Necropsy לאבחון רקמות אוסף נבחר מדגם של חולדות ועכברים
Summary
מאמר זה מתאר את ההליכים לביצוע בדיקה שלאחר המוות הבסיסי של עכבר או חולדה, ואת אוסף של איברים בסיסיים, כמו גם סוגי המדגם מאתגר יותר מ להערכה היסטולוגית, מיקרוביולוגית, ו-PCR.
Abstract
ישנם סוגים רבים מדגם שעשויים להיות שנאספו חיה מורדמים על מנת לסייע באבחון או לגלות חומרים מזהמים במושבה חיה. איסוף נכון של רקמות לעיבוד היסטולוגית עוד יכול להשפיע על איכות תוצאות הבדיקה. מאמר זה מתאר את התנהלות בדיקה בסיסית ברוטו כולל זיהוי של הלב, הכבד, הריאות, הכליות והטחול, וכן כיצד לאסוף אותם איברים. בנוסף ארבעה רקמה / מדגם טכניקות קשה יותר אוסף הם הפגינו. אוסף ריאות זלוף יכול להיות מאתגר במיוחד כאשר הרקמה צריך להיות מנופח כיאות עם מקבע על מנת בתוך הרקמה לתקן כראוי כדי לאפשר הערכה היסטולוגית יסודית. מאמר זה מדגים את הטכניקה צעד אחר צעד כדי להסיר את הריאות לנפח אותו עם מקבע על מנת להשיג קיבעון אופטימלי של הרקמה בתוך 24 שעות. אוסף המוח יכול להיות מאתגר באותה מידה כמו ברקמה רכה נפגע בקלות. מאמר זה מדגים את הטכניקה צעד אחר צעד כדי לחשוף ולהסיר את המוח מהגולגולת עם נזק מינימלי לרקמות. קשרי לימפה mesenteric הוא סוג מדגם טוב בו כדי לזהות הרבה גורמים מזהמים נפוצים כמו וירוסים enteric להתמיד זמן רב יותר הצומת לימפה מאשר לשפוך בצואה. מאמר זה מדגים את התהליך צעד אחר צעד לאיתור בסביבה נקייה מחיידקים, הסרת בלוטת לימפה mesenteric. לבסוף, זיהוי של חומרים מזהמים של דרכי הנשימה יכולה להתבצע על ידי התרבות חיידקי או בדיקת PCR של האף ו / או הסימפונות נוזל aspirates נלקחה ב necropsy. הליך זה מתאר קבלת והכנת מדגם לשאוב הנשימה לתרבות חיידקי בדיקות PCR.
Protocol
Discussion
איסוף נתונים בסוף המחקר עשוי לדרוש בדיקה שלאחר המוות של בעלי חיים. תאר היטב מה הוא ראה ולזכור לבחון את כל הרקמות. נהלים אלה נועדו בעיקר כדי לייעל necropsy אוסף מדגם לפיקוח מחלות זיהומיות, אך רובם ניתנים להתאמה בקלות החקירות התמקדו התקריות התפרצויות המחלה או חשד בו אולי רק…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Reagent name | Company | Catalog number | Comments |
|---|---|---|---|
| Cutting board | Thermo Electron Corp Cat #36114 | Cat #36114 | |
| Small scissors | ROBOZ | RS-5910, G204 | 23mm blades, 3.5″ length, straight |
| Medium scissors | ROBOZ | RS-6808, G207 | 5″ |
| Large scissors | ROBOZ | RS-6826, G65″ | 6.25″ |
| Forceps-Curved | ROBOZ | RS-8254 (M1/21004) | 4.5″, serrated, slight curve |
| Forceps-Microdissecting | ROBOZ | RS-5238 | Hudson-(EWALD) |
| Forceps-Tissue Forceps | ROBOZ | RS–8160 | Rat tooth |
| Flame sterilizer | Oxford Labware Products | Bacti-Cinerator #5889-001007 | |
| Scalpel | Cancer Diagnostics, Inc. | Finger Scalpels #60, Cat#FS0060 | |
| Pipettes | VWR | Pasteur Pipet 5 3/4″, Cat#14672-400 | |
| Autoclave bags | Propper Manufacturing Company | Sterilizer Bag Paper Pouches Cat#021002(3100923)E09110 | For Pasteur pipettes |
| Pipette bulb | VWR | Cat#56310-240 | |
| Eppendorf tubes | Sarstedt | SafeSeal microtube 2mL, Ref#72.695 | |
| Eppendorf tubes | Argos | 5mL microtube Cat#T20765-C | |
| Syringe | BD (Beckton Dickenson) | 1ml-309602 3 ml-300910 5ml-309603 10mL Cat#309604 20mL Cat#309661 | |
| Needles | BD | 26G-309625 18G-305195 | |
| Neutral buffered formalin | VWR | 20L 10% NBF, Cat#16004-128 | |
| Saline | ThermoScientific | Buffered Blood Bank Saline, Cat#23-309-178 | |
| Trypticase soy broth | Becton Dickenson | TSB: Dehydrated, Cat#211825 | |
| Phosphate buffered saline | Sigma Aldrich | HA Buffer, Cat#P3813-10PAK | |
| Formalin cups | VWR | 4oz Cat#36318-852 8oz Cat#36318-860 16oz Cat#36318-858 | |
| Large formalin cups | OakRidge Products | 32oz container Cat#0432-1100 | |
| Extra large formalin cup | VWR | HDPE Multipurpose 160oz container Cat#89038-282 | |
| Suture material | Henry Schein | Braided silk surgical suture, Ref#100-5000, M766750 | For mouse lung inflation |
| Twine | Staples | Cat#QUA-46173 | For rat lung inflation |
References
- AVMA. . AVMA Guidelines on Euthanasia. , (2007).
- Feldman, D. B., Seely, J. C. . Necropsy Guide: Rodents and the rabbit. , (1988).
- King, J. M., Dodd, D. C., Roth, L. . The Necropsy Book. , (2006).
- Kittel, B. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice–Part 2. A joint publication of the RITA and NACAD groups. Exp Toxicol Pathol. 55, 413-431 (2004).
- Komarek, V., Fox, J. G. Chapter 1. The Mouse in Biomedical Research. , 1-22 (2007).
- Morawietz, G. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice–Part 3. A joint publication of the RITA and NACAD groups. Exp Toxicol Pathol. 55, 433-449 (2004).
- Popesko, P., Raijtová, V., Horák, J. . Colour Atlas of Anatomy of Small Laboratory Animals. 2, 91-106 (2002).
- Ruehl-Fehlert, C. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice–part 1. Exp Toxicol Pathol. 55, 91-106 (2003).
