מורי צוואר הרחם מורנה השתלת מודל באמצעות שינוי שאינו תפר שיטה השרוול
Summary
כאן, אנו מציגים פרוטוקול של הטרוסקסואלים השתלת אבי העורקים בעכברים באמצעות שימוש בטכניקת השרוול שאינו תפר במודל מורטין הצווארי. מודל זה יכול לשמש כדי ללמוד את הפתולוגיה הבסיסית של השתלת האלופתיה כרונית (קו) והוא יכול לעזור להעריך סוכנים רפואיים חדשים כדי למנוע את הקמתה.
Abstract
עם המבוא של פרוטוקולים מדכאים חיסוני חזק, מקדמות נפרדות אפשריות במניעה וטיפול של פרקים דחייה חריפה. עם זאת, רק שיפור מינורי בתוצאות לטווח ארוך של איברים מוצקים מושתלים ניתן לצפות בעשורים האחרונים. בהקשר זה, השתלת האלופתיה כרונית (קו) עדיין מייצגת את הגורם המוביל לכשל איברים מאוחר בניתוחי לב, כליות וריאות.
עד כה, הפתוגנזה הבסיסית של התפתחות ה-קו לא ברור, המסביר מדוע אסטרטגיות הטיפול היעילות חסרות כרגע ומדגישים את הצורך במודלים ניסיוניים רלוונטיים כדי ללמוד את הפתופסיולוגיה הבסיסית המובילה ל . מערך קו הפרוטוקול הבא מתאר מודל הטרוההטרוסקסואלים הצוואר הרחם השתלת המודל באמצעות טכניקת שונה תפר השרוול. בטכניקה זו, קטע של העורקים הבית החזה הוא ממוקם בתוך העורק הראשי הנכון העורק. עם שימוש בטכניקת השרוול שאינו תפר, קל ללמוד ולאפשר מודל ניתן ליצור, למזער את הטרוגניות האפשרי של מיקרו מיקרוסטוסים כלי דם מסושמים.
Introduction
במהלך ששת העשורים האחרונים, השתלת איברים מוצק התפתחה מהליך ניסיוני לתקן של טיפול לטיפול של כשל איבר בשלב הסופי1. בשל שיפור של סוכנים מיקרוביאלית, טכניקות כירורגי וקידום הגדודים מדכאים, שיעור ההצלחה המוקדמת של השתלת איברים מוצק הוגדלה באופן משמעותי במהלך העשורים האחרונים2.
עם זאת, שיעורי ההישרדות לטווח ארוך לא השתפר באופן משמעותי באותו אופן3. התפתחות קו הוא הגורם העיקרי הגבלת הישרדות לטווח ארוך4,5,6. פתולוגיה זו מתאפיינת היווצרות של שכבה מרכזית המורכבת של תאים שריר חלק, המוביל היצרות מתקדמת של הכלי ואת malperfusion ברציפות של האיבר המוצק מושתלים. ב השתלות לב המטופלים, נגעים קו ניתן לאבחן עד 75% מהחולים 3 שנים לאחר השתלת7.
. הפתופסולוגיה של קו-קו עדיין לא מובן לגמרי זה נראה קשור לגורמים אימונולוגיים ושאינם אימונולוגיים רבים, המובילים לנזק אנדותל עם הפעלה אנדותל הבאים בתפקוד בלתי מתפקדים8. עד כה, לא קיימת אפשרות טיפול סיבתי למניעת קו, ומדגיש את הצורך במודל בעל חיים קטן שהוא מהווה כדי ללמוד את היווצרות והטיפול הפוטנציאלי של קו.
עם שימוש במודלים השתלת אבי העורקים murine, קו כמו נגעים ניתן לראות 4 שבועות לאחר ההשתלה. נגעים אלה מורכבים בעיקר של תאי שריר וסקולריים חלקה, ובכך, דמוי הפתולוגיה האנושית. בגלל מגוון רחב של טרנסגניים לנקוש עכברים, השימוש במודלים העכבר בפתווגיות הקשורות להשתלות מציע הזדמנות ייחודית לזהות אפשרויות טיפוליות חדשות ולהבין את התפתחותם. בשל הקוטר הקטן של כלי הושתל עם זאת, השימוש במודלים העכבר משויך בדרך כלל עם עקומות למידה ארוכות ושיעור התחלתי בסיבוך גבוה9. עם המבוא של טכניקת השרוול שאינה תפר, החלק המאתגר ביותר של המבצע ניתן להקל וקוטר ההשקה נשמר באופן קבוע10,11.
Protocol
Representative Results
Discussion
השתלת האלופתיה כרונית היא הגורם העיקרי של אובדן השתל מאוחר לאחר השתלת איברים מוצק של הלב וכנראה הכליות והריאות האלושתלים8. עד כה, לא ניתן לפתח משטר תרפויטי מסיבתי על מנת למנוע היווצרות של קו.
הפתופסיולוגיה של קו הוא רב עצרת וכרוך היבטים אימונולוגיים ושאינם אימו…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
לא.
Materials
| Balb-c Mice (H2-d) | Charles River | Strain# 028 | Donor animal |
| Bipolar cautery system | ERBE | ICC 50 / 20195-023 | Bipolar cautery |
| C57BL/6J (H-2b) | Charles River | Strain# 027 | Recipient animal |
| Halsey Needle Holders | FST | 12501-12 | Needle Holder |
| Halsted-Mosquito Forceps | AESCULAP | BH111R | Curved Clamp |
| Medical Polyimide Tubing | Nordson MEDICAL | 141-0031 | Cuff-Material |
| Micro Serrefines | FST | 18055-04 | Micro Vessel Clip |
| Micro-Adson Forceps (serrated) | FST | 11018-12 | Standard Forceps |
| Micro-Serrefine Clamp Applying Forceps | FST | 18057-14 | Clipapplicator |
| S&T Forceps – SuperGrip Tips (Angled 45°) | S&T | 00649-11 | Fine Forceps |
| S&T Vessel Dilating Forceps – Angled 10° (Tip diameter 0.2 mm) | S&T | 00125-11 | Vesseldilatator |
| Schott VisiLED Set | Schott | MC 1500 / S80-55 | Light |
| Stereoscopic microscope | ZEISS | SteREO Discovery.V8 | Microscope |
| Student Fine Scissors / Surgical Scissors – Sharp-Blunt | FST | 91460-11 / 14001-12 | Standard Sissors |
| Vannas-Tübingen Spring Scissors (curved, 8.5 cm) | FST | 15004-08 | Microsissors (curved) |
| Vannas-Tübingen Spring Scissors (straight, 8.5 cm) | FST | 15003-08 | Microsissors (straight) |
References
- Rana, A., et al. Survival benefit of solid-organ transplant in the United States. JAMA Surgery. 150 (3), 252-259 (2015).
- Rana, A., Godfrey, E. L. Outcomes in Solid-Organ Transplantation: Success and Stagnation. Texas Heart Institute Journal. 46 (1), 75-76 (2019).
- Meier-Kriesche, H. U., Schold, J. D., Srinivas, T. R., Kaplan, B. Lack of improvement in renal allograft survival despite a marked decrease in acute rejection rates over the most recent era. American Journal of Transplantation. 4 (3), 378-383 (2004).
- Bagnasco, S. M., Kraus, E. S. Intimal arteritis in renal allografts: new takes on an old lesion. Current Opinion in Organ Transplantation. 20 (3), 343-347 (2015).
- Hollis, I. B., Reed, B. N., Moranville, M. P. Medication management of cardiac allograft vasculopathy after heart transplantation. Pharmacotherapy. 35 (5), 489-501 (2015).
- Verleden, G. M., Raghu, G., Meyer, K. C., Glanville, A. R., Corris, P. A new classification system for chronic lung allograft dysfunction. The Journal of Heart and Lung Transplantation. 33 (2), 127-133 (2014).
- Ramzy, D., et al. Cardiac allograft vasculopathy: a review. Canadian Journal of Surgery. 48 (4), 319-327 (2005).
- Skoric, B., et al. Cardiac allograft vasculopathy: diagnosis, therapy, and prognosis. Croatian Medical Journal. 55 (6), 562-576 (2014).
- Koulack, J., et al. Development of a mouse aortic transplant model of chronic rejection. Microsurgery. 16 (2), 110-113 (1995).
- Rowinska, Z., et al. Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation – An Instructional Video. Journal of Visualized Experiments. (128), (2017).
- Dietrich, H., et al. Mouse model of transplant arteriosclerosis: role of intercellular adhesion molecule-1. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 20 (2), 343-352 (2000).
- Mähler Convenor, M., et al. FELASA recommendations for the health monitoring of mouse, rat, hamster, guinea pig and rabbit colonies in breeding and experimental units. Laboratory Animals. 48 (3), 178-192 (2014).
- Ollinger, R., et al. Blockade of p38 MAPK inhibits chronic allograft vasculopathy. Transplantation. 85 (2), 293-297 (2008).
- Thomas, M. N., et al. SDF-1/CXCR4/CXCR7 is pivotal for vascular smooth muscle cell proliferation and chronic allograft vasculopathy. Transplant International. 28 (12), 1426-1435 (2015).
- Ollinger, R., et al. Bilirubin: a natural inhibitor of vascular smooth muscle cell proliferation. Circulation. 112 (7), 1030-1039 (2005).
- Segura, A. M., Buja, L. M. Cardiac allograft vasculopathy: a complex multifactorial sequela of heart transplantation. Texas Heart Institute Journal. 40 (4), 400-402 (2013).
- McDaid, J., Scott, C. J., Kissenpfennig, A., Chen, H., Martins, P. N. The utility of animal models in developing immunosuppressive agents. European Journal of Pharmacology. 759, 295-302 (2015).
- Shi, C., Russell, M. E., Bianchi, C., Newell, J. B., Haber, E. Murine model of accelerated transplant arteriosclerosis. Circulation Research. 75 (2), 199-207 (1994).
- Koulack, J., et al. Importance of minor histocompatibility antigens in the development of allograft arteriosclerosis. Clinical Immunology and Immunopathology. 80 (3 Pt 1), 273-277 (1996).
- Maglione, M., et al. A novel technique for heterotopic vascularized pancreas transplantation in mice to assess ischemia reperfusion injury and graft pancreatitis. Surgery. 141 (5), 682-689 (2007).
- Oberhuber, R., et al. Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique. Journal of Visualized Experiments. (92), e50753 (2014).
- Nakao, A., Ogino, Y., Tahara, K., Uchida, H., Kobayashi, E. Orthotopic intestinal transplantation using the cuff method in rats: a histopathological evaluation of the anastomosis. Microsurgery. 21 (1), 12-15 (2001).
