一个视神经挤压伤的小鼠模型，研究视网膜神经节细胞生存
Summary
该协议显示了如何逆行标记视网膜神经节细胞，以及如何随后视神经挤压伤，以分析视网膜神经节细胞的存活和凋亡。这是一个为不同类型的视神经病变，包括青光眼的实验性疾病模型。
Abstract
视神经损伤可导致轴索变性，逐渐死亡的视网膜神经节细胞（RGC的），在不可逆的视力丧失结果。在人类疾病的例子包括：外伤性视神经病变和青光眼视神经病变。它的特点是典型的视神经头的变化，逐步视神经病变，和视网膜神经节细胞的损失，如果不加控制，导致视力下降和失明。
视神经粉碎（ONC）损伤的小鼠模型，是一个重要的外伤性视神经病变的实验疾病模型，青光眼等，在此模型中，挤压伤到视神经，导致逐步视网膜神经节细胞的凋亡。这种疾病模型可以用来研究神经元死亡和生存，这是必要的治疗措施的发展的一般过程和机制。此外，药理学和分子的方法，可以在此模型中，识别和测试潜在的治疗试剂，治疗视神经病变的不同类型。
在这里，我们提供了一步一步演示（一）基线逆行标记视网膜神经节细胞（RGC的）第1天，（二）在4天的视神经挤压伤，（三）收获的视网膜和分析研资局在一天的生存11，（四）代表结果。
Protocol
所有的设备和试剂使用无菌。所有动物实验获得批准的动物护理和使用的聂/美国国立卫生研究院委员会（ACUC）（动物研究协议聂- 570），并根据美国国立卫生研究院的准则和法规执行。 1。基线逆行标记视网膜神经节细胞（RGC的）第1天这一程序的目的是标签的视网膜神经节细胞的神经示踪染料注射入小鼠视神经挤压伤的前三天，上丘逆行。染料将逆行采?…
Discussion
视神经挤压伤的小鼠模型研究RGC的死亡和生存的过程中是非常有用。这种模式也常常用于研究不同的试剂和RGC的凋亡和生存的基因的影响。这个模型的一个优点是它具有高度的重复性，最小的变化。
然而，需要特别照顾，在此模型中的几个步骤。首先，使视神经挤压伤时，它是必不可少的，不要用力过猛，而不是粉碎太久，因为它们可能导致眼动脉，因此随后的视网膜缺血?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我们的研究是由美国国立卫生研究院，美国国家眼科研究所院内研究计划的支持。
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Stereotaxic apparatus | ASI Instruments | SAS-4100 | ||
| Dissecting microscope | World Precision Instruments | PZMIV-BS | ||
| Scalpel handle | Fine Science Tools | 10003-12 | ||
| Scalpel Blades #15 | Fine Science Tools | 10015-00 | ||
| Microdrill | Fine Science Tools | 18000-17 | ||
| Suture needle | Fine Science Tools | 12050-03 | ||
| Spring scissors | Fine Science Tools | 16144-13 | ||
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11252-50 | ||
| Hamilton syringe | Hamilton Company | 88400 | ||
| Gauze sponges | Office Depot | 674889 | ||
| Fluorochrome | Sigma | 39286 | ||
| Alcohol | Sigma | 459844 | 70% | |
| H2O2 | Sigma | H3410 | 3% |
References
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Cite This Article
Tang, Z., Zhang, S., Lee, C., Kumar, A., Arjunan, P., Li, Y., Zhang, F., Li, X. An Optic Nerve Crush Injury Murine Model to Study Retinal Ganglion Cell Survival. J. Vis. Exp. (50), e2685, doi:10.3791/2685 (2011).