改変非縫合カフ技術を用いたマウス子宮頸動脈大動脈移植モデル
Summary
ここでは、子宮頸部マウスモデルにおける非縫合カフ技術を用いたマウスにおける異所性大動脈移植のプロトコルを提示する。このモデルは、慢性同種移植片血管症(CAV)の基礎病理を研究するために使用することができ、その形成を防ぐために新しい治療薬を評価するのに役立ちます。
Abstract
強力な免疫抑制プロトコルの導入により、急性拒絶反応の予防と治療において明確な進歩が可能である。しかし、移植された固体臓器の長期的な結果のわずかな改善のみが過去数十年間観察することができた。この文脈において、慢性同種移植片血管障害(CAV)は依然として心臓、腎臓および肺移植における後期臓器不全の主な原因を表す。
これまでのところ、CAV開発の根本的な病因は不明のままで、効果的な治療戦略が現在欠落している理由を説明し、基礎となる病態生理学を研究するために関連する実験モデルの必要性を強調し、CAV形成。以下のプロトコルは、改変された非縫合カフ技術を用いたマウスヘテロトピック子宮頸動脈移植モデルを説明する。この技術では、胸部大動脈のセグメントが右一般的な頸動脈に配置される。非縫合カフ技術を使用することで、容易に学び、再現可能なモデルを確立することができ、縫合された血管マイクロ解毒の可能な不均一性を最小限に抑えます。
Introduction
過去60年間にわたり、固体臓器移植は実験的な手順から末期臓器不全1の治療のための標準的なケアへと進化してきた。抗菌剤の改善、外科技術、免疫抑制連隊の進歩により、固形臓器移植の早期成功率は過去数十年にわたって有意に増加した2.
しかしながら、長期移植片生存率は同様に改善されていない3.CAVの開発は、長期生存を制限する主な要因4、5、6である。この病理は、平滑筋細胞からなる同心円錐形層の形成によって特徴付けられるもので、移植された固体器官の血管の進行性の狭窄および連続した不灌流につながる。心臓移植レシピエントにおいて、CAV病変は移植後3年後の患者の最大75%で診断することができる7。
CAVの病態生理学はまだ完全には理解されていない。これは、多数の免疫学的および非免疫学的因子に関連しているようで、その後の内皮活性化および機能不全8による内皮損傷につながる。これまでのところ、CAVの予防のための因果治療オプションは存在せず、CAVの形成および潜在的な治療を研究するために再生可能な小動物モデルの必要性を強調する。
マウス大動脈移植モデルを用いると、病変のようなCAVは移植後4週間で見ることができる。これらの病変は、主に血管平滑筋細胞からなる、それによって、ヒト病理に似ている。多種多様なトランスジェニックマウスとノックアウトマウスのため、移植関連病理におけるマウスモデルの使用は、新しい治療オプションを特定し、その発達を理解するユニークな機会を提供します。しかし、移植された血管の直径が小さいため、マウスモデルの使用は、一般的に長い学習曲線および初期の高い合併症率9に関連している。非縫合カフ技術の導入により、操作のこの最も困難な部分が容易になり、アナストモシスの直径が一定に保たれます10、11。
Protocol
Representative Results
Discussion
慢性同種移植片血管障害は、心臓の固形臓器移植後の後期移植片喪失の主な原因であり、腎および肺同種移植片の可能性が高い8.これまでのところ、CAVの形成を防ぐために因果治療レジメンを開発することはできなかった。
CAVの病態生理学は多因子であり、免疫学的および非免疫学的側面16を含む。移植におけるげっ歯類モデルの使用?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
なし。
Materials
| Balb-c Mice (H2-d) | Charles River | Strain# 028 | Donor animal |
| Bipolar cautery system | ERBE | ICC 50 / 20195-023 | Bipolar cautery |
| C57BL/6J (H-2b) | Charles River | Strain# 027 | Recipient animal |
| Halsey Needle Holders | FST | 12501-12 | Needle Holder |
| Halsted-Mosquito Forceps | AESCULAP | BH111R | Curved Clamp |
| Medical Polyimide Tubing | Nordson MEDICAL | 141-0031 | Cuff-Material |
| Micro Serrefines | FST | 18055-04 | Micro Vessel Clip |
| Micro-Adson Forceps (serrated) | FST | 11018-12 | Standard Forceps |
| Micro-Serrefine Clamp Applying Forceps | FST | 18057-14 | Clipapplicator |
| S&T Forceps – SuperGrip Tips (Angled 45°) | S&T | 00649-11 | Fine Forceps |
| S&T Vessel Dilating Forceps – Angled 10° (Tip diameter 0.2 mm) | S&T | 00125-11 | Vesseldilatator |
| Schott VisiLED Set | Schott | MC 1500 / S80-55 | Light |
| Stereoscopic microscope | ZEISS | SteREO Discovery.V8 | Microscope |
| Student Fine Scissors / Surgical Scissors – Sharp-Blunt | FST | 91460-11 / 14001-12 | Standard Sissors |
| Vannas-Tübingen Spring Scissors (curved, 8.5 cm) | FST | 15004-08 | Microsissors (curved) |
| Vannas-Tübingen Spring Scissors (straight, 8.5 cm) | FST | 15003-08 | Microsissors (straight) |
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