यह प्रोटोकॉल एक माइक्रो-रेस्पिरोमेट्री सिस्टम के सेटअप और रनिंग का वर्णन करता है जिसे कोरल होलोबियंट की शारीरिक विशेषताओं की जांच के लिए नियोजित किया जा सकता है।
चयापचय गतिविधि, जिसे ऊर्जा को शामिल करने वाली जीवों की प्रक्रियाओं के योग के रूप में परिभाषित किया गया है, पृथ्वी पर जीवन के कार्य और विकास को समझने में महत्वपूर्ण महत्व है। इसलिए, जीवों की चयापचय दर को मापना जीवों की शारीरिक अवस्थाओं, उनकी पारिस्थितिक भूमिकाओं और स्थलीय और जलीय पारिस्थितिक तंत्र के भीतर प्रजातियों पर पर्यावरणीय परिवर्तन के प्रभाव को समझाने के केंद्र में है। प्रवाल भित्तियों पर, चयापचय के उपायों का उपयोग कोरल और उनके बाध्यकारी अल्गल सहजीवन (सिम्बायोडिनियासी) के बीच सहजीवन कार्य को निर्धारित करने के लिए किया गया है, साथ ही यह आकलन करने के लिए कि जलवायु परिवर्तन सहित पर्यावरणीय तनाव प्रवाल स्वास्थ्य को कैसे प्रभावित करेंगे। इस महत्व के बावजूद, तरीकों की कमी है, और इसलिए डेटा, प्रवाल संतानों में चयापचय दर माप से संबंधित है, संभवतः उनके छोटे आकार के कारण। इस अंतर को संबोधित करने के लिए, इस अध्ययन का उद्देश्य छोटे (मिलीमीटर आकार सीमा) समुद्री पशु पारिस्थितिकी के श्वसन को मापने के लिए एक कस्टम सेटअप विकसित करना है। यह कम लागत और आसान सेटअप चयापचय दर के बेहतर माप के लिए अनुमति देनी चाहिए। यह रीफ बहाली के लिए कोरल के यौन उत्पादन का उपयोग करने वाले लागू पारिस्थितिक अनुसंधान के लिए आवश्यक होगा।
श्वसन एक महत्वपूर्ण जैविक माप है जो किसी जीव की समग्र चयापचय गतिविधि को इंगित करता है, लेकिन अन्य महत्वपूर्ण लक्षणों (वृद्धि) की तरह, छोटे जीवों में मापना कठिनहै। श्वसन को ऑक्सीजन के उपयोग के माध्यम से कार्बनिक अणुओं के ऑक्सीकरण के रूप में परिभाषित किया जा सकता है। यह प्रक्रिया सेलुलर फ़ंक्शन (यानी, चयापचय) के लिए आवश्यक रासायनिक ऊर्जा उत्पन्न करती है, जो जीवों के अस्तित्व के लिए आवश्यक है। वैकल्पिक रूप से, एनारोबिक चयापचय के परिणामस्वरूप ऑक्सीजन ऋण2. श्वसन दर ऑप्टोड का उपयोग करके निर्धारित की जा सकती है जो एक बंद कक्ष में समय के साथ ऑक्सीजन एकाग्रता के उपयोग (और इसलिए कमी) को मापते हैं, एक अभ्यास जिसे आमतौर पर रेस्पिरोमेट्री3 के रूप में जाना जाता है। यह देखते हुए कि अधिकांश जीव ऑक्सीजन को स्टोर नहीं करते हैं, चयापचय की दर को श्वसन और कार्बन उपयोग के बीच सीधे संबंध के माध्यम से अनुमान लगाया जा सकता है। इस वजह से, श्वसन दर को दैनिक कार्बन उपयोग में परिवर्तित किया जा सकता है, जो विकास, प्रजनन, और पर्यावरणीय तनाव 4,5 के समय के दौरान चयापचय होमियोस्टेसिस को बनाए रखने की क्षमता जैसे महत्वपूर्ण चयापचय कार्यों को सूचित करता है, जिसमें हीटवेव की स्थिति शामिल है जो आम तौर पर कोरल में तनाव या विरंजन का कारण बनती है।
प्रवाल भित्तियाँ विश्व स्तर पर त्वरित दर से घट रही हैं। प्रवाल पशु भागीदारों (डाइनोफ्लैगलेट सिम्बायोडिनियासी, कवक, बैक्टीरिया और वायरस सहित) का एक संघ रखता है, जिसे सामूहिक रूप से “होलोबियोंट”6के रूप में जाना जाता है। जैसे-जैसे समुद्र का तापमान बढ़ता है, कोरल और इसलिए प्रवाल भित्तियाँ, जीवित रहने के लिए दबाव में बढ़ रही हैं, क्योंकि उच्च तापमान से डाइनोफ्लैगलेट सिम्बायोडिनियासी (इसके बाद सहजीवन) का नुकसान होता है, एक घटना जिसे ब्लीचिंग7 के रूप में जाना जाता है। कई पोषक तत्व अन्यथा अकार्बनिक नाइट्रोजन और फास्फोरस8 सहित oligotrophic उष्णकटिबंधीय जल में कोरल के लिए अनुपलब्ध हैं. सामना करने के लिए, कोरल अपने डाइनोफ्लैगलेट सहजीवन (सिम्बायोडिनियासी) के साथ एक बाध्यकारी पोषण सहजीवन बनाते हैं, जो प्रवाल मेजबान द्वारा आवश्यक पोषक तत्वों के बहुमत को जीवित रहने और उनके कैल्शियम कार्बोनेट कंकाल 9 जमा करने के लिए प्रदान करतेहैं। एक कामकाज सहजीवन भागीदारों10,11 के बीच कार्बन बंटवारे के उच्च स्तर की विशेषता हो सकती है, और सहजीवन के विनियमन एक गतिशील होमियोस्टेसिस12 शामिल है.
गर्मी के तनाव के दौरान, यह गतिशील विनियमन और संचार बाधित होता है, जिसके परिणामस्वरूप डिस्बिओसिस और ब्लीचिंग होती है (संदर्भ13में समीक्षा की जाती है)। चयापचय माप, जैसे प्रकाश संश्लेषण और श्वसन, इसलिए, कोरल के स्वस्थ और अनियमित, डिस्बिओटिक दोनों राज्यों को स्पष्ट करने की क्षमता रखते हैं, और जीवों के कामकाज को समझने के लिए ऑन्टोजेनी में इन प्रक्रियाओं को सटीक रूप से मापना महत्वपूर्ण है। यह विशेष रूप से महत्वपूर्ण है क्योंकि बड़े पैमाने पर विरंजन घटनाओं की आवृत्ति और परिमाण में वृद्धि होती है, सहजीवन से पोषक तत्वों के बंटवारे में परिवर्तन को प्रभावित करने की क्षमता के साथ, जहां तापमान14 में वृद्धि के रूप में कार्बन हस्तांतरण कम हो गया है। यह सहजीवन अनुक्रमण पोषक तत्वों द्वारा या कठिन-शारीरिक व्यापार-नापसंद (थर्मल सहिष्णुता में वृद्धि लेकिन मेजबान अस्तित्व 15,16,17 में कमी) से निर्देशित तंत्र के कारण हो सकता है। सहजीवन में व्यवधान सहजीवन और मेजबान दोनों से उपजी हो सकती है, हालांकि एक प्रमुख कारक सहजीवन18 के सेलुलर खराबी की संभावना है। हालांकि, समुद्री जल के तापमान में वृद्धि के कारण तनाव इस सहजीवन को अस्थिर करता है; सहजीवन से मेजबान तक कार्बन साझाकरण19,20 कम हो गया है, और प्रवाल की भुखमरी हो सकती है। यह मेजबान उपयोग में वृद्धि (“निश्चित कार्बन की वृद्धि हुई अपचय”) के कारण कोरल में कम लिपिड और कार्बोहाइड्रेट भंडार में परिलक्षित हो सकता है, संभवतः सहजीवन11 द्वारा कम साझा करने के कारण। प्रकाश संश्लेषण और कोरल के सहजीवन के श्वसन के योगदान के साथ-साथ, प्रवाल पशु के श्वसन प्रवाल स्वास्थ्य, इन भागीदारों के बीच विरंजन और पोषक तत्वों के आदान-प्रदान के प्रभावों, और holobiont के विकास, पर्यावरण परिवर्तन 8,21,22 जीवित रहने के लिए प्रासंगिक एक phenotype को समझने के लिए एक महत्वपूर्ण उपाय है. अंत में, यह देखते हुए कि कई कोरल सहजीवी हैं, श्वसन के अलावा प्रकाश संश्लेषण को चिह्नित करने के लिए रेस्पिरोमेट्री का उपयोग पी: आर अनुपात को संदर्भित करने और समझने के लिए विशेष रूप से उपयोगी है कि सहजीवन स्थिर है या नहीं (उदाहरण के लिए, संदर्भ23)।
इसलिए, पर्यावरणीय परिवर्तन, प्रवाल और उसके सहजीवन के ऊर्जा बजट में बदलाव का कारण बनते हैं, जिससे विकास में अंतर होता है14. सामना करने के लिए, प्रवाल मेजबान अपनी चयापचय मांगों को पूरा करने के लिए श्वसन और लिपिड उपयोग बढ़ा सकता है; गर्मी का तनाव इस बढ़ी हुई श्वसन14 के कारण शुद्ध उत्पादकता को 60% तक कम कर सकता है, जैसा कि घुलित ऑक्सीजन में परिवर्तन द्वारा मापा जाता है। सिम्बायोडिनियासी नाइट्रोजन आत्मसात और कार्बन प्रतिधारण14,24 को भी बढ़ा सकता है, और फिर इन भंडारों का उपयोग ऊर्जा को अपनी मरम्मत और सुरक्षात्मक तंत्र 25,26की ओर स्थानांतरित करने के लिए कर सकता है। एन और सी का संतुलन विकास को विनियमित करने के लिए महत्वपूर्ण है, और विशेष रूप से27 में पी, जो सहजीवन बहुतायत के गतिशील विनियमन के रूप में प्रकट हो सकता है। दरअसल, बड़े चट्टान विस्तार (>1,000 किमी) भर में कोरल से एकत्र सबूत पता चलता है कि मेजबान पी के विनियमन के माध्यम से सहजीवन विकास को सीमित करने की क्षमता है, हालांकि यह प्रवाल प्रजातियों27 द्वारा भिन्न होता है.
एक साथ लिया गया, ये अध्ययन पर्यावरणीय परिवर्तनों के कारण पोषक तत्वों के उत्पादन या स्थानांतरण (यानी, सहजीवन की प्रवृत्ति) में सहवर्ती कमी के साथ गर्मी सहिष्णुता के लाभ का सुझाव देते हैं। शक्तिशाली एकल-किशोर विधियों, जैसे कि सूक्ष्म-श्वासमिति के माध्यम से ऑक्सीजन के उपयोग की मात्रा निर्धारित करना, इसलिए चयापचय से संबंधित मूलभूत तंत्र को समझने के लिए उपयोग किया जाना चाहिए और फिर गर्मी सहिष्णुता अधिग्रहण को समझने जैसे संरक्षण प्रश्नों पर लागू किया जाना चाहिए। यह यहां शारीरिक उपायों के लिए एक सूक्ष्म-श्वासमिति उपकरण के रूप में प्रस्तुत किया गया है, जिसका उद्देश्य प्रवाल किशोरों और उनके अल्गल सहजीवन के बीच पोषण संबंधी संबंधों को क्वेरी करना है, लेकिन अन्य छोटे समुद्री जीवों के लिए उपयुक्त है।
जीवों द्वारा ऑक्सीजन के उपयोग या उत्पादन को उन्हें व्यक्तिगत, भली भांति बंद करके सील किए गए श्वासमिति कक्षों या ‘रेस्पिरोमीटर’ (इसके बाद कक्षों) में रखकर मापा जा सकता है, जहां ऑप्टोड3 का उपयोग करके ऑक्सीजन परिवर्तन को मापा जाता है। ऑप्टोड जांच हैं जो प्रकाश दालों का उपयोग करके ऑक्सीजन एकाग्रता को मापते हैं, और समय के साथ लॉगिंग माप श्वसन और / या प्रकाश संश्लेषण दरों की गणना की अनुमति देता है। व्यवहार में, श्वसन को मापना कोरल में प्रकाश संश्लेषण को मापने के समान है, सिवाय इसके कि कोरल कुल अंधेरे में ऊष्मायन होते हैं। कुल दैनिक प्रकाश संश्लेषण से प्रवाल और सहजीवन के कुल दैनिक श्वसन को घटाने से ऑक्सीजन अंतर (ऑक्सीजन डेल्टा)2,3में परिणाम होता है। आम तौर पर, जीव उत्पादन से अधिक ऑक्सीजन का उपयोग करते हैं, जिसके परिणामस्वरूप कमी होती है। इसे कार्बन समकक्षों में परिवर्तित किया जा सकता है क्योंकि ऑक्सीजन और कार्बन का एक निश्चित अनुपात में सेवन किया जाताहै 2. कार्बन अधिशेष विकास, बलगम संश्लेषण और प्रजनन, और अन्य आवश्यक चयापचय आवश्यकताओं12 के लिए मूंगा द्वारा इस्तेमाल किया जा सकता है.
यह प्रोटोकॉल एक सूक्ष्म-श्वसन विधि (चित्रा 1) का वर्णन करता है जो एक कस्टम-निर्मित 1.5 एमएल ग्लास चैम्बर डिज़ाइन (जीएल 25 धागे के साथ शीशी और 20 मिमी ऊंचा, टक्कर / रिज, फ्लैट-ग्राउंड रिम, और छेद के साथ पेंच टोपी के साथ) का उपयोग करके व्यक्तिगत मूंगा किशोरों के लिए श्वसन (आर) की दरों को मापने के लिए नियोजित किया गया था। फाइबरऑप्टिक ऑप्टोड (सामग्री की तालिकादेखें) ढक्कन के किनारे एक छेद के माध्यम से प्रत्येक कक्ष में डाले गए थे। प्रत्येक व्यक्ति मूंगा कक्ष के भीतर पानी के पर्याप्त मिश्रण को सुनिश्चित करने के लिए एक चुंबकीय हलचल-पट्टी के ऊपर एक कठिन जाल, प्रवाह के माध्यम से उत्तेजक प्लेट मंच के ऊपर संलग्न किया गया था। यहां प्रतिनिधि उदाहरण में, दो नियंत्रण या “रिक्त स्थान” (कक्ष जो नमूने की उपस्थिति को छोड़कर समान थे) को तीन प्रतिकृति नमूना कक्षों के समवर्ती रूप से मापा गया था, क्योंकि हमारे पास एक साथ चलने वाले कई नियंत्रक थे। हालांकि, सेटअप उदाहरण (चित्रा 2) केवल चार चैनलों के उपयोग से पता चलता है; इसे कई नियंत्रकों और कई प्रवाह-थ्रू स्टैंड का उपयोग करके बढ़ाया जा सकता है। इस प्रणाली में तापमान को पूर्व निर्धारित पानी के तापमान (नियंत्रण के लिए 27 डिग्री सेल्सियस या उदाहरण डेटा में उच्च तापमान तनाव के लिए 31 डिग्री सेल्सियस) के साथ कस्टम-निर्मित पानी के स्नान में प्रत्येक कक्ष को जलमग्न करके नियंत्रित किया जा सकता है। स्टिरर प्लेट प्लेटफॉर्म और गियर के साथ स्टिरर प्लेट किसी भी आकार की हो सकती है और ग्लास कक्षों की संख्या को समायोजित करने के लिए आवश्यकतानुसार बड़ी या छोटी बनाई जा सकती है। इस उदाहरण में, मंच और प्लेट लगभग 34 सेमी x 26 सेमी x 3 सेमी (सामग्री की तालिका) थे। ऑप्टोड का अंशांकन इस प्रयोगात्मक सेटिंग के लिए उपयुक्त पानी के तापमान और लवणता पर 0% और 100% ऑक्सीजन संतृप्ति का प्रतिनिधित्व करने वाले दो मानक समाधानों का उपयोग करके प्रत्येक रन से पहले किया गया था।
यह काम एक कस्टम-निर्मित माइक्रो-रेस्पिरोमेट्री सेटअप के निर्माण की रूपरेखा तैयार करता है जिसका उपयोग छोटे सेसाइल जलीय जीवों द्वारा खपत और उत्पादित ऑक्सीजन की मात्रा को निर्धारित करने के लिए किया जा सकता है। इस प्रोटोकॉल के महत्वपूर्ण घटकों में धब्बों सहित कक्षों की स्थापना, और respR पैकेज का उपयोग करके कम सिग्नल का अंशांकन शामिल है, जिसमें कम सिग्नल को उथले या शोर ढलानों द्वारा टाइप की गई दरों के रूप में परिभाषित किया जा सकता है। कस्टम कक्ष और इसका सेटअप कम संकेतों का भी पता लगाने की अनुमति देता है, जबकि आर पैकेज का उपयोग उन मुद्दों से बचाने में मदद करता है जिनमें उथले या शोर ढलानों की घटना परिणामों की गलत व्याख्या (जैसे, गलत-सकारात्मक) का कारण बन सकती है।
अन्य उपयोगकर्ताओं के लिए आवश्यक संभावित संशोधनों में कस्टम-निर्मित कक्ष के भीतर रुचि के जीव को सुरक्षित करना शामिल है। इस मामले में, प्लास्टिक बेस पर एकल किशोर को सुरक्षित करने के लिए एक छोटे, कठोर ज़िप-टाई और एक्वैरियम गोंद का उपयोग किया गया था, जिसे तब टाई से चिपका दिया गया था। यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि, इस प्रयोग के लिए, मूंगा किशोरों को काले प्लास्टिक की चादर पर बसाया गया था। इस प्लास्टिक ने प्रवाल किशोरों को आसानी से हटाने की अनुमति दी, जो प्रभावी रूप से प्लास्टिक से फिसल गए, ताकि हटाने के दौरान उन्हें शारीरिक रूप से नुकसान न पहुंचे। कोरल किशोर उस सब्सट्रेट से चिपक जाते हैं जिस पर वे बसते हैं, इसलिए ग्लूइंग प्रक्रिया के लिए उनके हटाने की सुविधा के लिए कृत्रिम पेप्टाइड16 का उपयोग करके उन्हें समान प्लास्टिक सामग्री पर व्यवस्थित करने की सिफारिश की जाती है। आगे तनाव से निपटने और श्वसन प्रतिक्रिया पर प्रभाव को कम करने के लिए, यह कोरल 1-2 सप्ताह के लिए acclimate करने के लिए ज़िप संबंधों के लिए घुड़सवार कोरल की अनुमति देने के लिए सिफारिश की है, के रूप में कई वयस्क मूंगा तनाव प्रयोगों में आम है. ढक्कन में स्पॉट के ऊपर जीव को सुरक्षित करने और पानी के संचलन की अनुमति देने के लिए अन्य संशोधनों की आवश्यकता हो सकती है। एक अन्य महत्वपूर्ण समस्या निवारण चरण में सिग्नल का पता लगाना शामिल है, विशेष रूप से ऑक्सीजन समय-श्रृंखला के ढलान पर जहां दरें निर्धारित की जानी चाहिए। अंततः, यह स्पष्ट रूप से अस्थिर डेटा को बाहर करने के लिए अच्छे निर्णय का उपयोग करने के संयोजन के लिए नीचे आता है, और डेटा के रैखिक क्षेत्रों की पहचान करके दरों को लगातार चुने गए क्षेत्रों से या स्वचालित रूप से निकालने की अनुमति देने के लिए respR के भीतर कार्य करता है। ऐसा करने के तरीके के और उदाहरण respR वेबसाइट पर उपलब्ध हैं।
इस विधि को श्वसन की निचली सीमा के माप को बेहद छोटे, सेसाइल समुद्री अकशेरुकी जीवों तक विस्तारित करने के लिए विकसित किया गया था। स्पष्ट सीमा यह है कि यह प्रोटोकॉल बड़े बायोमास के लिए डिज़ाइन किए गए प्रोटोकॉल की तुलना में झूठी-सकारात्मक होने की अधिक संभावना हो सकती है। हालांकि, यह देखते हुए कि यह डिजाइन का बिंदु था-इन निचली सीमाओं को मापने के लिए-इसे डिजाइन में फैक्टर किया गया है, और प्रक्रिया का उपयोग झूठी-सकारात्मकता के खिलाफ बेहतर सुरक्षा के लिए respR पैकेज के साथ किया जा सकता है। यह भी स्वीकार करना महत्वपूर्ण है कि श्वसन30 को मापने के लिए अन्य प्रणालियां मौजूद हैं, और छोटे जीवों की माप, जिसमें व्यक्तिगत कोपपोड्स31 पर रेस्पिरोमेट्री शामिल है, इस (~ 0.5-1 एमएल) की तुलना में छोटी मात्रा में, लेकिन या तो महंगे हैं या विशिष्ट घटकों (सरगर्मी क्षमता) की कमी है। हालांकि, यह प्रणाली वाणिज्यिक प्रणालियों (जैसे, कोर माइक्रोप्लेट सिस्टम) की तुलना में ओपन-सोर्स और सापेक्ष कम लागत वाली है। इस प्रणाली में सरगर्मी जैसे प्रमुख पद्धतिगत विचार भी शामिल हैं, जिनमें अन्य प्रणालियों की कमी हो सकती है। कई समुद्री जीवों (जैसे, तैराकी के माध्यम से कोपपोड्स) के प्राकृतिक जल मिश्रण को दोहराने के लिए आंतरिक सरगर्मी बार सुविधा आवश्यक है, जो अक्सर संभव नहीं होता है और डेटा को काफी हद तक अनुपयोगी बना सकता है। इसके विपरीत, उपलब्ध अन्य मिश्रण विधियों में पूरे रेस्पिरोमीटर को एक विशाल घुमाव बेंच पर रखना शामिल है, जिसके लिए अतिरिक्त उपकरण की आवश्यकता होती है और कंपन के माध्यम से मिश्रण या मिश्रण में सीमित सफलता होती है, जिससे जीव को गड़बड़ी हो सकती है। इस कारण से, यह एकमात्र प्रणाली है जो किशोर कोरल या अन्य बहुत छोटे सेसाइल जीवों पर श्वासमिति कर सकती है। संदर्भ के लिए, यहां शामिल नमूनों की आकार सीमा 2.1 से 3.6 पॉलीप्स (केवल कुछ महीनों के अनुरूप) तक थी, जिसमें न्यूनतम से अधिकतम औसत क्षेत्र 1.3 से 4.5 मिमी2 था।
रेस्पिरोमेट्री पारिस्थितिक अध्ययन में एक मौलिक उपाय है, और इस उद्देश्य के लिए कई तरीके मौजूद हैं। इन मौजूदा तरीकों में से अधिकांश, तथापि, पूरे मछली, मूंगा टुकड़े, या समुद्री घास 32,33,34 सहित उच्च बायोमास नमूने, लक्ष्य. यह विधि व्यक्तिगत प्रवाल किशोरों का उपयोग करने वाली पहली विधि है। इसके अलावा, इस पद्धति के लिए कई संभावित अनुप्रयोग हैं, क्योंकि यह जीव के कामकाज के बारे में महत्वपूर्ण शारीरिक जानकारी प्रदान करता है। यह आधारभूत स्वास्थ्य अनुमानों35 को चिह्नित करने के लिए देख रहे अध्ययनों के लिए महत्वपूर्ण हो सकता है, प्रवाल ऑन्टोजेनी के दौरान तीव्र या दीर्घकालिक तनाव की भूमिका को समझें जैसे कि गर्मीतनाव 36, या थ्रेसहोल्ड प्रदान करने के लिए जो प्रबंधक प्रवाल भित्तियों के स्वास्थ्य की रक्षा और सुधार में मदद करने के लिए सेट कर सकते हैं37. यह देखते हुए कि मूंगा एक होलोबियंट है और सहजीवन समुदाय इस स्तर पर अपेक्षाकृत लचीला है और जीवन के पहले वर्ष38 के दौरान, समय के साथ समुदायों में परिवर्तन के साथ श्वसन डेटा को जोड़ना दिलचस्प होगा, ताकि जीव के कामकाज को पूरी तरह से प्रासंगिक बनाया जा सके। महत्वपूर्ण रूप से, यह विधि ‘ओपन साइंस’ तकनीकों में योगदान देती है जो कस्टम प्रयोगात्मक सेटअप बनाने के लिए एक रूपरेखा प्रदान करने में मदद करती है जिसे खुले तौर पर साझा, सुधार और मानकीकृत किया जा सकता है।
The authors have nothing to disclose.
लेखक सैम नूनन को उनकी मदद और सलाह के लिए धन्यवाद देना चाहते हैं, प्रारंभिक रेस्पिरोमेट्री कक्षों के उपयोग के लिए स्वेन उथिक, उनके इंजीनियरिंग चित्रण के लिए बेन शेलाब, और रेस्पिरोमेट्री चैंबर एडेप्टर और धारकों के बीस्पोक मशीनिंग के लिए ऑस्ट्रेलियाई समुद्री विज्ञान कार्यशाला के लिए कार्यशाला। कोरल को निम्नलिखित ग्रेट बैरियर रीफ मरीन पार्क परमिट के तहत AIMS G12/35236.1 के तहत एकत्र किया गया था। कोरल को नैतिकता परमिट की आवश्यकता नहीं है।
Cost | |||
(1.1 – 1.6) Custom respirometry chambers | LabGlass Party Ldt. | 1.5 ml | $407.26 |
1.1 lids | AIMS workshop | Vial GL25 thread | ~$10 |
1.2 fiber-optics spots (FireStingO2 II fiberoptic optodes) | PyroScience | Oxygen sensor spots, 125 µm PET foil, Ø5 mm, with optical isolation, SN: 183801947 | $41.25 AUD each |
1.3 individual organism | NA | NA | NA |
1.4 flow-through stand | AIMS workshop | Custom | included in points 5 and 6 price (the workshop gave me an estimate of the lids, stand with gears, motor, incubation flow through |
1.5 magnetic stirrer | Any manufactuer is suitable | NA | ~$2? |
1.6 glass chamber (vial GL25 thread x 20 mm high, with bump/ridge, flat-ground rim, screw cap with hole, Labglass Pty Ltd, Stafford QLD) | Labglass Pty Ltd, Stafford QLD | Vial GL25 thread x 20 mm high, with bump/ridge, flat-ground rim, screw cap with hole | $50.9 AUD |
2 FireSting controller (2) | PyroSciences | NA | 4 sensors is 4000 Euros. 8 sensors used here. |
3 computer | NA | NA | NA |
4 heater/chiller | VWR International | NA | Small models around $4,000 AUD |
5 respirometry plate platform | AIMS workshop | 34 cm x 26 cm x 3 cm (although any dimensions are adequate to fit desired number of chambers) | $1250 AUD |
6 stirrer plate with gears (7) | AIMS workshop | 34 cm x 26 cm x 3 cm | $1250 AUD |
8 powered by the motor | AIMS workshop | Custom | $700 AUD |
9 power supply | Non-specific | NA | ~$300 AUD |
Aquarium glue | Seachem reef glue | 20g | $14 |
Oxygen Logger Software | PyroScience | NA | NA |
Polypipe and connectors | John Guest | NA | $20 |
Sodium Sulfite | Sigma | S0505-250G (CAS number 7757-83-7) | $54 |