Summary

Ортотопическая малого трансплантации кишечника у крыс

Published: November 06, 2012
doi:

Summary

Малый трансплантации кишечника стало общепринятым вариантом лечения для пациентов с необратимыми кишечной недостаточности. Наши экспериментальные модели ортотопической небольшой трансплантации кишечника у крыс служит надежным инструментом для решения основных иммунологических и воспалительных процессов, которые усложняют кишечного трансплантации.

Abstract

Малый трансплантации кишечника стало общепринятым клиническим вариантом для пациентов с синдромом короткой кишки и недостаточности парентерального питания (необратимое кишечной недостаточности). В специализированных центрах улучшить оперативное управление и стратегии привели к отличным кратко-и среднесрочной пациентов и выживаемость трансплантата, обеспечивая при этом высокое качество жизни 1,3. В отличие от более распространенных трансплантации других солидных органов (например, сердца, печени), многие основные механизмы функция трансплантата и иммунологические изменения индуцированные кишечные трансплантации не совсем известно 6,7. Случаи острого отторжения, сепсис и хронической сердечной недостаточности трансплантата являются основными препятствиями по-прежнему способствует менее благоприятных долгосрочных результатов и препятствует более широкому занятости процедуру, несмотря на растущее число пациентов на дому парентерального питания тех, кто может извлечь выгоду из такой пересадки. В тонком кишечнике содержитсяБольшое количество пассажирских лейкоцитов обычно упоминается как часть кишечника лимфоидной системы (GALT) это является частью причиной высокой иммуногенности кишечного трансплантата. Наличие и близость многих комменсалы и патогенных микроорганизмов в кишечнике объясняется тяжести сепсиса эпизоды раз трансплантата слизистой целостность находится под угрозой (например, путем отказа). Для продвижения области кишечные и полиорганной трансплантации больше данных, полученных из надежных и возможные модели на животных необходимы. Модель предоставлена ​​здесь сочетает в себе надежность и технико-экономическое когда она будет создана в стандартной форме и могут предоставить ценную информацию в базовой сложные молекулярные, клеточные и функциональные механизмы, которые вызваны кишечной трансплантации. Мы успешно использовали и уточнена процедура описана более чем на 5 лет в нашей лаборатории 8-11. Юпитер видео-формат особенно полезен для демонстрации комплексных процедурДюре и избежать ловушек для начальной группы планируют создать ортотопической грызунов исследования кишечного трансплантации.

Protocol

1. Донор операции Донор крысы должны быть поста в течение 24 ч (свободный доступ к воде / растворе глюкозы). Для индукции анестезии Isoflurane ингаляции, начните с 2% на стандартные форсунки, а затем уменьшить до 1% после выполнения лапаротомии. Выполните ноги щепотку, чтобы проверить ?…

Representative Results

Нормальное течение послеоперационного периода Пересаженных животные должны быстро восстановиться от процедуры, предусмотренной тепла лампы в течение примерно 1 часа. Гипотермия является одной из основных причин послеоперационной летальности и должны быть тщательно и?…

Discussion

В то время как кишечная модели трансплантации у крыс были описаны еще в 1970-е годы 5 наиболее недавно занятых модели включают гетеротопической кишечного трансплантации с использованием различных методов 13. В то время как гетеротопической процедур в целом имеют то преимущес?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments (optional)
University of Wisconsin (UW) solution (ViaSpan) Bristol-Myers Squibb
Uro-Nebacetin N solution Nycomed 6967855
Ampicillin Ratiopharm
Carprofen (Rimadyl) Pfizer
Prolene 10-0 unresorbable suture Ethicon
Monocryl 6-0 resorbable suture Ethicon
Vicryl 3-0 resorbable suture Ethicon
i.v. Catheter G 20 1.1×33 mm Braun
i.v. Catheter G 22 0.9×25 mm Braun
Kodan Skin Prep Schülke
NaCl 0.9% Infusion solution Braun
Curved forceps small FineScienceTools 11009-13
Micro forceps curved AESCULAP BD 333
Micro forceps curved AESCULAP FD281R
Micro forceps straight 1 WPI 5
Micro forceps straight 2 WPI 2
Micro needle holder WPI 14081
Micro scissors FineScienceTools 15006-09
Micro scalpel MANI Ophthalmic knife
Micro clamps AESCULAP FB329R

References

  1. Abu-Elmagd, K. M., et al. Five Hundred Intestinal and Multivisceral Transplantations at a Single Center: Major Advances With New Challenges. Ann. Surg. 250 (4), 567-56 (2009).
  2. Berney, T., et al. Portal versus systemic drainage of small bowel allografts: comparative assessment of survival, function, rejection, and bacterial translocation. J. Am. Coll. Surg. 195 (6), 804 (2002).
  3. Fishbein, T. M. Intestinal transplantation. N. Engl. J. Med. 361 (10), 998 (2009).
  4. Hernandez, F., et al. Is portal venous outflow better than systemic venous outflow in small bowel transplantation? Experimental study in syngeneic rats. J. Pediatr. Surg. 40 (2), 336 (2005).
  5. Monchik, G. J., Russell, P. S. Transplantation of small bowel in the rat: technical and immunological considerations. Surgery. 70 (5), 693 (1971).
  6. Murase, N., et al. Graft-versus-host disease after brown Norway-to-Lewis and Lewis-to-Brown Norway rat intestinal transplantation under FK506. Transplantation. 55 (1), 1 (1993).
  7. Murase, N., et al. Immunomodulation of intestinal transplant with allograft irradiation and simultaneous donor bone marrow infusion. Transplant Proc. 31 (1-2), 565 (1999).
  8. Pech, T., et al. Perioperative infliximab application ameliorates acute rejection associated inflammation after intestinal transplantation. Am. J. Transplant. 10 (11), 2431 (2010).
  9. Schaefer, N., et al. Resident macrophages are involved in intestinal transplantation-associated inflammation and motoric dysfunction of the graft muscularis. Am J Transplant. 7 (5), 1062 (2007).
  10. Schaefer, N., et al. Mechanism and impact of organ harvesting and ischemia-reperfusion injury within the graft muscularis in rat small bowel transplantation. Transplant. Proc. 38 (6), 1821 (2006).
  11. Schaefer, N., et al. Acute rejection and the muscularis propria after intestinal transplantation: the alloresponse, inflammation, and smooth muscle function. Transplantation. 85 (10), 1465 (2008).
  12. Xue, L., et al. Surgical experience of refined 3-cuff technique for orthotopic small-bowel transplantation in rat: a report of 270 cases. Am. J. Surg. 198 (1), 110 (2009).
  13. Zhang, X. Q., et al. Simplified techniques in rat heterotopic small bowel transplantation. Transplant. Proc. 38 (6), 1840 (2006).
  14. Zhao, Y., et al. The establishment of a new en bloc combined liver-small bowel transplantation model in rats. Transplant. Proc. 39 (1), 278 (2007).
check_url/4102?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Kitamura, K., von Websky, M. W., Ohsawa, I., Jaffari, A., Pech, T. C., Vilz, T., Wehner, S., Uemoto, S., Kalff, J. C., Schaefer, N. Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats. J. Vis. Exp. (69), e4102, doi:10.3791/4102 (2012).

View Video