Summary

Мышь стенки мочевого пузыря инъекций

Published: July 12, 2011
doi:

Summary

Мышь стенки мочевого пузыря инъекции полезный подход к orthotopically исследования стволовых клеток мочевого пузыря и рака биологии. Это деликатный метод микрохирургические могут быть освоены с тщательной технике и практике.

Abstract

Мышь стенки мочевого пузыря инъекции полезный метод исследования мочевого пузыря orthotopically явлений, в том числе стволовых клеток, гладких мышц и биологии рака. Перед началом инъекций, хирургических области должны быть очищены с мылом и водой и раствором антисептика. Хирургическое оборудование должны стерилизоваться перед использованием, а также между каждым животным. Каждая мышь помещается под вдыхании изофлуран анестезией (2-5% для индукции, 1-3% за обслуживание) и мочевого пузыря, предоставляемых решений средней линии разреза брюшной полости с помощью ножниц. Если мочевой пузырь полон, он частично распакованы, осторожно сжимая двумя пальцами. Клеточной суспензии интересов intramurally вводят в стенке мочевого пузыря купол использованием 29 или 30 иглой и 1 мл или меньший шприц. Рана закрывается использованием раны клипы и мыши позволило восстановить на потепление площадку. Инъекции стенки мочевого пузыря является деликатным техника микрохирургических, которые могут быть освоены с практикой.

Protocol

1. Мышь стенки мочевого пузыря инъекций Выбор мыши штамма, возраста и пола диктуется экспериментальных потребностей. Мы используем мышей от 8 до 12-недельного возраста, так как это окно иммунологической зрелости до старения. В качестве общей рекомендации, мыши должны прибы…

Discussion

Мышь стенки мочевого пузыря инъекции позволяет внедрение конкретных клеток в определенных областях стенки мочевого пузыря. Эта техника имеет широкое применение для мышиных моделях рака мочевого пузыря, гладких мышц и биологии стволовых клеток. По определению, мышь стенки мочевого пу…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Мы выражаем искреннюю благодарность поддержке Pilot грант исследований Стэнфордского детской фонда и K08DK087895-01 от NIDDK.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number
Isoflurane (Aerrane) Baxter NDC 10019-773-60
29 or 30 gauge needles Hamilton 7803-06 or 7803-07
100 microliter syringe Hamilton 7656-01

References

  1. Dinney, C. P., Fishbeck, R., Singh, R. K., Eve, B., Pathak, S., Brown, N., Xie, B., Fan, D., Bucana, C., Fidler, I. J., Killion, J. J. Isolation and Characterization of Metastatic Variants from Human Transitional Cell Carcinoma Passaged by Orthotopic Implantation in Athymic Nude Mice. The Journal of Urology. 154, 1532-1538 (1995).
  2. Singh, A. V., Franke, A. A., Blackburn, G. L., Zhou, J. Soy Phytochemicals Prevent Orthotopic Growth and Metastasis of Bladder Cancer in Mice by Alterations of Cancer Cell Proliferation and Apoptosis and Tumor Angiogenesis. Cancer Res. 66, 1851-1858 (2006).
  3. Yanagiuchi, A., Miyake, H., Nomi, M., Takenaka, A., Fujisawa, M. Modulation of the Microenvironment by Growth Factors Regulates the In Vivo Growth of Skeletal Myoblasts. BJU International. 103, 1569-1573 (2009).
  4. Miyake, H., Hara, I., Yamanaka, K., Gohji, K., Arakawa, S., Kamidono, S. Overexpression of Bcl-2 Enhances Metastatic Potential of Human Bladder Cancer Cells. British Journal of Cancer. 79, 1651-1656 (1999).
  5. Chancellor, M. B., Yokoyama, T., Tirney, S., Mattes, C. E., Ozawa, H., Yoshimura, N., Groat, W. C. d. e., Huard, J. Preliminary Results of Myoblast Injection into the Urethra and Bladder Wall: a Possible method for the Treatment of Stress Urinary Incontinence and Impaired Detrusor Contractility. Neurourol Urodyn. 19, 279-287 (2000).
  6. Dinney, C. P., Tanguay, S., Bucana, C. D., Eve, B. Y., Fidler, I. J. Intravesical Liposomal Muramyl Tripeptide Phosphatidylethanolamine Treatment of Human Bladder Carcinoma Growing in Nude Mice. J Interferon Cytokine Res. 15, 585-592 (1995).
  7. Mohamedali, K. A., Kedary, D., Sweeney, P., Kamaty, A., Davisy, D. W., Evey, B. Y., Huangy, S., Thorpez, P. E., Dinney, C. P., Rosenblum, M. G. The Vascular-targeting Fusion toxin VEGF121/rGel Inhibits the Growth of Orthotopic Human Bladder Carcinoma Tumors. Neoplasia. 7, 912-920 (2005).
  8. Slaton, J. W., Perrotte, P., Inoue, K., Dinney, C. P., Fidler, I. J. Interferon-α-mediated Down-Regulation of Angiogenesis-related Genes and Therapy of Bladder Cancer Are Dependent on Optimization of Biological Dose and Schedule. Clinical Cancer Research. 5, 2726-2734 (1999).
  9. Yokoyama, T., Huard, J., Pruchnic, R., Yoshimura, N., Qu, Z., Cao, B., De Groat, W. C., Kumon, H., Chancellor, M. B. Muscle-Derived Cell Transplantation and Differentiation into Lower Urinary Tract Smooth Muscle. Urology. 57, 826-831 (2001).
  10. Chan, E., Patel, A., Heston, W., Larchian, W. Mouse Orthotopic Models for Bladder Cancer Research. BJU International. 104, 1286-1291 (1988).
  11. Russell, P. J., Jelbart, M., Wills, E., Singh, S., Wass, J., Witherspoon, J., Raghavan, D. Establishment and characterization of a new human bladder cancer cell line showing features of squamous and glandular differentiation. Int. J. Cancer. 41, 74-74 (1988).
  12. Ahlering, T. E., Dubeau, L., Jones, P. A. A new in vivo model to study invasion and metastasis of human bladder carcinoma. Cancer Res. 41, 6660-6660 (1987).
  13. Heaney, J. A., Omellas, E. P., Daly, J. J., Lin, J. C., Rout, G. R. In vivo growth of human bladder cancer cell lines. Invest. Urol. 15, 380-380 (1978).
  14. Hadaschik, B., Black, P., Sea, J., Metwalli, A., Fazli, L., Dinney, C., Gleave, M., So, A. A validated mouse model for orthotopic bladder cancer using transurethral tumor inoculation and bioluminescence imaging. BJU International. 100, 1377-1384 (2007).
check_url/2523?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Fu, C., Apelo, C. A., Torres, B., Thai, K. H., Hsieh, M. H. Mouse Bladder Wall Injection. J. Vis. Exp. (53), e2523, doi:10.3791/2523 (2011).

View Video