El trasplante ortotópico de intestino delgado en ratas

Summary

Trasplante de intestino delgado se ha convertido en una opción terapéutica en los pacientes con fallo intestinal irreversible. Nuestro modelo experimental de trasplante ortotópico del intestino delgado en ratas sirve como una herramienta fiable para abordar inmunológica subyacente y los procesos inflamatorios que complicar el trasplante intestinal.

Abstract

Trasplante de intestino delgado se ha convertido en una opción aceptada clínica de los pacientes con síndrome de intestino corto y la falta de nutrición parenteral (fallo intestinal irreversible). En los centros especializados mejorado la gestión operativa y estrategias han llevado a excelente a corto y medio plazo paciente y la supervivencia del injerto al tiempo que proporciona alta calidad de vida ^1,3. A diferencia del trasplante más común de otros órganos sólidos (corazón, es decir, hígado) muchos mecanismos subyacentes de la función del injerto y las alteraciones inmunológicas inducidas por el trasplante intestinal no son del todo conocidos ^6,7. Los episodios de rechazo agudo, sepsis e insuficiencia crónica del injerto son los principales obstáculos aún menos favorable que contribuyen al resultado a largo plazo y dificultando un empleo más generalizado del procedimiento a pesar de un número creciente de pacientes con nutrición parenteral domiciliaria que potencialmente se beneficiarían de un trasplante. El intestino delgado contieneun gran número de leucocitos pasajeros comúnmente como parte del sistema linfoide asociado a intestino (GALT) esta siendo parte de la razón de la alta immunogenity del injerto intestinal. La presencia y la proximidad de muchos comensales y patógenos en el intestino explica la gravedad de los episodios de sepsis una vez integridad de la mucosa del injerto se ve comprometida (por ejemplo, rechazo). Para avanzar en el campo de datos intestinales y trasplante multiorgánico más generados a partir de modelos animales fiables y factibles que se necesita. El modelo que aquí combina la fiabilidad y viabilidad una vez establecido de una manera estandarizada y pueden proporcionar información valiosa en los subyacentes complejos mecanismos moleculares, celulares y funcionales que se activan mediante el trasplante intestinal. Hemos utilizado con éxito y perfeccionado el procedimiento descrito a lo largo de más de 5 años en nuestro laboratorio ^8-11. El JoVE basado en video formato es especialmente útil para demostrar el procedimiento complejoDuré y evitar los errores iniciales de los grupos de planificación para establecer un modelo de roedor ortotópico investigando el trasplante intestinal.

Protocol

1. Donante de Operación La rata donante debe mantenerse en ayunas durante 24 horas (acceso libre a una solución de agua / glucosa). Para inducir la anestesia por inhalación isoflurano, comience con un 2% en atomizador estándar, y luego reducir a 1% después de realizar una laparotomía. Realice una pizca dedo para comprobar la sedación. Afeitar el abdomen y limpiar con preparación de la piel 3 veces (Kodan). A continuación, realizar una incisión media después de la administración…

Representative Results

Curso postoperatorio normal Los animales trasplantados deben recuperarse rápidamente del procedimiento bajo una lámpara de calor durante aproximadamente 1 hora. La hipotermia es una causa importante de mortalidad postoperatoria y debe evitarse cuidadosamente intra-y postoperatorio. Pérdidas intraoperatorias de fluido debe ser sustituido por inyección subcutánea de 2,5 ml de solución salina normal más 2,5 ml de glucosa al 5% cada 8 horas durante las primeras 24 h. Las ratas también deben…

Discussion

Mientras que los modelos de trasplante intestinal en ratas se han descrito ya en el 1970ies ⁵ la mayoría de los modelos recientemente empleadas implican trasplante heterotópico intestinal utilizando diferentes técnicas ^13. Si bien los procedimientos heterotópico en general, tienen la ventaja de las técnicas de microcirugía más y más fácil accesibilidad del injerto para la evaluación, el trasplante heterotópico intestinal tiene la gran desventaja de no tener en cuenta las múltiples inter…

Materials

Name of the reagent	Company	Catalogue number	Comments (optional)
University of Wisconsin (UW) solution (ViaSpan)	Bristol-Myers Squibb
Uro-Nebacetin N solution	Nycomed	6967855
Ampicillin	Ratiopharm
Carprofen (Rimadyl)	Pfizer
Prolene 10-0 unresorbable suture	Ethicon
Monocryl 6-0 resorbable suture	Ethicon
Vicryl 3-0 resorbable suture	Ethicon
i.v. Catheter G 20 1.1×33 mm	Braun
i.v. Catheter G 22 0.9×25 mm	Braun
Kodan Skin Prep	Schülke
NaCl 0.9% Infusion solution	Braun
Curved forceps small	FineScienceTools	11009-13
Micro forceps curved	AESCULAP	BD 333
Micro forceps curved	AESCULAP	FD281R
Micro forceps straight 1	WPI	5
Micro forceps straight 2	WPI	2
Micro needle holder	WPI	14081
Micro scissors	FineScienceTools	15006-09
Micro scalpel	MANI	Ophthalmic knife
Micro clamps	AESCULAP	FB329R