Un murin à thorax fermé Modèle d'ischémie myocardique et la reperfusion
Summary
Un traumatisme chirurgical induit une réponse inflammatoire. Les cytokines et les ligands endogènes sont connus pour moduler la taille infarctus du myocarde après une ischémie et la reperfusion. Nous présentons une version modifiée à thorax fermé modèle murin d'ischémie et la reperfusion en utilisant les pondérations suspendus pour minimiser les effets de la thoracotomie.
Abstract
Un traumatisme chirurgical par thoracotomie à thorax ouvert dans les modèles de la ligature coronaire induit une réponse immunitaire, ce qui modifie différents mécanismes impliqués dans l'ischémie et la reperfusion. La réponse immunitaire comprend l'expression des cytokines et la libération ou la sécrétion de ligands endogènes de récepteurs immunitaires innées. L'activation de l'immunité innée peut potentiellement moduler taille de l'infarctus. Nous avons modifié un existant murin à thorax fermé modèle en utilisant les pondérations suspendus qui pourraient être utiles pour l'étude du myocarde avant et postconditionnement et le rôle de l'immunité innée dans l'ischémie myocardique et la reperfusion. Ce modèle permet aux animaux de récupérer d'un traumatisme chirurgical avant l'apparition de l'ischémie myocardique.
Les anesthésiques volatils ont été intensément étudiés et leur effet de préconditionnement pour la cardiopathie ischémique est bien connu. Cependant, cet effet protecteur empêche son utilisation dans les modèles à thorax ouvert de ligature de l'artère coronaire. Ainsi, un autre avantage pourrait être l'utilisation d'ee bien contrôlables anesthésiques volatils pour l'instrumentation dans une chronique à thorax fermé modèle, puisque leur effet de préconditionnement dure jusqu'à 72 heures. Les maladies cardiaques chroniques présentant une ischémie intermittente et les modèles touchés sont multiples autres applications possibles de ce modèle.
Pour la chronique à thorax fermé modèle, les souris intubés et ventilés subir une thoracotomie latérale émoussée par l'intermédiaire du 4eme espace intercostal. Identification à la suite de l'descendante antérieure gauche d'une ligature est passé en dessous de la cuve et les deux extrémités de suture sont enfilés à travers un obturateur. Puis, les deux extrémités de suture sont passés à travers la paroi thoracique, noué à former une boucle et à gauche dans le tissu sous-cutané. Après la fermeture du thorax et de récupération pour 5 jours, les souris sont anesthésiées à nouveau, la peau du thorax est rouvert et le poids suspendus sont accrochés à la boucle sous contrôle ECG.
A la fin du protocole d'ischémie / reperfusion, le cœur peut être teinté avec TTC pour l'infarctusl'évaluation de taille ou de subir fixation par perfusion afin de permettre des études morphométriques en plus de l'histologie et l'immunohistochimie.
Protocol
Discussion
Nous avons modifié un murin à thorax fermé modèle en accédant au cœur par une thoracotomie gauche intercostal latéral et conduisant les sutures DAL à la poitrine dans la ligne médio-claviculaire gauche. En sortant de la cage thoracique osseuse intacte sera de minimiser les traumatismes, le besoin de médicaments contre la douleur, infection du site opératoire et donc, de faciliter la récupération. En préservant la gauche carotide interne des mammifères il n'est pas nécessaire pour l'électrocauté…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Nous remercions Daniel Duerr pour ses conseils en ce qui concerne la perfusion de fixation technique.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Vapor | Drägerwerk AG | Isoflo |
| Microscope | Leica | M80 |
| Light source | Schott | KL 1500 LCD |
| Homeothermic Blanket Control Unit | Harvard Apparatus | |
| MiniVent Type 845 | Hugo Sachs Elektronik | |
| 8-0 Prolene | Ethicon | BV130-5 6.5mm 3/8c |
| 6-0 Prolene | Ethicon | BV-1 9.3 mm 3/8c |
| Kalt suture needle size 3 | FST | 12050-03 |
| Triphenyltetrazolium | Sigma Aldrich | 93145 |
| Phthalo blue | Heucotech LTD | |
| PowerLab | ADInstruments |
References
- Lim, S. Y., Davidson, S. M., Hausenloy, D. J., Yellon, D. M. Preconditioning and postconditioning: the essential role of the mitochondrial permeability transition pore. Cardiovasc. Res. 75, 530-535 (2007).
- Eckle, T., Koeppen, M., Eltzschig, H. Use of a Hanging Weight System for Coronary Artery Occlusion in Mice. J. Vis. Exp. (50), e2526 (2011).
- Michael, L. H. Myocardial infarction and remodeling in mice: effect of reperfusion. Am. J. Physiol. 277, H660-H668 (1999).
- Nossuli, T. O. A chronic mouse model of myocardial ischemia-reperfusion: essential in cytokine studies 52. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 278, H1049-H1055 (2000).
- Irwin, M. W. Tissue expression and immunolocalization of tumor necrosis factor-alpha in postinfarction dysfunctional myocardium 846. Circulation. 99, 1492-1498 (1999).
- Michael, L. H. Creatine kinase and phosphorylase in cardiac lymph: coronary occlusion and reperfusion. Am. J. Physiol. 248, 350-359 (1985).
- Tonkovic-Capin, M. Delayed cardioprotection by isoflurane: role of K(ATP) channels 765. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 283, H61-H68 (2002).
- Tsutsumi, Y. M. Role of caveolin-3 and glucose transporter-4 in isoflurane-induced delayed cardiac protection. Anesthesiology. 112, 1136-1145 (2010).
- Benedict, P. E., Benedict, M. B., Su, T. P., Bolling, S. F. Opiate drugs and delta-receptor-mediated myocardial protection. Circulation. 100, II357-II360 (1999).
- Ren, X., Wang, Y., Jones, W. K. TNF-alpha is required for late ischemic preconditioning but not for remote preconditioning of trauma. J. Surg. Res. 121, 120-129 (2004).
- Andrassy, M. High-mobility group box-1 in ischemia-reperfusion injury of the heart. Circulation. 117, 3216-3226 (2008).
- Kim, S. C. Extracellular heat shock protein 60, cardiac myocytes, and apoptosis. Circ. Res. 105, 1186-1195 (2009).
- Lin, L. HSP60 in heart failure: abnormal distribution and role in cardiac myocyte apoptosis. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 293, 2238-2247 (2007).
