Summary

Microelectrodes पर patterning biomolecules के लिए सेल्फ इकट्ठे monolayers antifouling

Published: August 25, 2009
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Summary

हम सोने microelectrodes के साथ एक सिलिकॉन सब्सट्रेट पर एक पाली (ethylene glycol) monolayer आत्म इकट्ठे (खूंटी – एसएएम) के गठन के लिए एक प्रक्रिया मौजूद है. खूंटी – एसएएम एक भी कदम में गठन किया गया है और सिलिकॉन और सोने की सतहों पर biofouling रोकता है. वैद्युतकणसंचलन तो patterning biomolecules के लिए प्रयोग किया जाता है के nanoscale के लिए नीचे.

Abstract

हम सोने microelectrodes के साथ एक सिलिकॉन सब्सट्रेट पर एक पाली (ethylene glycol) (खूंटी) trimethoxysilane monolayer आत्म इकट्ठे (एसएएम) के गठन के लिए एक प्रक्रिया मौजूद है. खूंटी – एसएएम एक एकल विधानसभा कदम में बनाई है और सिलिकॉन और सोने की सतहों पर biofouling रोकता है. सैम मानक, लिथोग्राफी सकारात्मक टोन के साथ नमूनों कोट microelectrodes करने के लिए प्रयोग किया जाता है. एक उदाहरण के रूप में microtubule का उपयोग करना, हम एक डीसी वोल्टेज के लिए एक प्रतिवर्ती तरीके सैम – लेपित इलेक्ट्रोड electrophoretic प्रवास प्रेरित लागू होते हैं. एक प्रवाह कक्ष electrophoretic प्रवास और microtubule patterning इमेजिंग के लिए प्रयोग किया जाता है<em> बगल में</em> Epifluorescence माइक्रोस्कोपी का उपयोग कर. इस पद्धति का आम तौर पर biomolecule patterning के लिए लागू है, के रूप में यह वैद्युतकणसंचलन रोजगार के लक्ष्य अणुओं को स्थिर करना और इस प्रकार विशिष्ट आणविक मुलाकातों की आवश्यकता नहीं है. इसके अलावा, यह सामना करना पड़ा जब पैटर्न सैम अणुओं को सीधे तकनीक lithographic का उपयोग करने का प्रयास समस्याओं से बचा जाता है. इलेक्ट्रॉन किरण अश्मलेखन के साथ संगतता की अनुमति देता है इस विधि nanoscale पर पैटर्न biomolecules के लिए इस्तेमाल किया.

Protocol

अभिकर्मकों की तैयारी पाइप बफर (80 मिमी पाइप, 1mm MgCl 2, 1mm EGTA KOH के साथ 6.8 पीएच को समायोजित) तैयार करें . विभाज्य और दुकान ग्लूकोज oxidase, catalase -70 और ग्लूकोज डिग्री सेल्सियस और -20 पर taxol डिग्री सेल्सियस मौजूदा प?…

Discussion

लाख टन के प्रवास को आसानी से क्योंकि उनकी चमक और कम पृष्ठभूमि प्रतिदीप्ति के प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी का उपयोग कल्पना है. विधि आम तौर पर है biomolecule patterning के लिए लागू है, के रूप में यह केवल आवश्यकता है कि biomolecu…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

हम सैम गठन पर उपयोगी विचार – विमर्श के लिए मेलिस्सा Grunlan स्वीकार करते हैं. इस शोध में भाग रॉबर्ट ए वेल्च फाउंडेशन (A-१,५८५) द्वारा समर्थित किया गया था.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
2-[methoxypoly-(ethyleneoxy)propyl]-trimethoxysilane (PEG-silane)   Gelest, Inc. SIM6492.7 6-9 PEG units; molecular weight 450-600 g mol-1
2-mercaptoethanol   Sigma M7522  
Acetone   EMD Chemicals AX0120-8 ACS grade
Catalase   Calbiochem 219001-5MU  
Chlorobenzene   EMD Chemicals MK441908 ACS grade
Ethylene glycol-bis(2-aminoethylether)-N,N,N’,N’-tetraacetic acid (EGTA)   Calbiochem 324626  
Glucose   EMD Chemicals DX0145-1  
Glucose oxidase   MP Biomedicals 100330  
Guanosine-5’-[(α,Β)-methyleno]triphosphate, Sodium salt (GMPCPP)   Jena Biosciences, GmbH NU-405s  
Guanosine-5’-triphosphate   Sigma G8752  
Isopropanol   EMD Chemicals PX1835-5 ACS grade
Methyl isobutyl ketone (MIBK)   Fisher Scientific AC12739-0010  
Paclitaxel (taxol)   Calbiochem 580555  
Piperazine-N,N”-bis(2-ethanesulfonic acid) (PIPES)   Sigma P1851  
Polymethylmethacrylate (PMMA)   Brewer Science, Inc. 950K molecular weight 950K
Rhodamine tubulin   Cytoskeleton, Inc. T331M from bovine brain 99% pure, lyophilized
Toluene   EMD Chemicals TX0735-5 ACS grade
Tubulin   Cytoskeleton, Inc. T238 from bovine brain 99% pure, lyophilized

No. 1 borosilicate glass coverslips (22 X 50 mm) were purchased from VWR. Polished electronic grade p-type <111> silicon wafers were purchased from Addison Engineering, Inc. High-purity silver paint was obtained from Structure Probe, Inc. (Catalog # 5001 AB). Insulated fine gauge copper magnet wire (~ 0.08 mm (0.003”) diameter) can be obtained from electronic supply companies.

References

  1. Rai-Choudhury, P. . Handbook of Microlithography, Micromachining, and Microfabrication: Microlithography. , (1997).
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Cite This Article
Noel, J., Teizer, W., Hwang, W. Antifouling Self-assembled Monolayers on Microelectrodes for Patterning Biomolecules. J. Vis. Exp. (30), e1390, doi:10.3791/1390 (2009).

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