Diretta instillazione tracheale di soluti in polmone mouse
Summary
Instillazioni intratracheale soluti consegnare direttamente nei polmoni. Questa procedura obiettivi la consegna del instillate nelle regioni distali del polmone, ed è quindi spesso incorporati in studi volti a studiare alveoli. Forniamo un protocollo dettagliato di sopravvivenza per l'esecuzione di instillazioni intratracheale nei topi.
Abstract
Instillazioni intratracheale soluti consegnare direttamente nei polmoni. Questa procedura obiettivi la consegna del instillate nelle regioni distali del polmone, ed è quindi spesso incorporati in studi volti a studiare alveoli. Forniamo un protocollo dettagliato di sopravvivenza per l'esecuzione di instillazioni intratracheale nei topi. Usando questo approccio, si può avere come bersaglio la consegna di soluti test o solidi (come la terapia del polmone, tensioattivi, virus e oligonucleotidi piccolo) nel polmone distale. Instillazioni tracheale può essere il metodo preferito, su protocolli per inalazione, che potrebbe in primo luogo di destinazione del tratto respiratorio superiore e, eventualmente, esporre al ricercatore di sostanze potenzialmente pericolose. Inoltre, utilizzando il protocollo instillazione tracheale, gli animali possono riprendersi completamente dalla procedura non invasiva. Questo permette di fare successive misurazioni fisiologiche di test sugli animali, o reinstallazione usando lo stesso animale. La quantità di instillate introdotto nel polmone deve essere accuratamente determinato e osmoticamente bilanciata per assicurare il recupero degli animali. Tipicamente, il volume instillate 30-75 microlitri può essere introdotto in polmone del mouse.
Protocol
Discussion
Instillazioni intratracheale sono stati utilizzati in diversi studi diversi per valutare la tossicità dei composti di prova (6), indurre lesioni alveolare polmonare (4, 7), sostituire tensioattivi (8), così come alterare l'espressione genica tramite la consegna di piccoli oligonucleotidi direttamente nel polmone (5). Attualmente stiamo esplorando l'uso di infondere 1) fluorescente redox-sensibili materiale nei polmoni per misurare lo stress ossidativo in vivo in condizioni normali e fisiopatologiche, come pure…
Acknowledgements
Questo lavoro è stato sostenuto da NIH K99 HL09222601 e lo S & R Fondazione Ryaji Uneo Award assegnato a MNH.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Isoflurane | Webster Veterinary Sterling , MA | 14043-220-05 | ||
| Xylazine | Lloyd Laboratories Shenandoah, IA | New Animal Drug Application #139-236 | ||
| Ketamine | Bioniche Pharma Lake Forest, IL | 67457-001-10 | ||
| Nair | Available at drug stores | |||
| 1mL SubQ Syringe | BD Syringe Franklin Lakes, NJ | 309597 | 26 5/8 G | |
| 4-0 Nylon Suture | Ethicon San Lorenzo, Puerto Rico | 1894G.S30 |
References
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- Helms, M. N., Self, J., Bao, H. F., Job, L. C., Jain, L., Eaton, D. C. Dopamine activates amiloride-sensitive sodium channels in alveolar type I cells in lung slice preparations. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 291, L610-L618 (2006).
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