight dumont forceps | Fine Science Tools | 11253-20 | |
Straight needle holder | Fine Science Tools | FST 12001-13 | |
Straight vannas spring scissors | Fine Science Tools | 25001-08 | |
TrizChLOR4 | National Drug Codes List | 17033-279-50 |