体外器官角膜模型急性上皮疱疹，单纯疱疹病毒I型感染
Summary
在这个视频文章中，我们描述了使用一个新的<em>体外</em>模型急性疱疹单纯病毒I型角膜上皮感染。
Abstract
疱疹性角膜炎是一种与单纯疱疹病毒1型（HSV-1）相关联的最严重的病症。疱疹性角膜炎是目前在发达国家都角膜和来自感染相关性失明的首要原因。典型的表现包括感染疱疹性角膜炎的角膜上皮，有时更深的角膜基质和内皮细胞，导致永久性角膜病理疤痕，变薄，不透明度1。
角膜HSV-1感染的传统研究了两种类型的实验模型。在被感染的培养皿中培养的单层角膜上皮细胞的体外模型，提供简单，高层次的可复制性，快速实验，和相对低廉的成本。在另一方面， 在体内模型，在其中直接进行接种的动物（如兔或小鼠）在角膜上，提供了一个高度复杂的生理系统，但具有较高的成本，更长的实验中，必要的动物护理，和更大程度的可变性。
在这个视频文章中，我们提供了详细演示了一个新的离体角膜上皮HSV-1感染模型，它结合的优势，无论是在体外和体内模型。 体外模型采用完整的角膜organotypically维持在文化和HSV-1感染。使用的体外模型允许高度的生理基础的结论，但它是相当便宜，需要投入的时间可比的体外模型。
Protocol
Discussion
在这个视频文章中，我们描述了急性角膜上皮细胞在体外模型中的HSV-1感染的研究方法。之间的在体外和体内模型中，该模型是一个有用的踏脚石，因为它允许对生理精确验证细胞培养的结果，并且由此限制动物实验的量必须执行的。此外，体外模型提供了一种独特而宝贵的机会，学习完整的人角膜上皮细胞单纯疱疹病毒感染。下面列出的是采用这种模式?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
特拉华谷狮子会眼库的支持是非常宝贵的，这项工作。鼠标主，单克隆抗体ICP8的是一种礼物博士大卫Knipe（哈佛医学院）。我们也感谢斯蒂芬·詹宁斯（Drexel大学医学院）和彼得·莱布森（Wills眼科研究所）博士的有益讨论和专业知识。
Materials
| Reagents/Supplies | Company | Catalogue # |
| Minimum Essential Medium (MEM) | Mediatech | 10-010-CV |
| Non-Essential Amino Acids (100x solution) | Mediatech | 25-025-CI |
| L-Glutamine | Mediatech | 25-005-CI |
| Penicillin G Sodium Salt | Sigma | P3032 |
| Streptomycin Sulfate Salt | Sigma | S9137 |
| Agarose | Invitrogen | 15510-027 |
| Phosphate Buffered Saline (PBS) | Prepared in lab | N/A |
| Trypsin EDTA (1x) | Mediatech | 25-053-CI |
| DNeasy Blood & Tissue Kit | QIAGEN | 69504 |
| RNeasy Mini Kit | QIAGEN | 74104 |
| Laemmli Buffer | Prepared in lab | N/A |
| Optimal Cutting Temperature (OCT) Compound | Tissue-Tek | 4583 |
| Whole Rabbit Eyes (Young) | Pel-Freez | 41211-2 |
| Human Corneas and Whole Eyes | Local Eye Bank | N/A |
| 12 Well Porcelain Spot Plate | Avogadro’s Lab Supply | 1877 |
| 35 mm Tissue Culture Dish | Falcon | 353001 |
| 6 Well Cell Culture Plate | Greiner Bio-One | 657160 |
| Cryomold Intermediate | Tissue-Tek | 4566 |
References
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