Orthotope dunne darm bij ratten
Summary
Dunne darm transplantatie is uitgegroeid tot een geaccepteerde behandeling voor patiënten met onomkeerbare intestinale mislukking. Onze experimenteel model van orthotope dunne darm transplantatie bij ratten dient als een betrouwbaar instrument om de onderliggende immunologische en inflammatoire processen die darmtransplantatie compliceren aan te pakken.
Abstract
Dunne darm transplantatie is uitgegroeid tot een geaccepteerde klinische optie voor patiënten met een korte darm syndroom en het falen van parenterale voeding (onomkeerbare intestinale falen). In gespecialiseerde centra verbeterd operatieve en beheren van strategieën hebben geleid tot een uitstekende korte en middellange termijn de patiënt en transplantaatoverleving, terwijl het verstrekken van hoge kwaliteit van leven 1,3. In tegenstelling tot de meer gebruikelijke transplantatie van andere vaste organen (dwz hart, lever) veel onderliggende mechanismen van graft function en immunologische veranderingen veroorzaakt door intestinale transplantatie zijn niet geheel bekend 6,7. Episodes van acute afstoting, sepsis en chronische graft falen zijn de belangrijkste obstakels op zijn bijdrage aan minder gunstige lange termijn uitkomst en belemmeren een bredere inzet van de procedure ondanks een groeiend aantal patiënten op de startpagina van parenterale voeding, die zou mogelijk profiteren van een dergelijke transplantatie. De dunne darm bevateen groot aantal passagiers leukocyten gewoonlijk aangeduid als deel van de ingewanden geassocieerde lymfoïde systeem (GALT) dit deel uitmaakt van de oorzaak van de hoge immunogenity van de intestinale graft. De aanwezigheid en de nabijheid van vele commensalen en pathogenen in de darm worden de ernst van sepsis episodes eenmaal graft mucosale integriteit is aangetast (bijvoorbeeld afwijzing). Op het gebied van darm-en multi-transplantatie meer gegevens gegenereerd uit betrouwbare en haalbare diermodellen is onmisbaar. Het model hierin combineert zowel de betrouwbaarheid en haalbaarheid eenmaal vastgesteld op een gestandaardiseerde wijze en kunnen waardevolle inzichten geven in de onderliggende complexe moleculaire, cellulaire en functionele mechanismen die worden veroorzaakt door intestinale transplantatie. We hebben met succes gebruikt en verfijnd de beschreven procedure al meer dan 5 jaar in ons laboratorium 8-11. De Jove video-gebaseerd formaat is vooral handig om de complexe procedures te tonenprocedure en vermijden de eerste valkuilen voor groepen van plan om een orthotope knaagdiermodel onderzoeken darmtransplantatie vast te stellen.
Protocol
Representative Results
Discussion
Terwijl intestinale transplantatie modellen in ratten zijn beschreven zo vroeg in de 1970ies 5 meeste van de onlangs in dienst modellen te betrekken heterotope darmtransplantatie met behulp van verschillende technieken 13. Terwijl de heterotope procedures in het algemeen het voordeel gemakkelijker microchirurgische technieken en betere toegankelijkheid van het transplantaat voor de beoordeling, heterotope darmtransplantatie heeft het grote nadeel dat ze niet rekening houdend met de verschillende in…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| University of Wisconsin (UW) solution (ViaSpan) | Bristol-Myers Squibb | ||
| Uro-Nebacetin N solution | Nycomed | 6967855 | |
| Ampicillin | Ratiopharm | ||
| Carprofen (Rimadyl) | Pfizer | ||
| Prolene 10-0 unresorbable suture | Ethicon | ||
| Monocryl 6-0 resorbable suture | Ethicon | ||
| Vicryl 3-0 resorbable suture | Ethicon | ||
| i.v. Catheter G 20 1.1×33 mm | Braun | ||
| i.v. Catheter G 22 0.9×25 mm | Braun | ||
| Kodan Skin Prep | Schülke | ||
| NaCl 0.9% Infusion solution | Braun | ||
| Curved forceps small | FineScienceTools | 11009-13 | |
| Micro forceps curved | AESCULAP | BD 333 | |
| Micro forceps curved | AESCULAP | FD281R | |
| Micro forceps straight 1 | WPI | 5 | |
| Micro forceps straight 2 | WPI | 2 | |
| Micro needle holder | WPI | 14081 | |
| Micro scissors | FineScienceTools | 15006-09 | |
| Micro scalpel | MANI | Ophthalmic knife | |
| Micro clamps | AESCULAP | FB329R |
References
- Abu-Elmagd, K. M., et al. Five Hundred Intestinal and Multivisceral Transplantations at a Single Center: Major Advances With New Challenges. Ann. Surg. 250 (4), 567-56 (2009).
- Berney, T., et al. Portal versus systemic drainage of small bowel allografts: comparative assessment of survival, function, rejection, and bacterial translocation. J. Am. Coll. Surg. 195 (6), 804 (2002).
- Fishbein, T. M. Intestinal transplantation. N. Engl. J. Med. 361 (10), 998 (2009).
- Hernandez, F., et al. Is portal venous outflow better than systemic venous outflow in small bowel transplantation? Experimental study in syngeneic rats. J. Pediatr. Surg. 40 (2), 336 (2005).
- Monchik, G. J., Russell, P. S. Transplantation of small bowel in the rat: technical and immunological considerations. Surgery. 70 (5), 693 (1971).
- Murase, N., et al. Graft-versus-host disease after brown Norway-to-Lewis and Lewis-to-Brown Norway rat intestinal transplantation under FK506. Transplantation. 55 (1), 1 (1993).
- Murase, N., et al. Immunomodulation of intestinal transplant with allograft irradiation and simultaneous donor bone marrow infusion. Transplant Proc. 31 (1-2), 565 (1999).
- Pech, T., et al. Perioperative infliximab application ameliorates acute rejection associated inflammation after intestinal transplantation. Am. J. Transplant. 10 (11), 2431 (2010).
- Schaefer, N., et al. Resident macrophages are involved in intestinal transplantation-associated inflammation and motoric dysfunction of the graft muscularis. Am J Transplant. 7 (5), 1062 (2007).
- Schaefer, N., et al. Mechanism and impact of organ harvesting and ischemia-reperfusion injury within the graft muscularis in rat small bowel transplantation. Transplant. Proc. 38 (6), 1821 (2006).
- Schaefer, N., et al. Acute rejection and the muscularis propria after intestinal transplantation: the alloresponse, inflammation, and smooth muscle function. Transplantation. 85 (10), 1465 (2008).
- Xue, L., et al. Surgical experience of refined 3-cuff technique for orthotopic small-bowel transplantation in rat: a report of 270 cases. Am. J. Surg. 198 (1), 110 (2009).
- Zhang, X. Q., et al. Simplified techniques in rat heterotopic small bowel transplantation. Transplant. Proc. 38 (6), 1840 (2006).
- Zhao, Y., et al. The establishment of a new en bloc combined liver-small bowel transplantation model in rats. Transplant. Proc. 39 (1), 278 (2007).
