우리는 황금 microelectrodes와 실리콘 기판에 폴리 (에틸렌 글리콜) 자기 조립 monolayer을 (PEG – SAM) 형성을위한 절차를 제시한다. PEG – SAM은 단일 단계에서 형성과 실리콘과 금색 표면에 biofouling을 방지합니다. 전기 영동은 다음 nanoscale patterning의 biomolecules에 대한 아래 사용되고 있습니다.
Abstract
우리는 금을 microelectrodes과 실리콘 기판에 폴리 (에틸렌 글리콜) (PEG) trimethoxysilane 자기 조립 monolayer (SAM)을 형성을위한 절차를 제시한다. PEG – SAM은 단일 어셈블리 단계에서 형성과 실리콘과 금색 표면에 biofouling을 방지합니다. SAM은 표준 긍정적인 톤 리소그래피로 패턴 외투 microelectrodes하는 데 사용됩니다. 예를 들어 미세 소관을 사용하여, 우리는 되돌릴 방법으로 SAM – 코팅 전극에 전기 마이 그 레이션을 유도하는 DC 전압을 적용합니다. 흐름 챔버은 이미징을위한 전기 마이 그 레이션 및 미세 소관의 patterning을 사용합니다<em> 현장에서</em> epifluorescence 현미경을 사용하여. 그것이 목표 분자를 무력화하고 따라서 특정 분자 상호 작용을 요구하지 않는 전기를 고용으로이 방법은 일반적으로 생분자 patterning 적용됩니다. 또한, 그것은 패턴에 SAM 분자 직접 리소그래피 기술을 사용하여 시도할 때 발생 문제를 방지합니다. 전자 빔 리소그래피와 호환성이 메서드는 nanoscale에서 패턴 biomolecules하는 데 사용할 수 있습니다.
Protocol
시약의 준비 파이프 버퍼 (코와 산도 6.8로 조정 80 MM 파이프, 1mM MgCl 2, 1mM EGTA) 준비. -70에서 나누어지는 및 매장 포도당 산화 효소, 카탈 라 아제 및 포도당 -20 ° C에서와 taxol ° C 기존의 프로토콜에 따라. -70에서 1,2 나누어지는 및 매장 tubulin ° C 공급자에 포함된 지시에 따라. 리소그래피를 사용하여 패턴 오 microelectrodes 학자 또는 ?…
Discussion
MTS의 마이 그 레이션을 쉽게하기 때문에 그들의 밝기와 낮은 배경 형광의 형광 현미경을 사용하여 시각입니다. 그것은 biomolecules이 버퍼 산도의 적절한 조정하여 그물 요금을 휴대 유도해야합니다와 같은 방법은 일반적으로 생분자 patterning 적용됩니다. 이러한 모세관 전기 영동에 사용되는 실리카 벽으로 더 충전 표면이 없기 때문에 Electroosmosis이 설정에서 피할 수있다.
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Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
우리는 SAM 형성에 도움이 토론에 대한 멜리사 Grunlan을 인정합니다. 이 연구는 로버트 A. 웰치 재단 (A – 1585)에 의해 부분적으로 지원되었다.
No. 1 borosilicate glass coverslips (22 X 50 mm) were purchased from VWR. Polished electronic grade p-type <111> silicon wafers were purchased from Addison Engineering, Inc. High-purity silver paint was obtained from Structure Probe, Inc. (Catalog # 5001 AB). Insulated fine gauge copper magnet wire (~ 0.08 mm (0.003) diameter) can be obtained from electronic supply companies.
Noel, J., Teizer, W., Hwang, W. Antifouling Self-assembled Monolayers on Microelectrodes for Patterning Biomolecules. J. Vis. Exp. (30), e1390, doi:10.3791/1390 (2009).