A Murine chiuso del torace modello di ischemia miocardica e riperfusione
Summary
Trauma chirurgico induce una risposta infiammatoria. Citochine e ligandi endogeni sono noti per modulare dimensione miocardio a seguito di ischemia e riperfusione. Vi presentiamo una versione modificata del chiuso petto modello di ischemia e di riperfusione murino con pesi appesi per minimizzare gli effetti di toracotomia.
Abstract
Trauma chirurgico in toracotomia a torace aperto modelli di legatura coronarica induce una risposta immunitaria che modifica differenti meccanismi di ischemia e riperfusione. Risposta immunitaria comprende l'espressione di citochine e il rilascio o la secrezione di ligandi endogeni dei recettori del sistema immunitario innato. L'attivazione dell'immunità innata sono potenzialmente in grado di modulare le dimensioni dell'infarto. Noi abbiamo modificato uno esistente topo chiuso del torace modello con pesi pendenti che potrebbero essere utili per lo studio del miocardio pre-e postconditioning e il ruolo dell'immunità innata nei ischemia miocardica e riperfusione. Questo modello consente agli animali di recuperare dal trauma chirurgico prima della comparsa di ischemia miocardica.
Anestetici volatili sono stati studiati intensamente e loro effetto condizionamento per il cuore ischemico è ben noto. Tuttavia, questo effetto protettivo preclude l'uso di modelli in torace aperto di legatura dell'arteria coronarica. Così, un altro vantaggio potrebbe essere l'uso di secolole e ben controllabili anestetici volatili per la strumentazione in una malattia cronica chiuso del torace modello, dal momento che il loro effetto di precondizionamento dura fino a 72 ore. Malattie cardiache croniche con ischemia intermittente e modelli più colpite sono altre possibili applicazioni di questo modello.
Per la cronica chiuso del torace modello, intubato e ventilato topi sottoposti a una toracotomia laterale ottuso attraverso il quarto spazio intercostale. A seguito della identificazione discendente anteriore sinistra una legatura viene passata sotto l'imbarcazione e entrambe le estremità di sutura vengono fatti passare lungo un occlusore. Quindi, entrambe le estremità di sutura vengono fatti passare attraverso la parete toracica, annodato per formare un anello e lasciato nel tessuto sottocutaneo. Dopo la chiusura del torace e di recupero per 5 giorni, i topi sono anestetizzati ancora una volta, la pelle del torace viene riaperto e pesi appesi sono collegati al circuito ECG sotto controllo.
Alla fine del ischemia / riperfusione protocollo, cuori possono essere colorati con TTC per infartodimensioni valutazione o sottoposti a perfusione fissazione per consentire gli studi morfometrici oltre alla istologia e di immunoistochimica.
Protocol
Discussion
Abbiamo modificato un topo chiuso petto modello di accesso al cuore attraverso una toracotomia laterale sinistra intercostale e che conduce le suture KOP al petto in linea di sinistra medioclavicolare. Lasciando la gabbia toracica ossea intatta sarà minimizzare il trauma, il bisogno di farmaci per il dolore, l'infezione del sito chirurgico e, quindi, facilitare il recupero. Per preservare l'arteria interno mammifero non c'è bisogno di elettrocauterizzazione. Si lascia il ciclo sutura nel tessuto sottocutan…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ringraziamo Daniel Duerr per il suo consiglio per quanto riguarda la fissazione di perfusione-tecnica.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Vapor | Drägerwerk AG | Isoflo |
| Microscope | Leica | M80 |
| Light source | Schott | KL 1500 LCD |
| Homeothermic Blanket Control Unit | Harvard Apparatus | |
| MiniVent Type 845 | Hugo Sachs Elektronik | |
| 8-0 Prolene | Ethicon | BV130-5 6.5mm 3/8c |
| 6-0 Prolene | Ethicon | BV-1 9.3 mm 3/8c |
| Kalt suture needle size 3 | FST | 12050-03 |
| Triphenyltetrazolium | Sigma Aldrich | 93145 |
| Phthalo blue | Heucotech LTD | |
| PowerLab | ADInstruments |
References
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