Восстановление поиска наркотиков у мышей с использованием парадигмы предпочтение кондиционером место

Summary

Этот протокол описывает кондиционером место предпочтение (CPP) как модель рецидива. Эта процедура позволяет измерение рецидива в лабораторных животных, учитывая влияние наркотиков связанные экологические сигналы как тяга и рецидивов в воздержавшихся наркоманов в настоящее время в центре внимания программы лечения наркомании.

Abstract

Настоящий Протокол описывает кондиционером место предпочтение (CPP) как модель рецидива наркомании. В этой модели животные сначала обучают приобрести предпочтение кондиционером место в отсеке наркотиков в паре, а после тест после кондиционирования, они выполняют несколько сессий для тушения установившейся предпочтение. НПК позволяет оценки кондиционером награждение воздействия наркотиков связанных с экологическим подсказки. Затем потушен CPP можно надежно восстановлен не контингент администрацией грунтование дозы препарата и под воздействием стрессовых раздражителей. Здесь будут описаны оба метода. Когда животное reinitiates поведенческие реакции, восстановление кондиционером награда считается, имели место.

Основные преимущества этого протокола, что это неинвазивный, недорогой и простой с хорошей обоснованность критериев. Кроме того он позволяет исследование различных экологических манипуляций, как стресс или диета, которая может модулировать рецидива в наркотиков ищет поведения. Однако одно ограничение является, что если исследователь стремится исследовать мотивацию и первичный усиливающие эффект препарата, его следует дополнить самоуправления процедур, как они связаны с оперантной деятельности животных.

Introduction

Парадигма кондиционером место предпочтение (CPP) предлагает простой способ оценки кондиционером вознаграждение, вызванных разнообразные раздражители^1,2и широко использовался для изучения последствий условных награждение привыкание наркотиков³ . Он основан на Pavlovian кондиционирования, оценки мотивационного значение связанных с наркотиками экологические сигналы для поддержания аддиктивного поведения⁴. В этой модели, экологические сигналы приобретают свойства вторичного appetitive (кондиционером награждение эффекты) когда в паре с первичной подкрепление³. Например, изначально нейтральное место (например, цвет одного отсека в клетке CPP) в паре с специфические эффекты наркотиков злоупотреблений во время некоторых принадлежности⁵сеансов, в то время как еще один отсек связан с впрыской транспортного средства. После кондиционирования, если животное тратит больше времени в отсеке, ранее связанные с наркотиками, то предполагается, что CPP разработала³. Создание предпочтение достигается, когда животное дает положительное значение экологические сигналы, связанные с наркотиками, который является основным подкрепление. Следовательно животных будет выполнять поведенческих реакций в поисках наркотиков в ответ на эти контекстные подсказки⁶. CPP модель позволяет оценки полезных свойств подпорогового доз препарата, показаны ли животные в определенного условия (например, пострадав от Социальный поражения ранее) более уязвимой и чувствительной дозы, которые не эффективны в наивной животных⁷.

CPP модель использовалась также для оценки вымирания/восстановление как животной модели для изучения рецидивов³, который является целью настоящего Протокола. Существует три различных этапа: приобретение, исчезновение и восстановление (рис. 1). В модели восстановления CPP животные сначала приобрести CPP для наркотиков в паре отсека, и затем они выполняют несколько сессий вымирания. Мы определяем вымирания, как момент, в которой животное уменьшает его поведенческие реакции приближение к кондиционером полезный стимул, который был удален (например, препарат)⁸. Во время сессий вымирания животные исследовать отсеков в отсутствие препарата, так, что приобретенные предпочтение постепенно аттенуированные⁹. Важным вопросом для рассмотрения является, что поведенческие изменения, что экспонаты животного во время исчезновения (постепенное сокращение времени, затрачиваемого в отсеке наркотиков в паре) может быть из-за новых процессов обучения, которые конкурируют с предыдущих уроках ответ, или к снижению внутреннего состояния мотивационной тема³. Наконец восстановление предпочтение место через контекст или наркотиков подсказки будет наша модель восстановления¹.

Управляющими грунтование инъекции препарата связан можно восстановить предпочтения, который считается восстановление приближения к контекстной подсказки. Наркотиков грунтование восстановление происходит за счет постоянной памяти приятные эффекты препарата, который индуцированная тягу и мотивирует животных искать экологические сигналы, связанные с вознаграждением.

Некоторые преимущества модели восстановления CPP, что процедура неинвазивной (в отличие от самоуправления, которая требует хирургии), недорогой и простой. Кроме того, эта модель имеет хороший критерий действительности, как он имитирует хорошо то, что происходит в людях^10,11, вызывая восстановление с раздражители, которые индуцируют рецидив, таких как ре воздействие наркотиков^12,13 или подчеркнуть¹⁴.

Существуют другие методы, такие как исчезновения – восстановление модель внутривенного введения самоуправления. Здесь животных нажмите рычаг самовведению препарат, который позволяет оценки оперантной реакции животного, compulsivity и мотивации^14,,1516. Главным преимуществом НПК над процедурами самоуправления является, что CPP восстановление считается отразить возобновление стимул мотивационный значение контекста раздражители, в паре с препарат, состоящий из появление подход поведение контекста¹⁷. Кроме того non снадобья раздражителей, таких как стресс, могут также вызвать восстановление^18,19. Например одно исследование самоуправления описал не влияет на восстановление потребления героина в крыс после удара ногой или сдержанность подчеркнуть²⁰. Авторы обсуждали, что было неудачным, потому что эти раздражители были протестированы вне камеры самоуправления в другом контексте. В противоположность этому, при использовании CPP модели восстановления, было ясно Re-establishment морфина индуцированной CPP после использования же раздражители и применяется в другом контексте, CPP и в разное время (0 и 15 мин после воздействия стресс)¹⁸ .

Несколько исследований в литературе показали различные способы наркотиков и стресс индуцированного восстановление. С одной стороны лекарственно индуцированные восстановление было сообщено у крыс и мышей с использованием морфия^5,21,22,23, кокаин^24,25, амфетамин^{26, 27}, этанол^28,29и³⁰3,4-метилендиоксиметамфетамина (МДМА). С другой стороны подвержение к усилию может быть определяющим фактором в подверженности риску злоупотребления наркотиками. Стресс, как известно, увеличение полезных эффектов наркотиков^7,,3132 и их роль в рецидива является хорошо установленным^33,34. Например поражение в социальных взаимодействий с считалась восстанавливает кокаина и морфина CPP^18,19. Кроме того животные подвержены повторил социальный поражения более уязвимы к кондиционером награждение воздействия подпорогового доз кокаина и восстановить предпочтения с очень низких доз кокаина⁷.

Применение модели восстановления CPP является полезным и чувствительным способом оценки уязвимости к рецидиву в животных и разрешает оценки различных тонких экологических манипуляций, которые являются основными триггеры, которые угрожают человека рецидив, такие как наркотиков или стресс индуцированного восстановление.

Protocol

Все процедуры, связанные с мышей и их уход соблюдает национальные, региональные и местные законы и правила, которые соответствуют директиве 2010/63/ЕС Европейского парламента и Совета 22 сентября 2010 г. о защите животных, используемых для научных целей. Использование животных и уход комитет?…

Representative Results

Во-первых представитель результаты из грунтовки и стресс индуцированного восстановление показаны на рисунке 7 с использованием взрослых самцов мышей OF1. Данные в рисунке 7a-b представляющая вре?…

Discussion

Ключевым моментом наркотиков наркомания исследования является разработка методов лечения, которые уменьшают тягу и, следовательно, уменьшить уязвимость к рецидиву. Благодаря модели восстановления CPP парадигмы это возможно для изучения влияния различных процедурных и экологических ?…

Materials

MONPRE 2Z software	CIBERTEC S.A., Spain	N/A
Identical Plexiglas boxes with two equal sized compartments separated by a grey central area.	CIBERTEC S.A., Spain	N/A	The compartments have different colored walls (black vs white) and distinct floor textures (fine grid in the black compartment and wide grid in the white one). All boxes are equipped with four infrared light beams in each compartment of the box and six in the central area which allow the recording of the position of the animal and its crossings from one compartment to the other.
Cocaine hydrochloride	Laboratorios Alcaliber S.A., Madrid, Spain	N/A
Animals: mice of the OF1 outbred strain	Charles River, Barcelona Spain	N/A	Male mice who arrive to the laboratory on PND 42 and on PND 60 perform the CPP test. These animals are specially indicated for social defeat and aggression models.
Standard Diet- Teklad Global Diet 2014	Supplied by Harlan Laboratories Models, S. L. (Barcelona, Spain)		13 kcal % fat, 67 kcal % carbohydrates and 20% kcal protein; 2.9 kcal/g
High fat diet TD.06415			45 kcal % fat, 36 kcal % carbohydrates and 19% kcal protein; 4.6 kcal/g