Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- داء السكري من النوع 1 هو مرض بشري يدمر فيه الجهاز المناعي الأنسولين الذي يصنع خلايا بيتا في البنكرياس. يمكن أن تحفز ستريبتوزوسين مرض السكري من النوع 1 في حمار وحشي. أولا، تخدير سمكة في محلول من 2-phenoxyethanol في ماء السمك. خذ السمك ووضعه على طبق بيتري، الجانب البطني المواجه لأعلى. حساب جرعة الستربتوسوسين على أساس 0.35 ملليغرام لكل غرام من وزن السمك وتمييعه في محلول ملحي.
إدارة streptozocin عن طريق الحقن داخل الصفاق تحت حزام الحوض على الجانب البطني من حمار وحشي. ستريبتوزوسين يشبه هيكليا N-أسيتيل جلوكوسامين, ليغاند الذي يربط مستقبلات GLUT2 على خلايا بيتا البنكرياس, مما يؤدي إلى إفراز الأنسولين.
عند دخول خلايا بيتا، يؤدي الستريبتوزوسين إلى استجابة مناعية تؤدي إلى إطلاق المستضدات الذاتية.
في المثال التالي، سوف نولد نموذج حمار وحشي من النوع 1 من مرض السكري. إعداد خزان الانتعاش مع مياه السمك العادي وخزان مخدر من مياه السمك مع تخفيف 1 إلى 1000 من 2-phenoxyethanol. تحت غطاء الدخان، وإعداد حل 0.3٪ من الستريبتوزوسين أو STZ بإضافة 6 ملليغرام من STZ إلى 2 ملليلتر من كلوريد الصوديوم 0.09٪ ووضع الحل على الفور على الجليد.
في أنبوب منفصل، aliquot ما يكفي من المالحة للسيطرة على الأسماك. ملء حقنة نصف CC مجهزة إبرة قياس 27 و 1/2 مع STZ، أو حلول التحكم، وضمان عدم محاصرة فقاعات الهواء. تخدير سمكة واحدة عن طريق وضعها في الماء مخدر والانتظار حتى تتوقف حركة السباحة، حوالي دقيقة إلى دقيقتين.
بمجرد تخديرها، ضع السمكة لفترة وجيزة على منشفة ورقية لامتصاص أي ماء زائد.
بعد الحقن، ضع السمكة في خزان مياه الإنعاش وراقبها لنشاط السباحة العادي. بعد حقن ما يكفي من الأسماك للتجربة، نقلها إلى خزانات المعيشة العادية والحفاظ عليها عند درجة حرارة تتراوح بين 22 و24 درجة مئوية.
