Muis blaaswand Injection
Summary
Muis blaaswand injectie is een nuttige benadering voor orthotopically studie blaas stamcellen en kanker biologie. Deze delicate microchirurgische methode kan worden beheerst met een zorgvuldige techniek en praktijk.
Abstract
Muis blaaswand injectie is een nuttige techniek om orthotopically studeren blaas verschijnselen, zoals stamcelonderzoek, glad spierweefsel, en kanker biologie. Voordat u begint met injecties, moet het operatiegebied worden gereinigd met water en zeep en antiseptische oplossing. Chirurgische apparatuur moet vóór gebruik worden gesteriliseerd en tussen elk dier. Elke muis is geplaatst onder ingeademd isofluraan anesthesie (2-5% voor inductie, 1-3% voor onderhoud) en de blaas blootgesteld door het maken van een middellijn incisie in de buik met een schaar. Als de blaas vol is, is het gedeeltelijk gedecomprimeerd door zachte knijpen tussen twee vingers. De celsuspensie van belang is intramuraal geïnjecteerd in de wand van de blaas koepel met behulp van een 29 of 30 gauge naald en een cc of kleiner spuit. De wond wordt dan gesloten met behulp van clips wond en de muis om te herstellen op een warming pad. Blaaswand injectie is een delicate microchirurgische techniek die kan worden beheerst met de praktijk.
Protocol
Discussion
Muis blaaswand inspuiting zorgt voor de inplanting van specifieke cellen in bepaalde delen van de blaaswand. Deze techniek heeft brede toepassingen voor muismodellen van blaaskanker, gladde spieren, en stamcel biologie. Per definitie, de muis blaaswand injectie vergemakkelijkt introductie van blaaskanker of stamcellen in een orthotope locatie, zodat hun groei en differentiatie kan worden bestudeerd in een fysiologisch relevante anatomische context. In feite, Dinney et al.. eerst beschreven deze techniek om orthotoop men…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Wij dankbaar de steun van een Pilot subsidie van de Stanford Pediatric Research Fund en K08DK087895-01 uit de NIDDK.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Isoflurane (Aerrane) | Baxter | NDC 10019-773-60 |
| 29 or 30 gauge needles | Hamilton | 7803-06 or 7803-07 |
| 100 microliter syringe | Hamilton | 7656-01 |
References
- Dinney, C. P., Fishbeck, R., Singh, R. K., Eve, B., Pathak, S., Brown, N., Xie, B., Fan, D., Bucana, C., Fidler, I. J., Killion, J. J. Isolation and Characterization of Metastatic Variants from Human Transitional Cell Carcinoma Passaged by Orthotopic Implantation in Athymic Nude Mice. The Journal of Urology. 154, 1532-1538 (1995).
- Singh, A. V., Franke, A. A., Blackburn, G. L., Zhou, J. Soy Phytochemicals Prevent Orthotopic Growth and Metastasis of Bladder Cancer in Mice by Alterations of Cancer Cell Proliferation and Apoptosis and Tumor Angiogenesis. Cancer Res. 66, 1851-1858 (2006).
- Yanagiuchi, A., Miyake, H., Nomi, M., Takenaka, A., Fujisawa, M. Modulation of the Microenvironment by Growth Factors Regulates the In Vivo Growth of Skeletal Myoblasts. BJU International. 103, 1569-1573 (2009).
- Miyake, H., Hara, I., Yamanaka, K., Gohji, K., Arakawa, S., Kamidono, S. Overexpression of Bcl-2 Enhances Metastatic Potential of Human Bladder Cancer Cells. British Journal of Cancer. 79, 1651-1656 (1999).
- Chancellor, M. B., Yokoyama, T., Tirney, S., Mattes, C. E., Ozawa, H., Yoshimura, N., Groat, W. C. d. e., Huard, J. Preliminary Results of Myoblast Injection into the Urethra and Bladder Wall: a Possible method for the Treatment of Stress Urinary Incontinence and Impaired Detrusor Contractility. Neurourol Urodyn. 19, 279-287 (2000).
- Dinney, C. P., Tanguay, S., Bucana, C. D., Eve, B. Y., Fidler, I. J. Intravesical Liposomal Muramyl Tripeptide Phosphatidylethanolamine Treatment of Human Bladder Carcinoma Growing in Nude Mice. J Interferon Cytokine Res. 15, 585-592 (1995).
- Mohamedali, K. A., Kedary, D., Sweeney, P., Kamaty, A., Davisy, D. W., Evey, B. Y., Huangy, S., Thorpez, P. E., Dinney, C. P., Rosenblum, M. G. The Vascular-targeting Fusion toxin VEGF121/rGel Inhibits the Growth of Orthotopic Human Bladder Carcinoma Tumors. Neoplasia. 7, 912-920 (2005).
- Slaton, J. W., Perrotte, P., Inoue, K., Dinney, C. P., Fidler, I. J. Interferon-α-mediated Down-Regulation of Angiogenesis-related Genes and Therapy of Bladder Cancer Are Dependent on Optimization of Biological Dose and Schedule. Clinical Cancer Research. 5, 2726-2734 (1999).
- Yokoyama, T., Huard, J., Pruchnic, R., Yoshimura, N., Qu, Z., Cao, B., De Groat, W. C., Kumon, H., Chancellor, M. B. Muscle-Derived Cell Transplantation and Differentiation into Lower Urinary Tract Smooth Muscle. Urology. 57, 826-831 (2001).
- Chan, E., Patel, A., Heston, W., Larchian, W. Mouse Orthotopic Models for Bladder Cancer Research. BJU International. 104, 1286-1291 (1988).
- Russell, P. J., Jelbart, M., Wills, E., Singh, S., Wass, J., Witherspoon, J., Raghavan, D. Establishment and characterization of a new human bladder cancer cell line showing features of squamous and glandular differentiation. Int. J. Cancer. 41, 74-74 (1988).
- Ahlering, T. E., Dubeau, L., Jones, P. A. A new in vivo model to study invasion and metastasis of human bladder carcinoma. Cancer Res. 41, 6660-6660 (1987).
- Heaney, J. A., Omellas, E. P., Daly, J. J., Lin, J. C., Rout, G. R. In vivo growth of human bladder cancer cell lines. Invest. Urol. 15, 380-380 (1978).
- Hadaschik, B., Black, P., Sea, J., Metwalli, A., Fazli, L., Dinney, C., Gleave, M., So, A. A validated mouse model for orthotopic bladder cancer using transurethral tumor inoculation and bioluminescence imaging. BJU International. 100, 1377-1384 (2007).
