एक ऑप्टिक तंत्रिका क्रश चोट murine रेटिनल नाड़ीग्रन्थि सेल जीवन रक्षा अध्ययन मॉडल
Summary
इस प्रोटोकॉल पता चलता है कि कैसे retrogradely रेटिनल नाड़ीग्रन्थि कोशिकाओं, और कैसे करने के लिए बाद में एक ऑप्टिक तंत्रिका कुचलने चोट करने में रेटिना नाड़ीग्रन्थि सेल अस्तित्व और apoptosis का विश्लेषण लेबल. यह ऑप्टिक न्युरोपटी के मोतियाबिंद सहित विभिन्न प्रकार, के लिए एक प्रयोगात्मक रोग मॉडल है.
Abstract
ऑप्टिक तंत्रिका चोट axonal अध: पतन के लिए नेतृत्व, रेटिनल नाड़ीग्रन्थि कोशिकाओं (RGCs), जो अपरिवर्तनीय दृष्टि हानि में परिणाम के एक क्रमिक मौत द्वारा पीछा कर सकते हैं. मानव में इस तरह के रोगों के उदाहरण दर्दनाक ऑप्टिक न्युरोपटी और मोतियाबिंद में ऑप्टिक तंत्रिका अध: पतन शामिल है. यह ऑप्टिक तंत्रिका सिर में विशिष्ट परिवर्तन, प्रगतिशील ऑप्टिक तंत्रिका अध: पतन, और रेटिना नाड़ीग्रन्थि कोशिकाओं के नुकसान, अगर अनियंत्रित, दृष्टि हानि और अंधापन के लिए अग्रणी द्वारा विशेषता है.
ऑप्टिक तंत्रिका को कुचलने (ONC) चोट माउस मॉडल दर्दनाक ऑप्टिक न्युरोपटी के लिए एक महत्वपूर्ण प्रयोगात्मक रोग मॉडल, मोतियाबिंद, आदि इस मॉडल में, कुचलने ऑप्टिक तंत्रिका क्रमिक रेटिना नाड़ीग्रन्थि कोशिकाओं apoptosis के लिए होता है चोट है. यह रोग मॉडल neuronal मौत और अस्तित्व, जो उपचारात्मक उपायों के विकास के लिए आवश्यक है की सामान्य प्रक्रियाओं और तंत्र का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. इसके अलावा, औषधीय और आणविक दृष्टिकोण इस मॉडल में इस्तेमाल किया जा सकता है की पहचान करने और ऑप्टिक न्युरोपटी के विभिन्न प्रकार के इलाज के लिए संभावित चिकित्सात्मक अभिकर्मकों परीक्षण करने के लिए.
यहाँ, हम (मैं) आधारभूत प्रतिगामी रेटिनल नाड़ीग्रन्थि कोशिकाओं की लेबलिंग (RGCs) 1 दिन में, (द्वितीय) 4 दिन में ऑप्टिक तंत्रिका कुचलने चोट, (iii) retinae हार्वेस्ट और दिन में RGC अस्तित्व का विश्लेषण के प्रदर्शन कदम के द्वारा एक कदम प्रदान 11, और (चतुर्थ) के प्रतिनिधि परिणाम.
Protocol
Discussion
ऑप्टिक तंत्रिका को कुचलने चोट murine मॉडल RGC मृत्यु और जीवित रहने की प्रक्रिया का अध्ययन करने के लिए उपयोगी है. यह मॉडल भी अक्सर RGC apoptosis और अस्तित्व पर अलग अभिकर्मकों और जीन के प्रभाव की जांच करने के लिए इस्तेम…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
हमारे शोध एनआईएच, राष्ट्रीय नेत्र संस्थान के अंदर का रिसर्च प्रोग्राम द्वारा समर्थित है.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Stereotaxic apparatus | ASI Instruments | SAS-4100 | ||
| Dissecting microscope | World Precision Instruments | PZMIV-BS | ||
| Scalpel handle | Fine Science Tools | 10003-12 | ||
| Scalpel Blades #15 | Fine Science Tools | 10015-00 | ||
| Microdrill | Fine Science Tools | 18000-17 | ||
| Suture needle | Fine Science Tools | 12050-03 | ||
| Spring scissors | Fine Science Tools | 16144-13 | ||
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11252-50 | ||
| Hamilton syringe | Hamilton Company | 88400 | ||
| Gauze sponges | Office Depot | 674889 | ||
| Fluorochrome | Sigma | 39286 | ||
| Alcohol | Sigma | 459844 | 70% | |
| H2O2 | Sigma | H3410 | 3% |
References
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