Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Сахарный диабет 1 типа является заболеванием человека, при котором иммунная система разрушает инсулин решений бета-клеток в поджелудочной железе. Стрептозоцин может вызвать сахарный диабет 1 типа у зебры. Во-первых, обезболите рыбу в растворе 2-феноксиэтанола в рыбной воде. Возьмите рыбу и поместите ее на чашку Петри, вентровую сторону, обращенную вверх. Рассчитайте дозу стрептозоцина на основе 0,35 миллиграмма на грамм веса рыбы и разбавьте ее в солевой раствор.
Администрирование стрептозоцина путем внутриперитонеальной инъекции ниже тазового пояса на брюшной стороне зебры. Стрептозоцин структурно похож на N-ацетилглукозамин, лиганд, который связывает рецептор GLUT2 на бета-клетки поджелудочной железы, что приводит к секреции инсулина. Таким образом, стрептозоцин связывается с рецепторами GLUT2
При входе в бета-клетки, стрептозоцин вызывает иммунный ответ, ведущий к высвобождению аутоантигенов. Аутоантигены вызывают иммунную систему признать бета-клетки как иностранные и уничтожить их, что приводит к снижению уровня инсулина. Administer повторные дозы стрептозоцина в дни три и пять, а затем еженедельные дозы, по одному каждые семь дней для поддержания иммунного ответа.
В следующем примере мы будем генерировать модель зебры типа 1 сахарный диабет. Для создания зебры с сахарным диабетом, подготовить восстановительный резервуар с нормальной рыбной водой и анестезией бак рыбной воды с 1 до 1000 разбавления 2-феноксиэтанола. Под капотом дыма, подготовить 0,3% раствор стрептозоцина или ППП, добавив 6 миллиграммов ППП до 2 миллилитров 0,09% хлорида натрия и немедленно поместить раствор на лед.
В отдельной трубке, aliquot достаточно солевого раствора для контроля рыбы. Заполните половину CC шприц оснащен 27 и 1 / 2 калибровочной иглы с СТЗ, или контрольных решений, гарантируя, что не пузырьки воздуха в ловушке.
После анестезии, кратко поместите рыбу на бумажное полотенце, чтобы поглотить излишки воды. Затем поместите рыбу в лодку взвешивания и взвесить его. Далее, поместите рыбу на твердую поверхность. Затем вставьте иглу мимо скошенной в задний аспект брюшной брюшной полости и ввишите либо 0,35 миллиграмма на грамм СТЫ или эквивалентный объем раствора контроля в брюшной полости рыбы.
После инъекции поместите рыбу в резервуар для восстановления воды и следите за ней для нормальной плавательной деятельности. После инъекций достаточно рыбы для эксперимента, перенесите их в нормальные живые резервуары и поддерживайте при температуре от 22 до 24 градусов по Цельсию. Пониженная температура имеет решающее значение для эффективной индукции гипергликемии.
