Biz altın Mikroelektronlar bir silikon taban üzerinde bir poli (etilen glikol), kendinden montajlı tek tabaka (PEG-SAM) oluşturmak için bir prosedür mevcut. PEG-SAM, tek bir adımda oluşan ve silikon ve altın yüzeyler biofouling engeller. Elektroforez sonra nano ölçekli desenlendirme biyomoleküllerin için kullanılır.
Abstract
Biz, altın Mikroelektronlar, bir silikon taban poli (etilen glikol) (PEG) trimethoxysilane kendinden montajlı tek tabaka (SAM) oluşturmak için bir prosedür mevcut. PEG-SAM tek bir montaj adımda oluşturulur ve silikon ve altın yüzeyler üzerinde biyolojik kirlenmeye engeller. SAM standart, pozitif ton litografi desenli ceket Mikroelektronlar kullanılır. Mikrotübül bir örnek olarak kullanarak, geri dönüşümlü bir şekilde SAM-örtülü elektrot elektroforetik göç ikna etmek için bir DC gerilim uygulanır. Bir akış odası, görüntüleme için elektroforetik göç ve mikrotübül desenlendirme kullanılan<em> In situ</em> Epifloresans mikroskopi kullanılarak. Hedef moleküller hareketsiz ve böylece spesifik moleküler etkileşimler gerektirmez elektroforez çalışanı olarak bu yöntem, genellikle biyomolekülün desenlendirme uygulanabilir. Ayrıca, desen SAM moleküllerin doğrudan litografik teknikleri kullanarak çalışırken karşılaşılan sorunları önler. Elektron demeti litografi ile uyumluluk, bu yöntem nano ölçekli desen biyomoleküllerin kullanılmasına izin verir.
Protocol
Reaktiflerin hazırlanması BORU tamponu (pH 6,8 KOH ile ayarlanmış 80 mM BORU 1mm MgCl 2, 1mm EGTA) hazırlayın. -70 Ve mağaza kısım glukoz oksidaz, katalaz ve glikoz ° C ve taksol -20 ° C mevcut protokollere göre 1,2 Temsili miktar ve mağaza tubulin -70 ° C tedarikçi tarafından verilen talimatlara göre. Litografi kullanarak Desen Au Mikroelektronlar Bir katip veya gofret kesici kullanarak 1 cm 1.5 cm substratlar içi…
Discussion
MTS, göç nedeniyle parlaklık ve düşük eşiğe kolayca floresan mikroskopi kullanılarak görüntülenmiştir. Sadece biyomoleküllerin tampon pH uygun ayarı ile net ücret taşımak için ikna olmasını gerektirir Bu yöntem, genellikle biyomolekülün desenlendirme için geçerli. Kapiler elektroforez kullanılan silika duvarlar gibi hiçbir ücret yüzeyleri vardır çünkü Electroosmosis Bu kurulum kaçınılmalıdır.
Bu yöntem çeşitli değişiklikler yapılabilir. Sızdırma…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Biz SAM formasyonu üzerinde yararlı tartışmalar için Melissa Grunlan kabul etmiş sayılırsınız. Bu araştırma, Robert A. Welch Vakfı (A-1585) tarafından kısmen desteklenmiştir.
No. 1 borosilicate glass coverslips (22 X 50 mm) were purchased from VWR. Polished electronic grade p-type <111> silicon wafers were purchased from Addison Engineering, Inc. High-purity silver paint was obtained from Structure Probe, Inc. (Catalog # 5001 AB). Insulated fine gauge copper magnet wire (~ 0.08 mm (0.003) diameter) can be obtained from electronic supply companies.
Noel, J., Teizer, W., Hwang, W. Antifouling Self-assembled Monolayers on Microelectrodes for Patterning Biomolecules. J. Vis. Exp. (30), e1390, doi:10.3791/1390 (2009).