Summary

Fare mesane Duvar Enjeksiyon

Published: July 12, 2011
doi:

Summary

Fare mesane duvar enjeksiyon orthotopically mesane kök hücre ve kanser biyolojisi incelemek için yararlı bir yaklaşımdır. Bu hassas mikrocerrahi yöntemi dikkatli tekniği ve uygulamaları ile hakim olabilir.

Abstract

Fare mesane duvarında enjeksiyonu, kök hücre, düz kas ve kanser biyolojisi dahil olmak üzere mesane olgu, orthotopically incelemek için yararlı bir tekniktir. Enjeksiyonlar başlamadan önce, cerrahi alanda, su ve sabunla ve antiseptik solüsyon ile temizlenmesi gerekir. Cerrahi teçhizat kullanımdan önce ve her hayvan arasında sterilize edilmelidir. Her bir fare inhale izofluran anestezi altında yerleştirilir (indüksiyon için% 2-5, bakım için% 1-3) ve mesane makas ile karın orta hat kesi yaparak maruz kalmaktadır. Mesane doluysa, iki parmak arasında sıkarak nazik tarafından kısmen sıkıştırılmış. Ilgi hücre süspansiyonu intramural 29 veya 30 iğne ve 1 cc ya da daha küçük bir şırınga kullanarak mesane kubbe duvarın içine enjekte edilir. Sonra yara yara klipleri ve ısıtıcı kurtarmak için izin fare kullanılarak kapatılır. Mesane duvar enjeksiyon, hassas bir mikrocerrahi tekniği uygulama ile hakim olabilir.

Protocol

1. Fare mesane Duvar Enjeksiyon Fare suşu, yaş ve cinsiyet seçimi, deneysel ihtiyaçlarına göre belirlenir. Bu immünolojik olgunluk, yaşlılık önce bir penceredir bu yana, 8 ile 12 hafta arasında yaş fareler kullanın. Genel bir kural olarak, farelerin stres kaynaklı karıştırıcı faktörlerin önlemek için deneysel manipülasyon en az bir hafta önce gelmelisiniz. Cerrahi masa yüzeyi sabun ve su ile temizleyin. Cide Swipes'ı veya antiseptik mendil …

Discussion

Fare mesane duvarında enjeksiyon mesane duvar tanımlanmış alanlara belirli hücrelerin implantasyonu için sağlar. Bu teknik, mesane kanseri, düz kas ve kök hücre biyolojisi fare modelleri için geniş bir uygulama alanı vardır. Büyüme ve farklılaşma fizyolojik ilgili anatomik bağlamında ele böylece tanımı gereği, fare mesane duvar enjeksiyon ortotopik bir konuma mesane kanseri ya da kök hücrelerin giriş kolaylaştırır. Aslında, Dinney ve ark. ilk çıplak farelerin 1 ortotopik insan…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Biz minnetle NIDDK Stanford Pediatrik Araştırma Fonu ve K08DK087895-01 Pilot hibe desteği kabul etmiş sayılırsınız.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number
Isoflurane (Aerrane) Baxter NDC 10019-773-60
29 or 30 gauge needles Hamilton 7803-06 or 7803-07
100 microliter syringe Hamilton 7656-01

References

  1. Dinney, C. P., Fishbeck, R., Singh, R. K., Eve, B., Pathak, S., Brown, N., Xie, B., Fan, D., Bucana, C., Fidler, I. J., Killion, J. J. Isolation and Characterization of Metastatic Variants from Human Transitional Cell Carcinoma Passaged by Orthotopic Implantation in Athymic Nude Mice. The Journal of Urology. 154, 1532-1538 (1995).
  2. Singh, A. V., Franke, A. A., Blackburn, G. L., Zhou, J. Soy Phytochemicals Prevent Orthotopic Growth and Metastasis of Bladder Cancer in Mice by Alterations of Cancer Cell Proliferation and Apoptosis and Tumor Angiogenesis. Cancer Res. 66, 1851-1858 (2006).
  3. Yanagiuchi, A., Miyake, H., Nomi, M., Takenaka, A., Fujisawa, M. Modulation of the Microenvironment by Growth Factors Regulates the In Vivo Growth of Skeletal Myoblasts. BJU International. 103, 1569-1573 (2009).
  4. Miyake, H., Hara, I., Yamanaka, K., Gohji, K., Arakawa, S., Kamidono, S. Overexpression of Bcl-2 Enhances Metastatic Potential of Human Bladder Cancer Cells. British Journal of Cancer. 79, 1651-1656 (1999).
  5. Chancellor, M. B., Yokoyama, T., Tirney, S., Mattes, C. E., Ozawa, H., Yoshimura, N., Groat, W. C. d. e., Huard, J. Preliminary Results of Myoblast Injection into the Urethra and Bladder Wall: a Possible method for the Treatment of Stress Urinary Incontinence and Impaired Detrusor Contractility. Neurourol Urodyn. 19, 279-287 (2000).
  6. Dinney, C. P., Tanguay, S., Bucana, C. D., Eve, B. Y., Fidler, I. J. Intravesical Liposomal Muramyl Tripeptide Phosphatidylethanolamine Treatment of Human Bladder Carcinoma Growing in Nude Mice. J Interferon Cytokine Res. 15, 585-592 (1995).
  7. Mohamedali, K. A., Kedary, D., Sweeney, P., Kamaty, A., Davisy, D. W., Evey, B. Y., Huangy, S., Thorpez, P. E., Dinney, C. P., Rosenblum, M. G. The Vascular-targeting Fusion toxin VEGF121/rGel Inhibits the Growth of Orthotopic Human Bladder Carcinoma Tumors. Neoplasia. 7, 912-920 (2005).
  8. Slaton, J. W., Perrotte, P., Inoue, K., Dinney, C. P., Fidler, I. J. Interferon-α-mediated Down-Regulation of Angiogenesis-related Genes and Therapy of Bladder Cancer Are Dependent on Optimization of Biological Dose and Schedule. Clinical Cancer Research. 5, 2726-2734 (1999).
  9. Yokoyama, T., Huard, J., Pruchnic, R., Yoshimura, N., Qu, Z., Cao, B., De Groat, W. C., Kumon, H., Chancellor, M. B. Muscle-Derived Cell Transplantation and Differentiation into Lower Urinary Tract Smooth Muscle. Urology. 57, 826-831 (2001).
  10. Chan, E., Patel, A., Heston, W., Larchian, W. Mouse Orthotopic Models for Bladder Cancer Research. BJU International. 104, 1286-1291 (1988).
  11. Russell, P. J., Jelbart, M., Wills, E., Singh, S., Wass, J., Witherspoon, J., Raghavan, D. Establishment and characterization of a new human bladder cancer cell line showing features of squamous and glandular differentiation. Int. J. Cancer. 41, 74-74 (1988).
  12. Ahlering, T. E., Dubeau, L., Jones, P. A. A new in vivo model to study invasion and metastasis of human bladder carcinoma. Cancer Res. 41, 6660-6660 (1987).
  13. Heaney, J. A., Omellas, E. P., Daly, J. J., Lin, J. C., Rout, G. R. In vivo growth of human bladder cancer cell lines. Invest. Urol. 15, 380-380 (1978).
  14. Hadaschik, B., Black, P., Sea, J., Metwalli, A., Fazli, L., Dinney, C., Gleave, M., So, A. A validated mouse model for orthotopic bladder cancer using transurethral tumor inoculation and bioluminescence imaging. BJU International. 100, 1377-1384 (2007).
check_url/2523?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Fu, C., Apelo, C. A., Torres, B., Thai, K. H., Hsieh, M. H. Mouse Bladder Wall Injection. J. Vis. Exp. (53), e2523, doi:10.3791/2523 (2011).

View Video