Summary

שלפוחית ​​השתן עכבר וול Injection

Published: July 12, 2011
doi:

Summary

שלפוחית ​​השתן עכבר הזרקת הקיר היא גישה יעילה orthotopically מחקר גזע שלפוחית ​​השתן התא וביולוגיה סרטן. שיטה זו microsurgical עדין ניתן לשלוט בטכניקה תרגול זהיר.

Abstract

שלפוחית ​​השתן עכבר הזרקת בקיר היא טכניקה יעילה כדי ללמוד orthotopically תופעות שלפוחית ​​השתן, כולל בתאי גזע, שריר חלק, ביולוגיה סרטן. לפני שמתחילים זריקות, באזור הניתוח יש לנקות עם מים וסבון אנטיספטי פתרון. ציוד כירורגי יש לעקר לפני השימוש לבין כל חיה. עכבר כל מושם תחת הרדמה נשאפים isoflurane (2-5% לזירוז,% 1-3 לצורך תחזוקה) ושלפוחית ​​השתן שלה נחשף על ידי ביצוע חתך בבטן קו האמצע עם מספריים. אם השלפוחית ​​מלאה, היא decompressed חלקית על ידי סחיטה עדינה בין שתי אצבעות. ההשעיה התא עניין מוזרק intramurally בקיר הכיפה שלפוחית ​​השתן באמצעות מחט 29 או 30 מד 1 סמ"ק או מזרק קטן. הפצע סגור ולאחר מכן באמצעות קליפים הפצע העכבר מותר להתאושש על כרית חימום. קיר הזרקת שלפוחית ​​השתן היא טכניקה microsurgical עדין שניתן לשליטה באמצעות תרגול.

Protocol

1. שלפוחית ​​השתן עכבר וול Injection בחירת זן העכבר, גיל, מין מוכתב על ידי הצרכים ניסיוני. אנו משתמשים בעכברים בין 8 ל 12 שבועות של גיל, שכן זהו חלון של בגרות החיסונית לקראת ההזדקנות. כקו מנחה כללי, עכברים צריכים להגיע לפחות שבוע לפני מניפ?…

Discussion

שלפוחית ​​השתן עכבר הזרקת הקיר מאפשר להשתלה של תאים ספציפיים לאזורים מוגדרים של קיר שלפוחית ​​השתן. טכניקה זו יש יישומים רחב עבור מודלים העכבר של סרטן שלפוחית ​​השתן, שריר חלק, ביולוגיה של התא גזע. על פי ההגדרה, שלפוחית ​​השתן העכבר מאפשר הזרקה קיר המבוא של סרטן ש…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

בהכרת תודה אנו מכירים את התמיכה מענק Pilot מקרן המחקר סטנפורד ילדים ו K08DK087895-01 מ NIDDK.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number
Isoflurane (Aerrane) Baxter NDC 10019-773-60
29 or 30 gauge needles Hamilton 7803-06 or 7803-07
100 microliter syringe Hamilton 7656-01

References

  1. Dinney, C. P., Fishbeck, R., Singh, R. K., Eve, B., Pathak, S., Brown, N., Xie, B., Fan, D., Bucana, C., Fidler, I. J., Killion, J. J. Isolation and Characterization of Metastatic Variants from Human Transitional Cell Carcinoma Passaged by Orthotopic Implantation in Athymic Nude Mice. The Journal of Urology. 154, 1532-1538 (1995).
  2. Singh, A. V., Franke, A. A., Blackburn, G. L., Zhou, J. Soy Phytochemicals Prevent Orthotopic Growth and Metastasis of Bladder Cancer in Mice by Alterations of Cancer Cell Proliferation and Apoptosis and Tumor Angiogenesis. Cancer Res. 66, 1851-1858 (2006).
  3. Yanagiuchi, A., Miyake, H., Nomi, M., Takenaka, A., Fujisawa, M. Modulation of the Microenvironment by Growth Factors Regulates the In Vivo Growth of Skeletal Myoblasts. BJU International. 103, 1569-1573 (2009).
  4. Miyake, H., Hara, I., Yamanaka, K., Gohji, K., Arakawa, S., Kamidono, S. Overexpression of Bcl-2 Enhances Metastatic Potential of Human Bladder Cancer Cells. British Journal of Cancer. 79, 1651-1656 (1999).
  5. Chancellor, M. B., Yokoyama, T., Tirney, S., Mattes, C. E., Ozawa, H., Yoshimura, N., Groat, W. C. d. e., Huard, J. Preliminary Results of Myoblast Injection into the Urethra and Bladder Wall: a Possible method for the Treatment of Stress Urinary Incontinence and Impaired Detrusor Contractility. Neurourol Urodyn. 19, 279-287 (2000).
  6. Dinney, C. P., Tanguay, S., Bucana, C. D., Eve, B. Y., Fidler, I. J. Intravesical Liposomal Muramyl Tripeptide Phosphatidylethanolamine Treatment of Human Bladder Carcinoma Growing in Nude Mice. J Interferon Cytokine Res. 15, 585-592 (1995).
  7. Mohamedali, K. A., Kedary, D., Sweeney, P., Kamaty, A., Davisy, D. W., Evey, B. Y., Huangy, S., Thorpez, P. E., Dinney, C. P., Rosenblum, M. G. The Vascular-targeting Fusion toxin VEGF121/rGel Inhibits the Growth of Orthotopic Human Bladder Carcinoma Tumors. Neoplasia. 7, 912-920 (2005).
  8. Slaton, J. W., Perrotte, P., Inoue, K., Dinney, C. P., Fidler, I. J. Interferon-α-mediated Down-Regulation of Angiogenesis-related Genes and Therapy of Bladder Cancer Are Dependent on Optimization of Biological Dose and Schedule. Clinical Cancer Research. 5, 2726-2734 (1999).
  9. Yokoyama, T., Huard, J., Pruchnic, R., Yoshimura, N., Qu, Z., Cao, B., De Groat, W. C., Kumon, H., Chancellor, M. B. Muscle-Derived Cell Transplantation and Differentiation into Lower Urinary Tract Smooth Muscle. Urology. 57, 826-831 (2001).
  10. Chan, E., Patel, A., Heston, W., Larchian, W. Mouse Orthotopic Models for Bladder Cancer Research. BJU International. 104, 1286-1291 (1988).
  11. Russell, P. J., Jelbart, M., Wills, E., Singh, S., Wass, J., Witherspoon, J., Raghavan, D. Establishment and characterization of a new human bladder cancer cell line showing features of squamous and glandular differentiation. Int. J. Cancer. 41, 74-74 (1988).
  12. Ahlering, T. E., Dubeau, L., Jones, P. A. A new in vivo model to study invasion and metastasis of human bladder carcinoma. Cancer Res. 41, 6660-6660 (1987).
  13. Heaney, J. A., Omellas, E. P., Daly, J. J., Lin, J. C., Rout, G. R. In vivo growth of human bladder cancer cell lines. Invest. Urol. 15, 380-380 (1978).
  14. Hadaschik, B., Black, P., Sea, J., Metwalli, A., Fazli, L., Dinney, C., Gleave, M., So, A. A validated mouse model for orthotopic bladder cancer using transurethral tumor inoculation and bioluminescence imaging. BJU International. 100, 1377-1384 (2007).
check_url/2523?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Fu, C., Apelo, C. A., Torres, B., Thai, K. H., Hsieh, M. H. Mouse Bladder Wall Injection. J. Vis. Exp. (53), e2523, doi:10.3791/2523 (2011).

View Video