Miyokard İskemi ve Reperfüzyon bir Mürin Kapalı göğüs Modeli
Summary
Cerrahi travma inflamatuvar yanıt indükler. Sitokinler ve endojen ligand iskemi ve reperfüzyon sonrası miyokard infarkt modüle bilinmektedir. Biz torakotomi etkilerini en aza indirmek için asılı ağırlıklar kullanılarak murin iskemi ve reperfüzyon değiştirilmiş bir kapalı göğüs modeli sunuyoruz.
Abstract
Koroner ligasyon açık göğüs modellerinde torakotomi ile cerrahi travma ve iskemi reperfüzyon yer alan farklı mekanizmalar değiştiren bir bağışıklık yanıtı indükler. İmmün yanıt sitokin salınımını ve immün reseptörlerin endojen ligand serbest bırakılması veya salgı içerir. Doğal bağışıklığın aktivasyonu potansiyel infarkt modüle olabilir. Biz miyokard öncesi ve postconditioning ve iskemi ve reperfüzyon sırasında bağışıklık rolünü incelemek için yararlı olabilir asılı ağırlıklar kullanarak mevcut bir fare kapalı göğüs modeli değiştirdiniz. Bu model hayvan miyokard iskemi başlangıcından önce cerrahi travma gelen geri verir.
Uçucu anestezikler yoğun olarak çalışılmış ve iskemik kalp için kendi önkoşullaması etkisi iyi bilinmektedir. Ancak, bu koruyucu etkisi koroner arter ligasyonu açık göğüs modellerinde kullanımını engellemektedir. Bu nedenle, bir başka avantajı th kullanılması olabilirKronik bir kapalı göğüs model araçları için e iyi kontrol edilebilen uçucu anesteziklerin, kendi önkoşullaması etkisi 72 saat kadar sürer bu yana. Intermitan iskemi ve birden fazla hit modelleri ile kronik kalp hastalıkları bu modelin diğer olası uygulamaları vardır.
Kronik kapalı göğüs modeli için, entübe ve havalandırılmış fareler 4. interkostal üzeri yanal künt torakotomiye. Bir ligatür sol ön inen ve ardından kimlik geminin altına geçirilir ve her iki sütür ucu bir oklüder ile diziliyor. Ondan sonra iki sütür ucu bir döngü oluşturmak için düğümlenmiş göğüs duvarının üzerinden geçen ve deri altı doku kalır. Göğüs kapatılması ve 5 gün boyunca kurtarma sonra, fareler tekrar anestezi, göğüs deri tekrar açılır ve asılı ağırlıklar EKG kontrolü altında döngü bağladım edilir.
Iskemi / reperfüzyon protokolünün sonunda, kalp enfarktüsü için TTC ile boyanmış edilebilirboyutu değerlendirmesi veya histoloji ve immünhistokimya yanında morfometrik çalışmaların izin perfüzyon fiksasyon uğrarlar.
Protocol
Discussion
Biz sol yanal interkostal torakotomi yoluyla kalbe erişim ve sol köprücük kemiği çizgisinde göğüs LAD sütür dışarı önde gelen bir fare kapalı göğüs modeli değiştirdiniz. Kemikli göğüs kafesi zedelemeden, travmanın en aza indirmek, böylece ağrı kesiciler, cerrahi alan enfeksiyonu ve ihtiyacı, kurtarma kolaylaştıracaktır. Sol iç memeliye arter koruyarak elektrokoter için bir ihtiyaç vardır. Daha sonra kolay erişim için subkutan dokuda sütür döngü terk ve tanımlanmış bir oklüzy…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Biz perfüzyon fiksasyon tekniği ile ilgili onun tavsiye Daniel Duerr teşekkür ederim.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Vapor | Drägerwerk AG | Isoflo |
| Microscope | Leica | M80 |
| Light source | Schott | KL 1500 LCD |
| Homeothermic Blanket Control Unit | Harvard Apparatus | |
| MiniVent Type 845 | Hugo Sachs Elektronik | |
| 8-0 Prolene | Ethicon | BV130-5 6.5mm 3/8c |
| 6-0 Prolene | Ethicon | BV-1 9.3 mm 3/8c |
| Kalt suture needle size 3 | FST | 12050-03 |
| Triphenyltetrazolium | Sigma Aldrich | 93145 |
| Phthalo blue | Heucotech LTD | |
| PowerLab | ADInstruments |
References
- Lim, S. Y., Davidson, S. M., Hausenloy, D. J., Yellon, D. M. Preconditioning and postconditioning: the essential role of the mitochondrial permeability transition pore. Cardiovasc. Res. 75, 530-535 (2007).
- Eckle, T., Koeppen, M., Eltzschig, H. Use of a Hanging Weight System for Coronary Artery Occlusion in Mice. J. Vis. Exp. (50), e2526 (2011).
- Michael, L. H. Myocardial infarction and remodeling in mice: effect of reperfusion. Am. J. Physiol. 277, H660-H668 (1999).
- Nossuli, T. O. A chronic mouse model of myocardial ischemia-reperfusion: essential in cytokine studies 52. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 278, H1049-H1055 (2000).
- Irwin, M. W. Tissue expression and immunolocalization of tumor necrosis factor-alpha in postinfarction dysfunctional myocardium 846. Circulation. 99, 1492-1498 (1999).
- Michael, L. H. Creatine kinase and phosphorylase in cardiac lymph: coronary occlusion and reperfusion. Am. J. Physiol. 248, 350-359 (1985).
- Tonkovic-Capin, M. Delayed cardioprotection by isoflurane: role of K(ATP) channels 765. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 283, H61-H68 (2002).
- Tsutsumi, Y. M. Role of caveolin-3 and glucose transporter-4 in isoflurane-induced delayed cardiac protection. Anesthesiology. 112, 1136-1145 (2010).
- Benedict, P. E., Benedict, M. B., Su, T. P., Bolling, S. F. Opiate drugs and delta-receptor-mediated myocardial protection. Circulation. 100, II357-II360 (1999).
- Ren, X., Wang, Y., Jones, W. K. TNF-alpha is required for late ischemic preconditioning but not for remote preconditioning of trauma. J. Surg. Res. 121, 120-129 (2004).
- Andrassy, M. High-mobility group box-1 in ischemia-reperfusion injury of the heart. Circulation. 117, 3216-3226 (2008).
- Kim, S. C. Extracellular heat shock protein 60, cardiac myocytes, and apoptosis. Circ. Res. 105, 1186-1195 (2009).
- Lin, L. HSP60 in heart failure: abnormal distribution and role in cardiac myocyte apoptosis. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 293, 2238-2247 (2007).
