Wiedereinführung der Drug-seeking bei Mäusen mit dem klimatisierten Ort Präferenz Paradigma

Summary

Dieses Protokoll beschreibt bedingt Platz Präferenz (CPP) als Modell für einen Rückfall. Dieses Verfahren ermöglicht die Messung von Rückfällen bei Versuchstieren, unter Berücksichtigung der Auswirkungen der Droge verbundenen ökologischen Cues als Begierde und Rückfall in Verzicht Süchtige steht derzeit im Mittelpunkt der Drogenmissbrauch Behandlungsprogramme.

Abstract

Dieses Protokoll beschreibt bedingt Platz Präferenz (CPP) als Modell für einen Rückfall in die Drogensucht. In diesem Modell Tiere sind zunächst darauf trainiert, klimatisierten Ort bevorzugt in einem Medikament gepaart Fach erwerben und nach dem Post-Klimaanlage-Test führen sie mehrere Sitzungen, um die etablierten Präferenz zu löschen. Die CPP erlaubt die Auswertung der konditionierten lohnende Effekte von Drogen im Zusammenhang mit ökologischen Cues. Dann kann erloschene CPP robust durch die nicht-Kontingent-Verwaltung einer Grundierung Dosis des Medikaments, und durch die Einwirkung von belastenden Reize wieder eingesetzt werden. Beide Methoden werden hier erklärt. Wenn das Tier die Verhaltensreaktion reinitiates, gilt eine Wiedereinsetzung der konditionierten Belohnung stattgefunden haben.

Die wichtigsten Vorteile dieses Protokolls sind, dass es nicht-invasive, kostengünstig und einfach mit guten Validitätskriterien ist. Darüber hinaus ermöglicht es das Studium der verschiedenen ökologischen Manipulationen, wie Stress oder Ernährung, die Rückfall in Drogen sucht Verhalten modulieren kann. Eine Einschränkung ist jedoch, dass wenn der Forscher die Motivation und primäre verstärkende Wirkung des Medikaments zu erkunden soll, mit Selbstverwaltung Verfahren ergänzt werden sollte, da sie operante Reaktionen der Tiere beteiligen.

Introduction

Das Paradigma konditioniert Ort Präferenz (CPP) bietet eine einfache Möglichkeit zur Beurteilung des konditionierten Lohn induziert durch vielfältige Reize^1,2, und wurde weitgehend verwendet, um die konditionierten lohnende Suchtgifte^{3 untersuchen} . Es basiert auf Pawlowsche Konditionierung, Auswertung der motivationalen Wertes von Medikament verbundenen ökologischen Cues für die Aufrechterhaltung der Suchtverhalten⁴. In diesem Modell ökologische Hinweise sekundäre begehrliche Eigenschaften (konditionierte lohnende Effekte) zu erwerben, wenn gepaart mit einem primären Verstärker³. Beispielsweise ein zunächst neutraler Ort (z. B. die Farbe von einem Abteil in der CPP-Käfig) paart sich mit speziellen Wirkungen eines Medikaments von Missbrauch während einiger Sitzungen⁵, Klimaanlage, während ein weiteres Fach mit der Injektion eines Fahrzeugs verbunden ist. Klimaanlage, wenn das Tier mehr Zeit in das Fach, die zuvor mit dem Medikament verbundenen verbringt folgend wird davon ausgegangen, dass CPP³entwickelt hat. Die Einrichtung der Präferenz ist erreicht, wenn das Tier die Umwelt Cues, verbunden mit der Droge, die die primäre Verstärker ist einen positiven Wert verleiht. Infolgedessen werden Tiere Droge-suchenden Verhaltensreaktionen in Reaktion auf diese kontextuellen Signale⁶durchführen. Die CPP-Modell ermöglicht die Auswertung der lohnendsten Eigenschaften der Eingangssignale Dosen des Medikaments, die anzeigt, ob Tiere in einem bestimmten Zustand (z. B.zuvor von sozialen Niederlage erlitt) sind anfällig und empfindlich auf Dosen, die können nicht wirksam bei der naiven Tiere⁷.

CPP-Modell hat auch zur Auslöschung/Wiedereinsetzung als Tiermodell Rückfall³, zu studieren, das ist das Ziel dieses Protokolls zu bewerten. Es gibt drei verschiedene Phasen: Erwerb, vom Aussterben bedroht und Wiedereinstellung (Abbildung 1). In der CPP Wiedereinstellung Modell Tiere erwerben zunächst die CPP für ein Medikament gepaart, und dann führen sie mehrere vom Aussterben bedroht-Sitzungen. Wir definieren vom Aussterben bedroht, wie der Moment, in dem das Tier reduziert seine Verhaltensreaktionen der Annäherung an eine konditionierte lohnende Stimulus, der wurde (z. B.das Medikament entfernt)⁸. Während der Sitzungen vom Aussterben bedroht erkunden Tiere die Fächer in der Abwesenheit des Medikaments, so dass die erworbenen Präferenz allmählich abgeschwächte⁹ist. Ein wichtiges Thema zu berücksichtigen ist, dass die Verhaltensänderungen, die das Tier während vom Aussterben bedroht (die fortschreitende Abnahme in den Zeitaufwand in der Droge gepaart Fach) zeigt durch neue Lernprozesse sein kann, die mit der vorherigen erlernte Reaktion konkurrieren, oder zu einem Rückgang der interne motivationale Zustand des Thema³fällig. Schließlich wäre die Wiederherstellung der Ort-Voreinstellung durch den Kontext oder Medikament Hinweise unseres Modells der Wiedereinstellung¹.

Verwaltung eine Grundierung Injektion des Medikaments verbunden kann die Präferenz, wiedereinsetzen, die eine Wiederherstellung der Annäherung an die kontextuellen Signale gilt. Medikament Priming Wiedereinstellung erfolgt durch die anhaltende Erinnerung an die angenehmen Effekte der Droge, die induzierte Begierde und motiviert Tiere, die Umwelt Cues im Zusammenhang mit Belohnung zu suchen.

Einige Vorteile des CPP Wiedereinstellung Modells sind, dass das Verfahren ist nicht-invasiv (im Gegensatz zu Selbstverwaltung, die Operation erfordert), kostengünstig und einfach. Darüber hinaus hat dieses Modell eine gutes Kriterium Gültigkeit, wie es gut imitiert, was tritt bei Menschen^10,11, induzierende Wiedereinstellung mit reizen, die Rückfall, wie Re-Exposition gegenüber der Droge^12,13 auslösen oder betonen Sie¹⁴.

Es gibt andere Techniken wie das Aussterben – Wiedereinsetzung Modell der intravenöse Selbstverwaltung. Hier drücken Sie Tiere einen Hebel, um das Medikament selbst verabreichen, das die Bewertung der operanten Reaktion des Tieres, Compulsivity und Motivation^14,15,16erlaubt. Der größte Vorteil der KPP über Selbstverwaltung Verfahren ist, dass CPP Wiedereinsetzung gilt entsprechend die Reaktivierung der Anreiz-motivierende Wert der Kontext Stimuli gepaart mit der Droge, bestehend aus dem Wiedererscheinen des Ansatzes Verhalten, die Kontext-¹⁷. Darüber hinaus können nicht-medikamentöse Reize wie Stress, auch Wiedereinstellung^18,19induzieren. Zum Beispiel beschrieben eine Selbstverwaltung Studie keine Auswirkungen auf die Wiedereinführung der Heroin-Aufnahme bei Ratten nach einem Fuß Schock oder Zurückhaltung betonen²⁰. Autoren diskutiert, dass es nicht erfolgreich war, weil diese Stressoren außerhalb der Selbstverwaltung Kammer in einem anderen Zusammenhang getestet wurden. Im Gegensatz dazu Wenn Sie die CPP-Modell der Wiedereinstellung zu verwenden, gab es eine klare Wiedereinsetzung in den vorigen Morphin-induzierte CPP nach der Verwendung der gleichen Stressoren und in einem anderen Kontext auf, der KPP und zu unterschiedlichen Zeiten angewendet (0 und 15 min nach stress Exposition)¹⁸ .

Mehrere Studien in der Literatur haben verschiedene Arten von Drogen- und Stress-induzierte Wiedereinstellung gezeigt. Auf der einen Seite wurde bei Ratten und Mäusen mit Morphin^5,21,22,23, Kokain^24,25, Amphetamin^{26Medikamenten-induzierten Wiedereinstellung berichtet, 27}, Ethanol^28,29und 3,4-Methylendioxymethamphetamin (MDMA)³⁰. Auf der anderen Seite möglicherweise Exposition gegenüber betonen ein entscheidender Faktor bei Anfälligkeit für Drogenmissbrauch. Stress ist bekanntermaßen die lohnenden Effekte von Drogen^7,31,32 zu erhöhen und ihre Rolle in der Rückfall ist gut etablierte^33,34. Niederlage in sozialen Interaktionen mit ein Artgenosse werden z. B. Morphium und Kokain CPP^18,19wiederhergestellt. Darüber hinaus Tieren wiederholt soziale Niederlage sind anfälliger für die konditionierten lohnende Effekte der Eingangssignale Dosen von Kokain, und die Präferenz mit sehr niedrigen Dosen von Kokain⁷wieder.

Anwendung des Modells CPP Wiedereinstellung ist eine nützliche und sensible Art, Anfälligkeit für Rückfälle bei Tieren zu bewerten, und ermöglicht die Bewertung der verschiedenen feinstofflichen Umwelt Manipulationen, die Hauptauslöser sind, die menschliche Rückfall, wie z. B. bedrohen Drogen oder Stress-induzierte Wiedereinstellung.

Protocol

Alle Verfahren, die Mäuse und deren Pflege erfüllt mit nationalen, regionalen und lokalen Gesetze und Verordnungen, die gemäß Richtlinie 2010/63/EG des Europäischen Parlaments und des Rates vom 22. September 2010 über den Schutz von Tieren, die für verwendet werden wissenschaftliche Zwecke. Der Einsatz von Tieren und Pflege Ausschuss der Universität Valencia genehmigt dieses Protokolls. (1) Materialien und Set-up für konditionierte Ort Präferenz: 3 Tage vor dem Test für 1 …

Representative Results

Erstens sind repräsentative Ergebnisse aus der Grundierung und Stress-induzierte Wiedereinsetzung in Abbildung 7 dargestellt mit Hilfe von Erwachsenen OF1 männlichen Mäusen. Die Daten in Abbildung 7-b für Zeit verbracht in der Droge gepaart Kompartiments in der Pre- und Post-C Test wurden mit einer Messwiederholung ANOVA mit einer innerhalb der Them…

Discussion

Der entscheidende Punkt der Droge Suchtforschung ist die Entwicklung von Behandlungen, die Begierde zu verringern und folglich reduzieren die Anfälligkeit für Rückfälle. Dank der Wiedereinstellung Modell des CPP Paradigmas ist es möglich, Untersuchung des Einflusses von verschiedenen prozeduralen und Umweltfaktoren, die Rückfall, modulieren die Priorität der zukünftigen Forschung hat. Es gibt einige wichtige Punkte zu beachten, wie das CPP-Paradigma ist ein Test, der sehr empfindlich auf Umwelteinflüsse reagiert…

Materials

MONPRE 2Z software	CIBERTEC S.A., Spain	N/A
Identical Plexiglas boxes with two equal sized compartments separated by a grey central area.	CIBERTEC S.A., Spain	N/A	The compartments have different colored walls (black vs white) and distinct floor textures (fine grid in the black compartment and wide grid in the white one). All boxes are equipped with four infrared light beams in each compartment of the box and six in the central area which allow the recording of the position of the animal and its crossings from one compartment to the other.
Cocaine hydrochloride	Laboratorios Alcaliber S.A., Madrid, Spain	N/A
Animals: mice of the OF1 outbred strain	Charles River, Barcelona Spain	N/A	Male mice who arrive to the laboratory on PND 42 and on PND 60 perform the CPP test. These animals are specially indicated for social defeat and aggression models.
Standard Diet- Teklad Global Diet 2014	Supplied by Harlan Laboratories Models, S. L. (Barcelona, Spain)		13 kcal % fat, 67 kcal % carbohydrates and 20% kcal protein; 2.9 kcal/g
High fat diet TD.06415			45 kcal % fat, 36 kcal % carbohydrates and 19% kcal protein; 4.6 kcal/g