Summary

Tüm Kalp Görüntüleme Floresan Optik Projeksiyon Tomografi tarihi Normalizasyon

Published: June 02, 2009
doi:

Summary

Biz doğru ve kantitatif floresan tomografik rekonstrüksiyonlar elde etmek için görüntülü örneklerin emme özellikleri hesapları Optik Projeksiyon Tomografi için tarihi bir normalize yaklaşım (BnOPT) öneririm. Biz küçük hayvan organları içinde floresan moleküler prob dağılımını yeniden oluşturmak için önerilen bir algoritma kullanır.

Abstract

Optik projeksiyon tomografi, son zamanlarda gelişimsel biyoloji ve gen ekspresyon çalışmaları öncelikle bir görüntüleme aracı olarak ortaya konmuştur üç boyutlu bir görüntüleme tekniğidir. Ilk susuzlaştırma ve daha sonra bir 2:1 oranında (Babb veya Murray ler Temizle çözüm) benzil alkol ve benzil benzoat karışımı yerleştirme tekniği optik şeffaf biyolojik örnek vermektedir. Tekniği ilk temizlemek için 2:1 oranında (Babb veya Murray s sifresiz çözüm) benzil alkol ve benzil benzoat karışımı yerleştirerek kademeli etanol çözümler dehydrating optik şeffaf biyolojik örnekler vermektedir. Emilimini katkısı tamamen ortadan kaldırılamaz ise, temizleme işleminden sonra örnek saçılma katkısı büyük ölçüde azalır ve yok denecek kadar yapılmış olabilir. Soruşturma kapsamında numune içinde floresan dağılımını yeniden oluşturmak için çalışırken, bu katkının resim gölgeleri ve miktar hataları, kaçınılmaz olarak, rekonstrüksiyonları ve potansiyel etkiler .. Emilimi, hafta veya takas medya ay kalıcılığı daha da azaltılmış olabilir, bu floresan ilerici kaybı ve gerçek olamayacak kadar uzun bir örnek işlem süresi yol açacaktır. Hem de ekzojen kontrast ajanlar (moleküler kontrast ajanlar) gibi endojen kontrast (genetik olarak ifade floresan proteinleri örneğin rekonstrüksiyonlar) yeniden Bu doğrudur.

Protocol

Görüntüleme Prosedürü Deney düzeneği Şekil 1'de ayrıntılı olarak gösterilmiştir. Bir ışık kaynağı LS emme ölçümleri için aydınlatma ve uyarma kaynağı olarak floresans ölçümleri için de hizmet vermekte ve dar bir bant geçiren girişim filtresi BPF, filtre edilir. S örnek ışık miktarını kontrol etmek ve herhangi bir photobleaching önlemek için yeterince düşük tutmak için izin veren bir otomatik deklanşöre varlığı ile birlikte sabit ve değişken…

Acknowledgements

C. Vinegoni Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIH) hibe 1-RO1-EB006432 desteği kabul eder.

References

  1. Sharpe, J., Ahlgren, U., Perry, P., Hill, B., Ross, A., Hecksher-Sorensen, J., Baldock, R., Davidson, D. Optical projection tomography as a tool for 3D microscopy and gene expression studies. Science. 296, 541-544 (2002).
  2. Lee, K., Avondo, J., Morrison, H., Blot, L., Stark, M., Sharpe, J., Bangham, A., Coen, E. Visualizing plant development and gene in three dimensions using optical projection tomography. Plant Cell. 18, 2145-2156 (2006).
  3. Oldham, M., Sakhalkar, H., Wang, Y. M., Guo, P. Y., Oliver, T., Bentley, R., Vujaskovic, Z., Dewhirst, M. Three-dimensional imaging of whole rodent organs using optical computed and emission tomography. J. Biomed. Opt. 12, 1-10 (2007).
  4. Ntziachristos, V., Weissleder, R. Experimental three-dimensional fluorescence reconstruction of diffuse media by use of a normalized Born approximation. Opt. Lett. 26, 893-895 (2001).
check_url/1389?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Vinegoni, C., Razansky, D., Figueiredo, J., Fexon, L., Pivovarov, M., Nahrendorf, M., Ntziachristos, V., Weissleder, R. Born Normalization for Fluorescence Optical Projection Tomography for Whole Heart Imaging. J. Vis. Exp. (28), e1389, doi:10.3791/1389 (2009).

View Video