Summary

Desenlendirme Biyomoleküller Mikroelektronlar Kendinden monte mono tabakaları Zehirli

Published: August 25, 2009
doi:

Summary

Biz altın Mikroelektronlar bir silikon taban üzerinde bir poli (etilen glikol), kendinden montajlı tek tabaka (PEG-SAM) oluşturmak için bir prosedür mevcut. PEG-SAM, tek bir adımda oluşan ve silikon ve altın yüzeyler biofouling engeller. Elektroforez sonra nano ölçekli desenlendirme biyomoleküllerin için kullanılır.

Abstract

Biz, altın Mikroelektronlar, bir silikon taban poli (etilen glikol) (PEG) trimethoxysilane kendinden montajlı tek tabaka (SAM) oluşturmak için bir prosedür mevcut. PEG-SAM tek bir montaj adımda oluşturulur ve silikon ve altın yüzeyler üzerinde biyolojik kirlenmeye engeller. SAM standart, pozitif ton litografi desenli ceket Mikroelektronlar kullanılır. Mikrotübül bir örnek olarak kullanarak, geri dönüşümlü bir şekilde SAM-örtülü elektrot elektroforetik göç ikna etmek için bir DC gerilim uygulanır. Bir akış odası, görüntüleme için elektroforetik göç ve mikrotübül desenlendirme kullanılan<em> In situ</em> Epifloresans mikroskopi kullanılarak. Hedef moleküller hareketsiz ve böylece spesifik moleküler etkileşimler gerektirmez elektroforez çalışanı olarak bu yöntem, genellikle biyomolekülün desenlendirme uygulanabilir. Ayrıca, desen SAM moleküllerin doğrudan litografik teknikleri kullanarak çalışırken karşılaşılan sorunları önler. Elektron demeti litografi ile uyumluluk, bu yöntem nano ölçekli desen biyomoleküllerin kullanılmasına izin verir.

Protocol

Reaktiflerin hazırlanması BORU tamponu (pH 6,8 KOH ile ayarlanmış 80 mM BORU 1mm MgCl 2, 1mm EGTA) hazırlayın. -70 Ve mağaza kısım glukoz oksidaz, katalaz ve glikoz ° C ve taksol -20 ° C mevcut protokollere göre 1,2 Temsili miktar ve mağaza tubulin -70 ° C tedarikçi tarafından verilen talimatlara göre. Litografi kullanarak Desen Au Mikroelektronlar Bir katip veya gofret kesici kullanarak 1 cm 1.5 cm substratlar içi…

Discussion

MTS, göç nedeniyle parlaklık ve düşük eşiğe kolayca floresan mikroskopi kullanılarak görüntülenmiştir. Sadece biyomoleküllerin tampon pH uygun ayarı ile net ücret taşımak için ikna olmasını gerektirir Bu yöntem, genellikle biyomolekülün desenlendirme için geçerli. Kapiler elektroforez kullanılan silika duvarlar gibi hiçbir ücret yüzeyleri vardır çünkü Electroosmosis Bu kurulum kaçınılmalıdır.

Bu yöntem çeşitli değişiklikler yapılabilir. Sızdırma…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Biz SAM formasyonu üzerinde yararlı tartışmalar için Melissa Grunlan kabul etmiş sayılırsınız. Bu araştırma, Robert A. Welch Vakfı (A-1585) tarafından kısmen desteklenmiştir.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
2-[methoxypoly-(ethyleneoxy)propyl]-trimethoxysilane (PEG-silane)   Gelest, Inc. SIM6492.7 6-9 PEG units; molecular weight 450-600 g mol-1
2-mercaptoethanol   Sigma M7522  
Acetone   EMD Chemicals AX0120-8 ACS grade
Catalase   Calbiochem 219001-5MU  
Chlorobenzene   EMD Chemicals MK441908 ACS grade
Ethylene glycol-bis(2-aminoethylether)-N,N,N’,N’-tetraacetic acid (EGTA)   Calbiochem 324626  
Glucose   EMD Chemicals DX0145-1  
Glucose oxidase   MP Biomedicals 100330  
Guanosine-5’-[(α,Β)-methyleno]triphosphate, Sodium salt (GMPCPP)   Jena Biosciences, GmbH NU-405s  
Guanosine-5’-triphosphate   Sigma G8752  
Isopropanol   EMD Chemicals PX1835-5 ACS grade
Methyl isobutyl ketone (MIBK)   Fisher Scientific AC12739-0010  
Paclitaxel (taxol)   Calbiochem 580555  
Piperazine-N,N”-bis(2-ethanesulfonic acid) (PIPES)   Sigma P1851  
Polymethylmethacrylate (PMMA)   Brewer Science, Inc. 950K molecular weight 950K
Rhodamine tubulin   Cytoskeleton, Inc. T331M from bovine brain 99% pure, lyophilized
Toluene   EMD Chemicals TX0735-5 ACS grade
Tubulin   Cytoskeleton, Inc. T238 from bovine brain 99% pure, lyophilized

No. 1 borosilicate glass coverslips (22 X 50 mm) were purchased from VWR. Polished electronic grade p-type <111> silicon wafers were purchased from Addison Engineering, Inc. High-purity silver paint was obtained from Structure Probe, Inc. (Catalog # 5001 AB). Insulated fine gauge copper magnet wire (~ 0.08 mm (0.003”) diameter) can be obtained from electronic supply companies.

References

  1. Rai-Choudhury, P. . Handbook of Microlithography, Micromachining, and Microfabrication: Microlithography. , (1997).
check_url/1390?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Noel, J., Teizer, W., Hwang, W. Antifouling Self-assembled Monolayers on Microelectrodes for Patterning Biomolecules. J. Vis. Exp. (30), e1390, doi:10.3791/1390 (2009).

View Video