Summary

Sıçanlarda Ortotopik Küçük Bağırsak Nakli

Published: November 06, 2012
doi:

Summary

İnce bağırsak transplantasyonu irreversibl bağırsak yetmezliği olan hastalar için kabul edilen bir tedavi seçeneği haline gelmiştir. Sıçanlarda ortotopik ince barsak nakli Bizim deneysel model intestinal transplantasyon komplike yatan immünolojik ve inflamatuvar süreçleri ele güvenilir bir aracı olarak hizmet vermektedir.

Abstract

İnce bağırsak transplantasyonu parenteral beslenme kısa bağırsak sendromu ve yetmezliği (geri dönüşümsüz intestinal yetmezlik) olan hastalar için kabul edilen bir klinik seçenek haline gelmiştir. Özelleşmiş merkezlerde ameliyat iyileşme ve yaşam 1,3 yüksek kalite sunarken yönetme stratejileri mükemmel kısa ve orta vadeli hasta ve greft sağkalım sağlamıştır. Diğer katı organların daha yaygın nakli aksine (örneğin kalp, karaciğer) intestinal transplantasyon ile indüklenen greft fonksiyonu ve immünolojik değişiklikler birçok yatan mekanizmaları tamamen bilinen 6,7 değildir. Rejeksiyon, sepsis ve kronik greft yetmezliği Episodes hala az avantajlı uzun dönem sonuçlarında katkıda bulunan ve potansiyel olarak böyle bir nakli yararlanacak evde parenteral beslenme hasta giderek artan sayısına rağmen prosedür daha yaygın istihdam önündeki temel engellerdir. Ince bağırsak içeriryolcu lökositlerin çok sayıda genellikle ilişkili lenfoid bağırsak sistemi (GALT) bağırsak greft yüksek immünojenitenin nedeni bu parçası olmak parçası olarak anılacaktır. Greft mukozal bütünlüğü (rejeksiyon örneğin) tehlikeye kez varlığı ve bağırsak birçok kommensal ve patojenlerin yakınlığı sepsis ataklarının şiddeti açıklar. Güvenli ve uygun hayvan modellerinde elde daha fazla bağırsak-ya da çoklu organ transplantasyon veri alanında ilerleme için gereklidir. Modeli Burada bir kez standart bir şekilde kurulan güvenilirlik ve fizibilite hem birleştirir ve bağırsak nakli ile tetiklenen yatan kompleks moleküler, hücresel ve fonksiyonel mekanizmaları hakkında değerli bilgiler verebilir sağladı. Biz başarıyla Laboratuvarımızda 8-11 fazla 5 yıldır kullanılan ve tarif prosedür rafine var. Jüpiter Video tabanlı biçimde kompleks prosedürü göstermek için özellikle yararlıdırDure ve bağırsak nakli araştıran ortotopik kemirgen modeli kurmak için planlama grupları için ilk tuzaklardan kaçınmak.

Protocol

1. Donör Operasyonu Donör sıçan 24 saat (su / glukoz solüsyonu ücretsiz erişim) için oruç tutulmalıdır. İzofluran inhalasyon anestezi uygulamak için, standart atomizer üzerinde% 2 ile başlamak ve daha sonra laparotomi gerçekleştirdikten sonra% 1 azaltır. Sedasyon kontrol etmek için bir ayak tutam gerçekleştirin. Karın Tıraş ve cilt hazırlık 3 kez (Kodan) ile temizleyin. Sonra analjezik subkutan uygulamadan sonra median insizyon gerçekleştirin. Greft tu…

Representative Results

Normal postoperatif seyir Nakledilen hayvanların yaklaşık 1 saat için bir ısı lambası altında prosedürü hızla kurtarmak gerekir. Hipotermi postoperatif mortalitenin önemli bir nedenidir ve dikkatle intra-ve postoperatif kaçınılmalıdır. İntraoperatif sıvı kayıpları 2.5 ml serum fizyolojik sc enjeksiyonu artı 2.5 ml Glukoz% 5, ilk 24 saat için her 8 saatte tarafından değiştirilmesi gerekir. Sıçanlarda da postoperatif ilk 24 saat glukoz solüsyonu (veya jel diyet) ve s…

Discussion

Sıçanlarda intestinal transplantasyon modelleri 1970'lerde 5 gibi erken olarak tarif edilmiş olsa da son zamanlarda kullanılan modellerin en farklı teknikler kullanılarak 13 heterotopik bağırsak nakli içerir. Genel olarak heterotopik işlemleri daha kolay mikrocerrahi teknikleri ve değerlendirme için greft kolay erişilebilirlik avantajı varken, heterotopik intestinal transplantasyon hesaba nakledilen ince barsağın birden etkileşimleri ve kontraktil aktivitesi gibi fonksiyonel y?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments (optional)
University of Wisconsin (UW) solution (ViaSpan) Bristol-Myers Squibb
Uro-Nebacetin N solution Nycomed 6967855
Ampicillin Ratiopharm
Carprofen (Rimadyl) Pfizer
Prolene 10-0 unresorbable suture Ethicon
Monocryl 6-0 resorbable suture Ethicon
Vicryl 3-0 resorbable suture Ethicon
i.v. Catheter G 20 1.1×33 mm Braun
i.v. Catheter G 22 0.9×25 mm Braun
Kodan Skin Prep Schülke
NaCl 0.9% Infusion solution Braun
Curved forceps small FineScienceTools 11009-13
Micro forceps curved AESCULAP BD 333
Micro forceps curved AESCULAP FD281R
Micro forceps straight 1 WPI 5
Micro forceps straight 2 WPI 2
Micro needle holder WPI 14081
Micro scissors FineScienceTools 15006-09
Micro scalpel MANI Ophthalmic knife
Micro clamps AESCULAP FB329R

References

  1. Abu-Elmagd, K. M., et al. Five Hundred Intestinal and Multivisceral Transplantations at a Single Center: Major Advances With New Challenges. Ann. Surg. 250 (4), 567-56 (2009).
  2. Berney, T., et al. Portal versus systemic drainage of small bowel allografts: comparative assessment of survival, function, rejection, and bacterial translocation. J. Am. Coll. Surg. 195 (6), 804 (2002).
  3. Fishbein, T. M. Intestinal transplantation. N. Engl. J. Med. 361 (10), 998 (2009).
  4. Hernandez, F., et al. Is portal venous outflow better than systemic venous outflow in small bowel transplantation? Experimental study in syngeneic rats. J. Pediatr. Surg. 40 (2), 336 (2005).
  5. Monchik, G. J., Russell, P. S. Transplantation of small bowel in the rat: technical and immunological considerations. Surgery. 70 (5), 693 (1971).
  6. Murase, N., et al. Graft-versus-host disease after brown Norway-to-Lewis and Lewis-to-Brown Norway rat intestinal transplantation under FK506. Transplantation. 55 (1), 1 (1993).
  7. Murase, N., et al. Immunomodulation of intestinal transplant with allograft irradiation and simultaneous donor bone marrow infusion. Transplant Proc. 31 (1-2), 565 (1999).
  8. Pech, T., et al. Perioperative infliximab application ameliorates acute rejection associated inflammation after intestinal transplantation. Am. J. Transplant. 10 (11), 2431 (2010).
  9. Schaefer, N., et al. Resident macrophages are involved in intestinal transplantation-associated inflammation and motoric dysfunction of the graft muscularis. Am J Transplant. 7 (5), 1062 (2007).
  10. Schaefer, N., et al. Mechanism and impact of organ harvesting and ischemia-reperfusion injury within the graft muscularis in rat small bowel transplantation. Transplant. Proc. 38 (6), 1821 (2006).
  11. Schaefer, N., et al. Acute rejection and the muscularis propria after intestinal transplantation: the alloresponse, inflammation, and smooth muscle function. Transplantation. 85 (10), 1465 (2008).
  12. Xue, L., et al. Surgical experience of refined 3-cuff technique for orthotopic small-bowel transplantation in rat: a report of 270 cases. Am. J. Surg. 198 (1), 110 (2009).
  13. Zhang, X. Q., et al. Simplified techniques in rat heterotopic small bowel transplantation. Transplant. Proc. 38 (6), 1840 (2006).
  14. Zhao, Y., et al. The establishment of a new en bloc combined liver-small bowel transplantation model in rats. Transplant. Proc. 39 (1), 278 (2007).
check_url/4102?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Kitamura, K., von Websky, M. W., Ohsawa, I., Jaffari, A., Pech, T. C., Vilz, T., Wehner, S., Uemoto, S., Kalff, J. C., Schaefer, N. Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats. J. Vis. Exp. (69), e4102, doi:10.3791/4102 (2012).

View Video