Этот протокол свидетельствует о том, как выполнить иммуногистохимии на расчлененный личинки дрозофилы.
Abstract
<em> Drosophila</em> Нервно-мышечном соединении (NMJ) является создана модель системы, используемой для исследования синаптических развития и пластичности. Широкое использование<em> Drosophila</em> Двигательного аппарата связано с его высокой доступности. Это могут быть проанализированы с одноклеточных разрешения. Есть 30 мышцы в hemisegment которого механизмом в рамках периферийной стенке тела известны. В общей сложности 31 моторных нейронов придают эти мышцы в шаблон, который имеет высокую точность. Использование молекулярной биологии и генетики, можно создать трансгенных животных или мутанты. Затем, можно изучать последствия развития на морфологию и функцию NMJ. Immunohistochemistry может использоваться для четко изображение компонентов NMJ. В этой статье мы покажем, как использовать антитела окрашивания для визуализации<em> Drosophila</em> Личиночной NMJ.
Protocol
Перед тем как начать Подготовьте следующие решения: PBT (0,1% Triton X100 в 1X PBS), PBTB (0,2% BSA в PBT) и PBTN (2% в PBTB NGS). Рассеките дрозофилы личинок. Пожалуйста, смотрите дрозофилы личинок NMJ Dissection. Иммуногистохимия Перемещение личинок 1,5 мл пробирку PBT. Вымо…
Discussion
Иммуногистохимии (IHC) имеет жизненно важное значение для изучения NMJ биологии, поскольку она позволяет визуализировать NMJ. Это достигается с помощью антител, которые распознают нейронной мембраны (например, HRP), presynapse (например, CSP, SYT), и / или postsynapse (например, DLG). Сигнальных молекул, структ?…