La instilación directa traqueal de solutos en pulmón de ratón
Summary
Intratraqueal instilaciones solutos entregar directamente a los pulmones. Este procedimiento objetivos de la entrega de los instilado en las regiones distales de los pulmones, y por lo tanto incorpora a menudo en los estudios dirigidos a estudiar los alvéolos. Ofrecemos un protocolo detallado para la supervivencia de realizar instilaciones intratraqueal en ratones.
Abstract
Intratraqueal instilaciones solutos entregar directamente a los pulmones. Este procedimiento objetivos de la entrega de los instilado en las regiones distales de los pulmones, y por lo tanto incorpora a menudo en los estudios dirigidos a estudiar los alvéolos. Ofrecemos un protocolo detallado para la supervivencia de realizar instilaciones intratraqueal en ratones. El uso de este enfoque, permite afrontar la entrega de los solutos de prueba o sólidos (como la terapéutica de pulmón, surfactantes, los virus, y los oligonucleótidos pequeños) en el pulmón distal. Instilaciones traqueal puede ser la metodología preferida, la inhalación a través de protocolos que se pueden orientar a todo el tracto respiratorio superior y, posiblemente, el investigador expone a sustancias potencialmente peligrosas. Además, al utilizar el protocolo de la instilación traqueal, los animales se pueden recuperar completamente el procedimiento no invasivo. Esto permite realizar posteriores mediciones fisiológicas de los animales de prueba, o la reinstalación con el mismo animal. La cantidad de instilado introduce en el pulmón debe ser cuidadosamente determinada y osmóticamente equilibrados para asegurar la recuperación de los animales. Por lo general, el volumen instilado 30-75 l pueden introducirse en los pulmones del ratón.
Protocol
Discussion
Intratraqueal instilaciones se han utilizado en varios estudios diferentes para evaluar la toxicidad de los compuestos de prueba (6), inducen daño alveolar del pulmón (4, 7), sustituir los tensioactivos (8), así como alterar la expresión génica a través de la entrega de los oligonucleótidos pequeños directamente en el pulmonar (5). Actualmente estamos explorando el uso de inculcar 1) fluorescentes redox material sensible en el pulmón con el fin de medir el estrés oxidativo in vivo en condiciones normales y fis…
Acknowledgements
Este trabajo fue apoyado por el NIH K99 HL09222601 y el S & R Foundation Ryaji Uneo Premio otorgado a MNH.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Isoflurane | Webster Veterinary Sterling , MA | 14043-220-05 | ||
| Xylazine | Lloyd Laboratories Shenandoah, IA | New Animal Drug Application #139-236 | ||
| Ketamine | Bioniche Pharma Lake Forest, IL | 67457-001-10 | ||
| Nair | Available at drug stores | |||
| 1mL SubQ Syringe | BD Syringe Franklin Lakes, NJ | 309597 | 26 5/8 G | |
| 4-0 Nylon Suture | Ethicon San Lorenzo, Puerto Rico | 1894G.S30 |
References
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