Et murint lukket bryst Model for myocardial iskæmi og reperfusion

Summary

Kirurgisk trauma inducerer en inflammatorisk respons. Cytokiner og endogene ligander vides at modulere myocardial infarktstørrelse efter iskæmi og reperfusion. Vi præsenterer en modificeret lukket bryst model af murint iskæmi og reperfusion under anvendelse hængende vægt på at minimere virkningerne af torakotomi.

Abstract

Kirurgisk trauma af thorakotomi med åbne bryst modeller af koronar ligatur inducerer en immunrespons, som modificerer forskellige mekanismer involveret i iskæmi og reperfusion. Immunrespons omfatter cytokinekspression og frigivelse eller sekretion af endogene ligander af medfødte immunforsvar receptorer. Aktivering af medfødte immunitet kan potentielt modulere infarktstørrelse. Vi har ændret en eksisterende murine lukket kiste model ved hjælp af hængende vægte, som kunne være nyttige for at studere myokardie præ-og postconditioning og den rolle medfødte immunitet i myokardie iskæmi og reperfusion. Denne model tillader dyrene at komme sig kirurgisk traume, før indtræden af ​​myocardial iskæmi.

Flygtige anæstetika er intenst undersøgt, og deres forkonditionering virkning for iskæmisk hjertesygdom, er velkendt. Men denne beskyttende virkning udelukker dens anvendelse i åbne bryst modeller af kranspulsåreombinding. Således kunne en anden fordel være anvendelsen af ​​the godt kontrollerbare flygtige anæstetika til instrumentering i en kronisk lukket brystet model, idet deres klargøring, effekten varer op til 72 timer. Kroniske hjertesygdomme med intermitterende iskæmi og flere ramte modeller er andre mulige anvendelser af denne model.

Den kroniske lukkede bryst model undergår intuberet og ventileret mus en lateral stump torakotomi via 4. intercostale rum. Efter identifikation af den venstre forreste nedadgående en ligatur føres under fartøjet, og begge sutur ender er ført gennem en okkluder. Derefter er begge sutur ender føres gennem brystvæggen, knyttet til dannelse af en løkke, og efterladt i det subkutane væv. Efter brystet lukning og genopretning i 5 dage, er mus bedøves igen, brystet hud og genåbnet hængende vægte hooked op til loop under EKG-kontrol.

Ved slutningen af ​​iskæmi / reperfusion protokollen, kan hjerter farves med TTC for infarktStørrelsen vurdering eller underkastes perfusion fiksering for at tillade morfometriske undersøgelser foruden histologi og immunhistokemi.

Protocol

1. Induktion af anæstesi Til induktion med isofluran, anbringes musen i en induktion kasse, der er forbundet med damp sættet 3,0 vol% og oxygenstrøm på 0,5 L / min. Efter bevidstløshed opnås med taktil stimulering ikke at inducere et respons, og forlem eller bagben pedal tilbagetrækning refleks er fraværende, anbringe musen på et temperaturstyret operationsbord i rygleje. Opretholde anæstesi i en nasal kegle, som er forbundet med damp via induktion boksen. Læne hovedet ved at fastsætte d…

Discussion

Vi har ændret en murin lukket kiste model ved at gå ind i hjertet gennem en venstre lateral interkostale torakotomi og lede de LAD suturer til brystet i venstre midclavicular linje. Forlader knoklede brystkassen intakt vil minimere traumer, har brug for smertestillende medicin, kirurgiske sårinfektioner og dermed lette inddrivelsen. Ved at bevare den venstre indre pattedyret arterie der ikke er behov for elektrokauterisation. Vi forlader suturen loop i det subkutane væv til senere nem adgang og bruge en hængende v?…

Materials

Name of the reagent	Company	Catalogue number
Vapor	Drägerwerk AG	Isoflo
Microscope	Leica	M80
Light source	Schott	KL 1500 LCD
Homeothermic Blanket Control Unit	Harvard Apparatus
MiniVent Type 845	Hugo Sachs Elektronik
8-0 Prolene	Ethicon	BV130-5 6.5mm 3/8c
6-0 Prolene	Ethicon	BV-1 9.3 mm 3/8c
Kalt suture needle size 3	FST	12050-03
Triphenyltetrazolium	Sigma Aldrich	93145
Phthalo blue	Heucotech LTD
PowerLab	ADInstruments