Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Farelerde Yüz Sinir Aksotomi: Sakatlık Motonöron Yanıtı Eğitim için Bir Model

13.3K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/52382

⸱

23 Şubat 2015

 ,  ,  ,  ,  , 

Bu makalede

Özet

Farede fasiyal sinir üzerinde bir kesi veya ezme aksotomisinin nasıl yapılacağını detaylandıran bir cerrahi protokol sunuyoruz. Fasiyal sinir aksotomisi, sinir yaralanmasına fizyolojik yanıtı incelemek ve terapötik teknikleri test etmek için kullanılabilir.

Özet

Bu cerrahi protokolün amacı Stylomastoid foramende onun çıkışında yüz kasları innerve yüz siniri, ortaya çıkarmak ve ya kesme veya periferik sinir hasarı neden onu ezmek için. Bu ameliyatın avantajları böylece diğer sinir yaralanması modellere kıyasla nispeten hafif cerrahi sonuç sonuçlanan sadeliği, yüksek tekrarlanabilirlik ve sonraki yüz felci hayati fonksiyonları veya hareketlilik üzerindeki etkisinin olmamasıdır. Kranial sinir yaralanması modelini kullanarak önemli bir avantajı motor nöronlar motor nöron hücre gövdeleri çalışma basitleştirilmesi, pons yüz motorlu çekirdeğinde nispeten homojen nüfus ikamet olduğunu. Çünkü yüz sinir innervasyon simetrik yapısı ve yüz motorlu çekirdekleri arasındaki karışma eksikliği, çalışma unaxotomized tarafı eşleştirilmiş iç kontrol olarak hizmet veren tek taraflı yapılabilir. Analiz çeşitli eşek postoperatif yapılabilirBu makalenin kapsamı dışındadır ayrıntıları fizyolojik tepki, s. Örneğin, kas fonksiyonunun geri kazanılması; innervasyonun bir davranış markör olarak görev yapabilir veya motor nöronlar hücre yaşamını ölçmek için sayısal olarak belirlenebilir. Ayrıca, motor nöronlar doğru moleküler analiz için lazer mikrodiseksiyon kullanılarak yakalanabilir. Yüz siniri axotomy minimal invaziv ve iyi tolere edilir, çünkü bu genetik olarak tadil edilmiş farelerin çok çeşitli kullanılabilir. Ayrıca, bu ameliyat modeli periferik sinir yaralanması tedavilerinin etkinliğini analiz etmek için kullanılabilir. Yüz sinir hasarı sadece motor nöronlar araştırılması için bir araç sağlar, ancak merkezi ve çevresel glial mikro-bağışıklık sistemi ve hedef kas da yanıtlar. fasial sinir hasarı modeli sinir hasarı ve yenilenme eğitim için güçlü bir araç olarak hizmet yaygın olarak kabul gören periferik sinir yaralanması modelidir.

Giriş

Birçok periferik sinir yaralanması modelleri var, ama motor nöronlar çalışma için göze çarpan bir fasiyal sinir aksotomi modelidir. Ayrıca kranial sinir VII olarak bilinen fasial sinir, pons kaynaklanır ve yüz ifadesi 1,2 kasları innerve eder. Bu cerrahi protokolde, fasial sinir Stylomastoid foramende onun çıkışında maruz kalan ve kesilmiş veya ezilmiş ya edilir. Sinir hasarı şiddeti sırayla akson demetleri etrafına sarın bağ dokusu katmanları olan aksonlar, endoneurium, perinörium ve epinörium devamlılığı dayalı yaralanma ayıran Sunderland 3 sınıflandırmaları, aşağıdaki sınıflandırılabilir. Ezilme yaralanması (aksonotmezis) olarak, aksonlar kop....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Idam tüm işlemler Tıp Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi Indiana Üniversitesi tarafından onaylanmış ve Sağlık kılavuzların Ulusal Enstitüsü takip edilmektedir.

1. Cerrahi Tekniği

  1. Steril eldiven, aletler ve NIH kurallarına 25 göre steril cerrahi alanını kullanarak bu işlem sırasında aseptik teknik koruyun. Onları otoklav ile ameliyat başlamadan önce araçları sterilize (tam liste için özel Reaktifler / Ekipman Tablo). Operasyon sırasında araçları sterilize etmek için bir cam boncuk sterilizatör kullanın.

2. Anestezi ve Hazırlık

  1. Bir veteriner izofl....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Fasial sinir aksotomi gerçekleştirildikten sonra, motor nöron kaybı yaralanma sonucu ortaya çıkar. Yaralanma sonrası motonöron sağkalım gibi hem motonöron sağkalım verileri özetlemek cinsiyet, ameliyat sırasında hayvan yaş ve motonöron sayımları yapılır hangi timepoint ve Moran ve Graeber'in inceleme 24 ve Jinno ve Yamada inceleme 22 gibi birçok değişkene bağlıdır. Tipik olarak, motor nöronlar yaklaşık% 86 sonrası aksotomi 14,15,26 28 gün hayatta. Motonöron kaybı kinetiği Serpe d.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Bu protokol için kritik adım, ameliyat başlamadan önce fareyi uygun şekilde konumlandırmaktır. Fare yan yatmıyorsa, kulak doğru açıyla bantlanmamışsa veya kesi yanlış bir yerde yapılmışsa, fasiyal siniri bulmak çok daha zor hale gelir. Bu tekniğe hakim olunduğunda ameliyatlar fare başına yalnızca birkaç dakika sürecektir.

Yarayı kapatmak için dikişler, yapıştırıcı veya yara klipsleri kullanılabilir. Yara klipsleri, kesi boyutunun küçük olması ve uygulanabilme hızı nedeniyle tercih edilmektedi.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Teşekkürler

Bu çalışma NIH RO1 NS 40433 (K.J.J.) tarafından finanse edilmektedir.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Stereo mikroskopLeicaM60
Etiketleme bandıFisher Scientific15-952
Vannas-Tü Bingen Yaylı Makas - Düz/Keskin/8,5 cm/5 mm Kesici KenarGüzel Bilim Araçları15003-08Kullanmadan önce sterilize edin
Dumont #5/45 forseps - standart uçlar/açılı 45&derece;/Dumoxel/11 cmGüzel Bilim Aletleri11251-35Kullanmadan önce sterilize edin
Michel dikiş klipsleri - 7,5 mm x 1,75 mmGüzel Bilim Araçları12040-01Protokolde "yara klipsi" olarak tanımlanan, kullanmadan önce sterilize edin
Hagenbarth çapraz etkili yara klipsi uygulayıcısı 5 "George Tiemann & Co160-910Yara klipsi uygulamak için kullanılır, kullanmadan önce sterilize edin
Michel sütür klipsi aplikatörü ve sökücü - 7,5 mm klipsler içinİnce Bilim Araçları12029-12Yara klipsini çıkarmak için kullanılır
%0,9 Sodyum klorür enjeksiyonu, USPHospira0409-4888-10
Betadine, 16 oz, dağıtıcılıFisher Scientific19-027132
%70 Etanol
Cam boncuk sterilizatörü

Kaynaklar

  1. Kaufman, M., Bard, J. The Anatomical Basis of Mouse Development. , Elsevier. New York, NY. (1999).
  2. Ashwell, K. The adult mouse facial nerve nucleus: morphology and musculotopic organization. Journal of Anatomy. 135, 531-538 (1982).
  3. Sunderland, S.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Periferik Sinir YaralanmasıFasiyal Motor NukleusLazer MikrodissectionKantitatif PCRGen Ekspresyon AnaliziCerrahi ProtokolFare ModeliSinir Rejenerasyonu