ヒト膵島の高品質と適切な量を達成することが成功した膵島移植のための著名な前提条件の一つです。このビデオでは、我々は段階的に説明し、人間の膵島を分離するための手順:変更された自動化法を用いて(パートI消化および膵組織のコレクション)。
1型糖尿病の管理は、年間1,000億ドルで、個人と社会の両方に、厄介です。グルコースモニタリングと新しいインスリン製剤の普及にもかかわらず、多くの個人はまだ壊滅的な二次的合併症を開発する。膵島移植は、糖尿病患者における正常血糖コントロールの近くに復元することができます<sup> 1</sup>、集中的なインスリン療法に関連付けられている重篤な低血糖エピソードのリスクなし。十分な膵島質量を提供することに成功した膵島移植のために重要です。しかし、ドナーの特性、臓器の調達と保存には、分離結果に影響を及ぼす<sup> 2</sup>。イリノイ大学シカゴ校(UIC)で我々は改善された精製勾配で成功した分離プロトコルを開発している<sup> 3</sup>。プログラムは、2004年1月に開始し、300人以上のアイソレーションは、2008年11月までに実施された。膵臓は冷たい保存液(UW、ウィスコンシン州またはHTKの大学、ヒスチジン – トリプトファンケトグルタル酸)に送られ、<sup> 4月7日</sup>膵島分離のためのUICにおける細胞分離の研究室へ。膵島は、もともとRicordiの記載された方法を改変したものですUIC方法を、用いて単離された<em>ら</em><sup> 8</sup>。簡単に言えば、周囲の組織から膵臓をクリーニングした後、それは酵素溶液(Servaコラゲナーゼ+中性プロテアーゼまたはシグマV酵素)で灌流した。膨張した膵臓は、その後、Ricordiの消化槽に移し、変更、閉鎖循環配管システムに接続し、37℃まで加温した。消化中に、チャンバーを穏やかに振とうした。サンプルは、消化の進行状況を監視するために連続して撮影した。無料の島が顕微鏡下で検出された一度、消化酵素を希釈する循環システムへのコールド(4℃)RPMI希釈液(Mediatech、ハーンドン、バージニア州)をフラッシュして停止した。収集し、ヒトアルブミンを添加したM199培地で洗浄した後、組織は、事前に精製数をサンプリングし、精製前のUW液でインキュベートした。ヒト膵島の精製と文化:精製工程は、第II部で説明される。
分離の結果9,10に影響を与える要因はさまざまです。その中で、膵組織の消化は、重要な役割を果たしている。私たち自身の人間の膵島分離の経験に基づいて、我々は潜在的に膵島の収量と品質に影響を与えうる重要なポイントは、以下の要約。
イリノイ大学シカゴ校だけでなく、膵島細胞リソースセンターNIHの助成金(RFA – RR 05から003)、クリストファー財団、Efroymson財団、およびテラブス財団からの資金によって支え。