Un modèle Optic Nerve Crush blessures murins pour étudier la rétine de survie des cellules ganglionnaires
Summary
Ce protocole montre comment rétrograde marquer les cellules ganglionnaires de la rétine, et la façon de faire ultérieurement une lésion du nerf optique écraser dans le but d'analyser la rétine survie des cellules ganglionnaires et l'apoptose. Il s'agit d'un modèle de maladie expérimentale pour différents types de neuropathie optique, notamment un glaucome.
Abstract
Blessure au nerf optique peuvent conduire à une dégénérescence axonale, suivie par une mort progressive des cellules ganglionnaires de la rétine (CGR), qui se traduit par une perte de vision irréversible. Des exemples de telles maladies à l'homme comprennent traumatiques neuropathie optique et une dégénérescence du nerf optique dans le glaucome. Elle est caractérisée par des modifications typiques de la tête du nerf optique, progressive dégénérescence du nerf optique, et la perte de cellules ganglionnaires de la rétine, si incontrôlée, conduisant à une perte de vision et de cécité.
L'écrasement du nerf optique (ONC) modèle de lésion de la souris est un modèle expérimental pour la maladie importante neuropathie optique traumatique, glaucome, etc Dans ce modèle, la lésion par écrasement du nerf optique conduit à l'apoptose des cellules rétiniennes ganglionnaires progressive. Ce modèle de la maladie peut être utilisée pour étudier les processus généraux et les mécanismes de mort neuronale et de la survie, ce qui est essentiel pour le développement de mesures thérapeutiques. En outre, les approches pharmacologiques et moléculaires peuvent être utilisés dans ce modèle afin d'identifier et de tester le potentiel de réactifs thérapeutiques pour traiter différents types de neuropathie optique.
Ici, nous offrons une démonstration étape par étape de (I) l'étiquetage de base rétrograde de cellules ganglionnaires de la rétine (CGR) au jour 1, (ii) des blessures écrasement du nerf optique au jour 4, (III) Récolte des rétines et analyser la survie au jour du CJR 11, et le résultat Représentant (IV).
Protocol
Discussion
Le modèle du nerf optique écraser blessures murin est utile d'étudier le processus de la mort et la survie du CJR. Ce modèle est également souvent utilisé pour étudier les effets de différents réactifs et les gènes de l'apoptose et la survie du CJR. Un avantage de ce modèle est qu'il a un degré élevé de reproductibilité avec des variations minimes.
Cependant, une attention particulière est requise en plusieurs étapes dans ce modèle. Premièrement, lors de la lé…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Notre recherche est soutenu par le Programme de recherche intra-muros des NIH, l'Institut National Eye.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Stereotaxic apparatus | ASI Instruments | SAS-4100 | ||
| Dissecting microscope | World Precision Instruments | PZMIV-BS | ||
| Scalpel handle | Fine Science Tools | 10003-12 | ||
| Scalpel Blades #15 | Fine Science Tools | 10015-00 | ||
| Microdrill | Fine Science Tools | 18000-17 | ||
| Suture needle | Fine Science Tools | 12050-03 | ||
| Spring scissors | Fine Science Tools | 16144-13 | ||
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11252-50 | ||
| Hamilton syringe | Hamilton Company | 88400 | ||
| Gauze sponges | Office Depot | 674889 | ||
| Fluorochrome | Sigma | 39286 | ||
| Alcohol | Sigma | 459844 | 70% | |
| H2O2 | Sigma | H3410 | 3% |
References
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