Summary

Normalisation Né pour tomographie par fluorescence de projection optique pour l'imagerie cardiaque entier

Published: June 02, 2009
doi:

Summary

Nous suggérons une approche normalisée pour la tomographie Né projection optique (BnOPT) qui représente les propriétés d'absorption des échantillons imagés pour obtenir précises et quantitatives de fluorescence reconstructions tomographiques. Nous utilisons l'algorithme proposé de reconstruire la distribution de sonde fluorescence moléculaire au sein des organes d'animaux de petite taille.

Abstract

La tomographie optique de projection est une technique d'imagerie en trois dimensions qui a été récemment présenté comme un outil d'imagerie principalement dans la biologie du développement et les études d'expression génique. La technique rend échantillon biologique optiquement transparents en commençant par les déshydrater et en plaçant ensuite dans un mélange d'alcool benzylique et de benzoate de benzyle dans un rapport 2:1 (BABB ou Murray solution S Clair). La technique rend les échantillons biologiques optiquement transparents en commençant par les déshydratant dans des solutions d'éthanol à les placer ensuite dans un mélange d'alcool benzylique et de benzoate de benzyle dans un rapport 2:1 (ou une solution claire BABB Murray s) à effacer. Après le processus de compensation de la contribution de diffusion dans l'échantillon peut être considérablement réduit et a fait presque négligeable alors que la contribution d'absorption ne peut pas être complètement éliminés. En essayant de reconstruire la distribution de fluorescence dans l'échantillon de l'enquête, cette contribution affecte les reconstructions et conduit inévitablement à des artefacts d'image et des erreurs de quantification .. Alors que l'absorption pourrait être encore réduit avec une permanence de plusieurs semaines ou mois dans les médias de compensation, ce qui conduira à une perte progressive de la fluorescence et à un temps de traitement des échantillons anormalement long. Cela est vrai lorsque la reconstruction de deux agents de contraste exogènes (agents de contraste moléculaires) ainsi que le contraste endogène (par exemple des reconstitutions génétiquement exprimé protéines fluorescentes).

Protocol

Procédure d'imagerie Le dispositif expérimental est présenté en détail dans la figure 1. Une source de lumière LS sert à la fois l'éclairage pour des mesures d'absorption et comme source d'excitation pour des mesures de fluorescence et elle est filtrée avec une bande étroite d'interférence filtre passe BPF. Un ensemble de filtres de densité fixe et variable ND neutre associé à la présence d'un obturateur automatique S permettent de contrôler la quantité…

Acknowledgements

C. Vinegoni reconnaît le soutien de National Institutes of Health (NIH) accorder une-SR1-EB006432.

References

  1. Sharpe, J., Ahlgren, U., Perry, P., Hill, B., Ross, A., Hecksher-Sorensen, J., Baldock, R., Davidson, D. Optical projection tomography as a tool for 3D microscopy and gene expression studies. Science. 296, 541-544 (2002).
  2. Lee, K., Avondo, J., Morrison, H., Blot, L., Stark, M., Sharpe, J., Bangham, A., Coen, E. Visualizing plant development and gene in three dimensions using optical projection tomography. Plant Cell. 18, 2145-2156 (2006).
  3. Oldham, M., Sakhalkar, H., Wang, Y. M., Guo, P. Y., Oliver, T., Bentley, R., Vujaskovic, Z., Dewhirst, M. Three-dimensional imaging of whole rodent organs using optical computed and emission tomography. J. Biomed. Opt. 12, 1-10 (2007).
  4. Ntziachristos, V., Weissleder, R. Experimental three-dimensional fluorescence reconstruction of diffuse media by use of a normalized Born approximation. Opt. Lett. 26, 893-895 (2001).
check_url/1389?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Vinegoni, C., Razansky, D., Figueiredo, J., Fexon, L., Pivovarov, M., Nahrendorf, M., Ntziachristos, V., Weissleder, R. Born Normalization for Fluorescence Optical Projection Tomography for Whole Heart Imaging. J. Vis. Exp. (28), e1389, doi:10.3791/1389 (2009).

View Video